一种微藻-细菌-真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法技术

本发明专利技术提供一种微藻

【技术实现步骤摘要】
一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法


[0001]本专利技术属于生物环保
，具体涉及一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法。

技术介绍

[0002]随着畜禽养殖规模逐渐规模化和集约化，养殖粪污排放量日益庞大，寻求粪污资源化利用新模式已成必然选择。粪污沼气工程是实现资源化的绝佳方式，沼液是沼气工程所带来的高污染产物，富含氮、磷、钾、腐殖酸、活性酶等养分，可为微藻生长提供碳源和氮源等营养成分，但若直接用于微藻的培养，沼液中的高浓度氨氮和重金属等将会对微藻产生一定的毒害作用，难以达到良好的处理效果。因此，沼液的预处理技术受到广泛关注。传统的沼液处理技术大多都采用序批式活性污泥法、生物膜反应器以及相互组合的方法，存在处理效率较低、成本较大等问题。藻菌共生体在呼吸代谢、物质代谢等方面的互利特性利于共生体系在沼液中生长、高效脱氮除磷和去除重金属，因此菌藻共生技术在沼液净化领域具有很好的应用前景。
[0003]脚金内酯及其类似物(Strigolactone，SL)能够有效提高了藻类共培养系统中沼液和沼气的净化效率。GR24作为一种活性最高的人工合成的独脚金内酯在藻菌共生体系中应用最广，GR24不仅能够在较低的浓度水平下诱导丛枝真菌菌丝分枝同时也能够诱导增强藻类共培养系统的新陈代谢和光合作用，促进共生体的快速生长。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，该处理方法对沼液中的COD、TN、TP、TC具有良好的去除效果。
[0005]为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术的技术方案具体如下：
[0006]一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，按以下步骤进行：
[0007]步骤一：微藻的培养：将微藻利用BG
‑
11培养基进行扩培；
[0008]步骤二：将细菌进行培养；
[0009]步骤三：将真菌先进行预培养，然后经过洗涤后进行匀化处理，利用待处理的沼液对匀化后的真菌菌株进行驯化培养，得到耐受真菌菌菇株；
[0010]步骤四：将步骤一的微藻和步骤二的细菌进行离心，离心后获得的残留物接种在无菌BG11
‑
LB培养基中进行培养，形成微藻
‑
细菌的共生体；
[0011]步骤五：微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体的建立：将步骤三得到的真菌菌菇株，加入步骤四的微藻
‑
细菌共生体的培养箱中，形成微藻
‑
细菌
‑
真菌共生系统，将共生体在恒温摇床中培养；
[0012]步骤六：将步骤五得到的微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体转移到沼液中，所述沼液中加入
不同浓度的独脚金内酯(GR24)，对沼液进行处理，得到处理后的沼液。
[0013]优选的，步骤一中BG
‑
11培养基的组成为：NaNO
3 1.5g L
‑1、K2HPO4·
3H2O 0.04g L
‑1、KH2PO4·
3H2O 0.2g L
‑1、乙二胺四乙酸0.5mg L
‑1、柠檬酸铁铵5mg L
‑1、柠檬酸5mg L
‑1、Na2CO
3 0.025mg L
‑1和微量金属溶液1mL L
‑1。
[0014]优选的，步骤一所述的扩培，扩培光照利用冷白色LED灯，其光照强度为200μmol m
‑2s
‑1，光暗比设置为12h(昼):12h(夜)，扩培温度控制在25
±
2℃，扩培时间为7天。
[0015]优选的，步骤二的细菌培养具体为：将细菌在25
±
1℃的温度条件下，接种体于恒温摇床上预培养7d(摇床转速为150rpm)，将获得的细菌在无菌蒸馏水中洗涤，然后用100ml无菌蒸馏水匀浆。
[0016]优选的，步骤二所述的细菌为地衣芽孢杆菌。
[0017]优选的，步骤三所述的真菌为灵芝菌和平菇。
[0018]优选的，步骤四中BG11
‑
