云南松属植物的松塔提取物及其制备方法和药物用途技术

本发明专利技术“云南松属植物的松塔提取物及其制备方法和药物用途”涉及云南产松属植物华山松、云南松、乔松和／或思茅松的松塔提取物的制备方法及其医药用途。本发明专利技术的云南松属植物的松塔提取物由经粉碎的松塔以乙醇溶液浸泡、热水提取、碱水室温提取后的滤液再醇沉提取而得，本发明专利技术得到的云南松属植物松塔提取物能有效抑制艾滋病毒（ＨＩＶ），可以预期发展成为防治艾滋病的药物。药效学试验结果显示：云南松属植物的松塔提取物具有体外抗ＨＩＶ－１活性，其治疗指数大于５０（５９．９９－５１５．４８）。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
具体而言，本专利技术涉及云南松属植物的松塔提取物及其医药用途。该提取物表现出有效的体外抑制艾滋病病毒复制作用，治疗指数较高，可以预期发展成为防治艾滋病的药物。
技术介绍
艾滋病的医学全名为“获得性免疫缺陷综合征”(AcquiredImmune Deficiency Syndrome，即AIDS)，由人类免疫缺陷病毒(HIV，又称艾滋病病毒)引起。HIV病毒是一种能攻击人体免疫系统的病毒，它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴细胞作为攻击目标，大量吞噬、破坏T4淋巴细胞，从而破坏人的免疫系统，最终使免疫系统崩溃，使人体因丧失对各种疾病的抵抗能力而发病，从而发生多种感染或肿瘤，最后导致死亡。当HIV感染者的免疫功能受到病毒的严重破坏、以至不能维持最低的抗病能力时，感染者便发展为艾滋病病人。 HIV在病毒分类学上属逆转录病毒科(Retroviridae)慢病毒属(lentivirus)，目前已发现两种HIV病毒株系，分别为HIV-1和HIV-2。两者具有相似的病毒结构和传播途径。HIV-2主要分布于非洲西部，在欧洲和美洲的一些感染者中也被检测到。其毒力和传播力都低于HIV-1，引起的艾滋病病程较慢且较缓和。HIV-1广泛分布于世界各地，是引起全世界AIDS流行的病原，目前HIV的研究也是以HIV-1为主进行的。 艾滋病的危害席卷全球，蔓延之势十分迅猛。1984年，全世界报告的艾滋病患者不足3000人。联合国艾滋病规划署发布的《2008艾滋病流行状况报告》指出截至2007年底，艾滋病已经导致2500万人死亡，另有3300万人受感染，其中我国有70万人。我国自1985年首次发现HIV病毒感染者，至今已有60～80万人发生了感染，专家估计，如果不迅速采取有效的预防措施，按目前的年平均30％的增长速度，到2010年，我国的HIV感染者将超过1000万。在非洲的有些国家，HIV的感染率达总人口30％以上。因此，预防和治疗艾滋病，已不仅仅是挽救个人生命的问题，而是关系到民族存亡的大事。 艾滋病目前仍是不治之症。历史上许多曾严重威胁人类健康的疾病，都因开发出有效的疫苗而被控制甚至消灭，例如天花、小儿麻痹、麻疹等。但目前人类还没有研制成功艾滋病疫苗，科学家们仍在努力。因此，研制抗HIV药物迫在眉睫。目前，艾滋病的治疗一方面是抑制病毒，增强免疫功能，另一方面是防治机会性感染，缓解症状、延长生命。经过几年的实践证明，最行之有效的治疗措施是增加使用有效的抗HIV药物，通常使用联合疗法，包括核苷类(如美国FDA推荐应用的AZT(重氮脱氧胸苷))、非核苷类及蛋白酶抑制剂在内的两种或多种药物。这样的联合疗法被认为是高效的抗逆转录病毒治疗(HAART，或称“鸡尾酒疗法”)。但HAART并不能根除体内的病毒，而长期的药物治疗也会带来一些副作用，且价格较高。 中国经济发展的现状决定，在艾滋病的治疗上无法承担美国FDA推荐应用的AZT的费用(每人每年8000-10000美金)，更无法承受“鸡尾酒疗法”需要的每人每年高达15000美金的治疗费用。我们只能结合中国的现状，充分利用本国资源，发掘中国医药学宝库，研发高效、低毒、廉价的抗HIV药物，而我们的前期研究已经看到了希望。 松属植物全世界约有100种，分布于北半球直达极圈，在热带和亚热带地区只生于山地。我国有50余种松属植物，分布极广。云南产松树主要有六种，包括①华山松(Pinus armandii Franch)，山西、陕西、贵州、四川、甘肃等省亦有分布；②乔松(P.griffithiiM′delland)；③毛枝五叶松(P.wangii Hu)；④马尾松(P.massoniaLamb.)，四川也产；⑤云南松(P.yunnanensis Fr.)