一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，属于农药技术领域，所述miRNA为miR

【技术实现步骤摘要】
一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用


[0001]本专利技术涉及农药
，具体是一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用。

技术介绍

[0002]烟粉虱属于半翅目粉虱科，是一种世界性农业害虫，可危害400多种植物，传播200多种病毒。溴氰虫酰胺作为第一个广谱性的双酰胺类杀虫剂，可以通过结合并激活昆虫体内的鱼尼丁受体，导致内质网Ca
2+
大量释放，致使细胞内外钙离子失衡，钙离子与肌钙蛋白结合后引起肌肉收缩，最终导致昆虫死亡，但目前烟粉虱对溴氰虫酰胺产生了明显的抗药性。在我们之前的研究中发现，细胞色素P450基因CYP6CX3的过表达参与了烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗药性，因此，P450基因的上调可能是双酰胺类杀虫剂的基本抗性机制；然而，我们目前对P450基因的调控机制知之甚少，且尚不清楚miRNA在调节CYP6CX3和在烟粉虱对溴氰虫酰胺抗药性中的作用。
[0003]miRNA(microRNA)是内源性的非编码单链小RNA，其可以通过与靶基因mRNA碱基互补配对结合从而降解靶基因或抑制靶基因的表达。miRNA可通过调控靶标或解毒酶的表达参与害虫对双酰胺类杀虫剂的抗性，例如，miR
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7a和miR
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8519能够上调表达鱼尼丁受体(双酰胺类杀虫剂的靶标)，从而增加小菜蛾对氯虫苯甲酰胺(一种双酰胺类药剂品种)的抗性；miRNA同样可以调控代谢酶的基因表达，从而增加害虫对杀虫剂的抗性，例如，miR
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2b
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3p能够调控CYP9F2的上调表达，从而增加小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性；MiR
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2～13～71簇能够通过调控CYP9J35和CYP325BG3的表达，从而参与淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性。
[0004]miR
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276是一条在昆虫体内普遍存在的miRNA，例如miR
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276在冈比亚按蚊及埃及伊蚊体内具有很高的表达丰度；miR
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276b
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3p能够通过调控orb2基因的表达，参与东方果实蝇精子的发生；目前，尚未报道过miR
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3p调控抗性相关基因及其在调控害虫对杀虫剂抗性中的应用。
[0005]为了克服烟粉虱对溴氰虫酰胺杀虫剂较高的抗药性，提高烟粉虱的防治效果，减少田间杀虫药剂的使用量，有必要寻找新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本专利技术发现了miR
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3p可以通过调控CYP6CX3的表达进一步参与烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗药性，并提出了调控烟粉虱体内miR
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3p表达量的方法，为研发新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法奠定了良好的理论和应用基础。
[0007]本专利技术技术方案如下：
[0008]一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，所述miRNA为miR
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3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]优选的，一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，应用方法是调控烟粉虱体内的miR
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3p表达量。
[0010]本专利技术发现，miR
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3p能够通过与靶基因mRNA碱基互补配对而抑制基因CYP6CX3的表达，从而降低烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性；因此，通过调控烟粉虱体内的miR
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3p表达量，可以调控CYP6CX3的表达，从而调控烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性。
[0011]优选的，所述调控烟粉虱体内的miR
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3p表达量的方法是在烟粉虱体内加入miR
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3p类似物或miR
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3p抑制剂。
[0012]优选的，所述miR
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3p类似物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0013]优选的，所述miR
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3p抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
[0014]通过在烟粉虱体内加入miR
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3p类似物可以降低烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性；通过在烟粉虱体内加入miR
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3p抑制剂可以增加烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性。
[0015]优选的，所述在烟粉虱体内加入miR
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3p类似物或miR
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3p抑制剂的方法为：用含有miR
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3p类似物或含有miR
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3p抑制剂的蔗糖水喂食烟粉虱。
[0016]优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/L。
[0017]优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.2mg/L。
[0018]优选的，所述miR
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3p类似物或miR
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3p抑制剂在蔗糖水中的浓度为20μM。
[0019]一种调控生物体内miRNA表达量的方法，是用含有目的miRNA类似物或目的miRNA抑制剂的蔗糖水对生物体进行喂食。
[0020]优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/L。
[0021]有益效果：
[0022]本专利技术发现并证实了miR
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3p可以调控CYP6CX3的表达进而调控烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性，并提供了一种调控烟粉虱体内miR
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3p表达量的方法，为研发新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法奠定了良好的理论和应用基础。
附图说明
[0023]图1为溴氰虫酰胺处理后烟粉虱体内CYP6CX3的表达水平；
[0024]图2为溴氰虫酰胺处理后烟粉虱体内10种相关miRNA的表达水平；
[0025]图3为饲喂miR
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3p agomir和miR
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3p antagomir后对烟粉虱体内miR
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3p和CYP6CX3表达水平的影响；
[0026]图4为不同浓度的溴氰虫酰胺处理取食miR
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3p a本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种miRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，其特征在于，所述miRNA为miR
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3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，应用方法是调控烟粉虱体内的miR
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3p表达量。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述调控烟粉虱体内的miR
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3p表达量的方法是在烟粉虱体内加入miR
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3p类似物或miR
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3p抑制剂。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述miR
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3p类似物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述miR
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3p抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述在烟粉虱...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭磊，温赞荣，李凯欣，张壮，梁妮，陈沫先，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：