LB固体培养基的条件为：色氨酸:10g/L，酵母浸膏:5g/L，氯化钠:10g/L，琼脂粉:15g/L，pH:7.0
‑
7.2。
[0019]优选的，步骤五中的培养条件为160rpm/25
±
2℃，培养时间为2
‑
3天。
[0020]优选的，步骤六中所述沼液中独脚金内酯GR24的添加浓度为10
‑9和10
‑
11
M。
[0021]优选的，步骤六的处理温度为25℃，光照强度为150μmol
·
m
‑2·
s
‑1、光暗时间比为14h光照/10h黑暗；处理时间为7d。
[0022]本专利技术的有益效果
[0023]本专利技术提供一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，本专利技术充分利用微藻、细菌和真菌之间的互利共生关系，构建的微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体具有较强的生长性能稳定，通过微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，可以有效提高藻菌共生体对沼液的净化效率。
[0024]本专利技术的操作简单易行，制备成本较为低廉，具有大规模推广应用的潜力。
附图说明
[0025]图1为本专利技术实施例1
‑
2及对比例1
‑
2不同处理方式下反应7天后沼液中COD的削减效果；
[0026]图2为本专利技术实施例1
‑
2及对比例1
‑
2不同处理方式下反应7天后沼液中TN的削减效果；
[0027]图3为本专利技术实施例1
‑
2及对比例1
‑
2不同处理方式下反应7天后沼液中TP的削减效果；
[0028]图4为本专利技术实施例1
‑
2及对比例1
‑
2不同处理方式下反应7天后沼液中TC的削减效果。
具体实施方式
[0029]一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，按以下步骤进行：
[0030]步骤一：微藻的培养：将微藻利用BG
‑
11培养基进行扩培；所述的扩培条件优选为：扩培光照利用冷白色LED灯，其光照强度为200μmol m...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，其特征在于，按以下步骤进行：步骤一：微藻的培养：将微藻利用BG
‑
11培养基进行扩培；步骤二：将细菌进行培养；步骤三：将真菌先进行预培养，然后经过洗涤后进行匀化处理，利用待处理的沼液对匀化后的真菌菌株进行驯化培养，得到耐受真菌菌菇株；步骤四：将步骤一的微藻和步骤二的细菌进行离心，离心后获得的残留物接种在无菌BG11
‑
LB培养基中进行培养，形成微藻
‑
细菌的共生体；步骤五：微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体的建立：将步骤三得到的真菌菌菇株，加入步骤四的微藻
‑
细菌共生体的培养箱中，形成微藻
‑
细菌
‑
真菌共生系统，将共生体在恒温摇床中培养；步骤六：将步骤五得到的微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体转移到沼液中，所述沼液中加入不同浓度的独脚金内酯(GR24)，对沼液进行处理，得到处理后的沼液。2.根据权利要求1所述的一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，其特征在于，步骤一中BG
‑
11培养基的组成为：NaNO
3 1.5g L
‑1、K2HPO4·
3H2O 0.04g L
‑1、KH2PO4·
3H2O 0.2g L
‑1、乙二胺四乙酸0.5mg L
‑1、柠檬酸铁铵5mg L
‑1、柠檬酸5mg L
‑1、Na2CO30.025mg L
‑1和微量金属溶液1mL L
‑1。3.根据权利要求1所述的一种微藻
‑
细菌
‑
真菌共生体联合独脚金内酯类似物生物净化沼液的处理方法，其特征在于，步骤一所述的扩培，扩培光照利用冷白色LED灯，其光照强度为200μmol m
‑2s
‑1，光暗比设置为12h(昼):12h(夜)，扩培温度控制在25
±
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玮琳，王准，李文君，刘韬，丁旭，马文晨，刘阳，姜永莉，杨迪，
申请(专利权)人：吉林国际旅行卫生保健中心长春海关口岸门诊部，
类型：发明
国别省市：