，四川、广西有产；⑥思茅松(P.szemaoensis Cheng et Lau)，特产于云南思茅。松树松塔、松子壳与松子仁中的成分包括萜类、木质素、黄酮、芪类、挥发油、维生素类、棕榈碱、矿物质、多糖、蛋白质与脂肪等。长期以来，松子仁作为营养食品，或称长寿食品、仙人食品，而松塔、松子壳则仅作农家燃料。日本南部九州地区民间长期用日本白松(Pinuspariflora Sieb.et Zucc)松塔煎水喝治疗胃癌；在我国，仅白皮松(Pinusbungeana)松塔为药典用药。白皮松松塔性温味苦，祛痰、止咳、平喘，主治慢性气管炎、哮喘、咳嗽痰多。 日本学者Sakagami H.等对日本白松松塔的抗肿瘤活性研究中发现，其热水提取物可以对移植到小鼠体内的各种固体和腹水肿瘤细胞产生抑制作用；同时发现日本白松松塔热水提取物能够激活小鼠巨嗜细胞；Sakagami等学者还发现日本白松松塔的提取物有抗HIV的功效(专利技术专利申请号EP88110142A)。我国吕永俊教授、李好枝教授在对国内的油松、东北红松等松树的活性成分研究中发现，松塔和松子壳均有抗肿瘤活性，但其活性强度具有种的差异。根据中外文献检索查询，除日本学者提出日本白松松塔具有抗HIV作用外，未见来源于其它树种的松塔具有抗HIV活性的相关报导。此外，日本学者认为日本白松松塔的抗HIV活性部位是大分子的酸性多糖，其提取方式为反复使用碱水提取，工艺复杂。 云南有云南松、华山松等六种松树，资源丰富。云南农民在采收松子后一般将松塔废弃或当做燃料烧掉，若能从中提取抗HIV活性成分，变废为宝，不仅能为山区农民致富提供良机，更能为艾滋病的防治提供新的选择。因此，将云南松属植物的松塔按现代工艺进行提取分离并寻找其有效抑制艾滋病毒的有效部位既有巨大的社会效益又有显著的经济效益。在进行了一系列相关研究后，我们发现了一种十分经济有效的具有抗HIV活性的云南松属植物的松塔提取物的制备方法，并据此完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种适于工业化生产的抗HIV的云南松属植物的松塔提取物，并公开了该提取物用于制备防治艾滋病的药物的用途。 本专利技术的另一目的在于提供一种具有抑制艾滋病病毒复制功能的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分的云南松属植物的松塔提取物和可药用载体。其制剂形式包括片剂、胶囊剂、控释剂或缓释剂。 具体而言，本专利技术中云南松属植物的松塔抗艾滋病毒的活性部位提取物的制备方法如下 a)松塔经粉碎浸泡于乙醇溶液12-30小时，重复1-3次，残渣用80-100℃热水提取1-3小时，重复1-3次，再用碱水室温提取，过滤，得滤液A； b)滤液A用酸性溶液调pH值至5，过滤，得滤液B； c)滤液B依次用1-5倍量乙醇溶液沉淀、过滤1-3次； d)步骤c)中得到的沉淀物用无水乙醇和/或乙醚依次洗涤，在25-55℃减压干燥，即得。 其中，步骤a)与步骤c)中的乙醇溶液浓度为80％-95％；步骤a)中的碱水选自氨水、氢氧化钠或氢氧化钾溶液，碱水的浓度为0.5％-2％，优选1％氢氧化钠溶液；步骤b)中的酸性溶液选自盐酸、硫酸、硝酸、亚硫酸、磷酸、醋酸、碳酸或硫氢酸溶液，浓度为0.5％-2％，优选1％醋酸溶液；步骤a)中的松塔是指剥离了松子的新鲜或干燥球果。根据初步的化学分析得知，本专利技术的云南松属植物的松塔提取物为弱碱性物质，其与Sakagami等提出的日本白松松塔提取物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种云南松属植物的松塔提取物，其由包含下列步骤的方法制备得到：ａ）松塔经粉碎浸泡于乙醇溶液１２－３０小时，重复１－３次，残渣用８０－１００℃热水提取１－３小时，重复１－３次，再用碱水室温提取，过滤，得滤液Ａ；ｂ）滤液Ａ用酸性溶液调ｐＨ值至５，过滤，得滤液Ｂ；ｃ）滤液Ｂ依次用１－５倍量乙醇溶液沉淀、过滤１－３次；ｄ）步骤ｃ）中得到的沉淀物用无水乙醇和／或乙醚依次洗涤，在２５－５５℃减压干燥，即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘光明，赵昱，吕永俊，李好枝，彭芳，张桢，李冬梅，罗建蓉，巫秀美，周萍，杨敏，张海珠，张兰胜，施贵荣，李春艳，董光平，
申请(专利权)人：大理学院，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]