一种具有抗氧化活性的鸡骨泥酶解物的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种具有抗氧化活性的鸡骨泥酶解物的制备方法，能够获得有效清除ＤＰＰＨ自由基、羟自由基及具有还原性的酶解物，属于生物酶解技术领域。该方法是将鸡骨进行粉碎，制成骨泥，配制鸡骨泥悬浮液，在８０～１００℃下加热预处理２０～３０分钟，冷却至酶反应的最适温度，调整ｐＨ，加入蛋白酶，反应一定时间后，升温到８５℃～９０℃保持１０～２０分钟灭酶，得到淡黄色粉状物，即为鸡骨蛋白酶解物。本发明专利技术所获得的鸡骨蛋白酶解物具有清除ＤＰＰＨ自由基、羟自由基及还原的能力，是潜在的天然抗氧化剂和功能性食品，且安全性高，具有有效地保护人体细胞组织、心脑血管循环系统及抗癌、延缓衰老等生理作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物酶解技术 领域。
技术介绍
生物体在生命活动的代谢过程中，会不断的产生多种自由基，DPPH自由基 (DPPH )、羟自由基(0H* )是两种具有代表性的自由基。自由基过多，会导致生物机体中 许多生物大分子如核酸、蛋白质、多糖及膜多聚不饱和脂肪酸发生过氧化反应，使生物大分 子出现交联或断裂，引起细胞结构和功能损害。虽然合成抗氧化剂曾在清除活性氧、食物保 鲜等方面做出了巨大贡献，但人工合成抗氧化剂存在直接或间接的致癌作用，具有潜在的 不安全性。目前天然的抗氧化剂取得了很大的进展，而且天然抗氧化剂已从单纯作为油脂 和含脂食品的抗氧化剂，发展到作为体内氧自由基的清除剂，以达到保护人体细胞组织、心 脑血管循环系统及抗癌、延缓衰老等生理作用。我国是禽肉生产和消费的大国。2008年我国鸡肉产量达1015万吨，位居世界第 二，约占鸡总重25%的鸡骨产量也相当可观。目前，鸡骨大部分只作为动物饲料，产品附加 值低，利用率很低。然而，鸡骨中含有丰富的优质蛋白质和人体所需的微量元素以及磷脂、 软骨素、维生素和矿物质等多种营养素。若是能将鸡骨泥进行酶解，提取其抗氧化活性肽， 开发成为天然抗氧化剂和功能性食品，将带来重要的经济与社会意义。
技术实现思路
本专利技术目的是提供。以廉价的下 脚料——鸡骨为原料，利用生物酶解技术，开发出一种具有清除DPPH自由基、羟自由基能力 以及还原能力的酶解物。本专利技术的技术方案包括下列步骤(1)原料预处理将鸡骨进行粉碎，制成80 100目的骨泥(由福建圣农食品有限公司 提供)，加水配制鸡骨泥悬浮液，浓度为5 9% (重量，以下百分比类同)，80 100°C加热 20 30分钟；(2)用盐酸或氢氧化钠调整步骤(1)所述悬浮液的pH值，添加蛋白酶进行水解；(3)对步骤(2)制得的溶液灭酶升高反应体系温度至85°C 95°C，保持10 20分钟；(4)将步骤(3)灭酶后的溶液进行过滤采用离心机，4000 4800转/分钟离心8 15分钟；(5)干燥取步骤(4)所述离心后的上清液，干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物。 干燥可以采用冻干、喷雾干燥、真空干燥或加热干燥等。其中水解的蛋白酶为复合风味蛋白酶Flavourzyme (购自丹麦N0VE公司)、复合 蛋白酶Protamex (购自丹麦N0VE公司)、胰酶(购自苏州天绿制药有限公司)、水解蛋白酶Alcalase (购自丹麦N0VE公司)、胰蛋白酶(购自北京华美公司)、AS. 1398中性蛋白酶(购自 无锡星达生物有限公司)或木瓜蛋白酶(购自上海旭梅公司)。选用复合风味蛋白酶加入时，复合风味蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的0. 75% 1. 25%，控制反应温度为45 65°C，用盐酸或氢氧化钠调整pH为6 8，反应20 120分 钟；选用复合蛋白酶加入时，复合蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的1.0% 1.5%，控制温度 为45 55°C，用盐酸或氢氧化钠调整pH为6. 5 7. 5，反应20 100分钟；选用胰酶加入时，胰酶用量为鸡骨泥原料鲜重的0. 5% 1. 5%，控制温度为50 60°C， 用氢氧化钠调整pH为8. 0 9. 0，反应20 100分钟；选用水解蛋白酶加入时，水解蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的0. 75% 1. 5%，控制反 应温度为60 65°C，用氢氧化钠调整pH为8. 0 9. 0，反应20 90分钟；选用胰蛋白酶加入时，胰蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的0. 5% 1. 5%，控制温度为 45 55°C，用氢氧化钠调整pH为8. 0 9. 0，反应20 100分钟；选用AS. 1398中性蛋白酶加入时，AS. 1398中性蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的 0. 5% 1. 5%，控制温度为50 60°C，用氢氧化钠调整pH为7. 0 9. 0，反应10 100分 钟；选用木瓜蛋白酶加入时，木瓜蛋白酶用量为鸡骨泥原料鲜重的0. 5% 1. 5%，控制温度 为50 70°C，用盐酸或氢氧化钠调整pH为6. 0 8. 0，反应20 120分钟。本专利技术具有以下优点1、本专利技术采用价格低廉的鸡骨泥为原料，利用生物酶解技术生产鸡骨蛋白 酶解物。酶解物具有良好的风味且含有大量短肽和游离氨基酸，易于人体吸收，并且具 有抗氧化活性。2、热反应条件较为温和，对营养成分破坏力低，同时使骨骼中的营养物质 在产品中得以充分保留，有益于人体健康。3、本专利技术为天然的抗氧化剂，安全性高，具有有效地保护人体细胞组织、心脑血管 循环系统及抗癌、延缓衰老等生理作用。4、制备过程简单，原料为肉鸡加工的下脚料，可以有效地节约资源、降低成本，产 品具有明显的市场竞争力。具体实施例方式实施例一利用复合风味蛋白酶Flavourzyme水解得到鸡骨酶解物(1)原料预处理取lKg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5% (重 量，以下百分比类同)，于80°C下加热30分钟。(2)水解控制反应温度为45°C，用0. 5mol/L的盐酸调整pH为6，加入复合风味 蛋白酶Flavourzyme，加酶量为原料鲜重的0. 75%，反应120分钟。(3)灭酶升高反应体系温度至85°C保持20分钟。(4)过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。(5)干燥取离心后的上清液冷冻干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物。实施例二4(1)原料预处理取lKg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为7%，于 90°C下加热25分钟。(2)水解控制反应温度为55°C，用0. 5mol/L氢氧化钠调整pH为7，加入复合风 味蛋白酶Flavourzyme，加酶量为原料鲜重的1%，反应70分钟。(3)灭酶升高反应体系温度至90°C保持15分钟。(4)过滤采用离心机，4400转/分钟离心11分钟。(5)干燥取离心后的上清液喷雾干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物。实施例三(1)原料预处理取lKg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为9%， 于100°C下加热20分钟。(2)水解控制反应温度为65°C，用0. 5mol/L氢氧化钠调整pH为8，加入复合风 味蛋白酶Flavourzyme，加酶量为原料鲜重的1. 25%，反应20分钟。(3)灭酶升高反应体系温度至95°C保持10分钟。(4)过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。(5)干燥取离心后的上清液真空干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物。实施例四利用复合蛋白酶Protamex水解得到鸡骨酶解物(1)原料预处理取lKg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为5%， 于100°C下加热20分钟。(2)水解控制反应温度为45°C，用0. 5mol/L盐酸调整pH为6. 5，加入复合蛋白 酶Protamex，加酶量为原料鲜重的1. 25%，反应60分钟。(3)灭酶升高反应体系温度至95°C保持10分钟。(4)过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。(5)干燥取离心后的上清液真空干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物。实施例五(1)原料预处理取lKg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为9%，于 90°C下加热25分钟。(2)水解控制反应温度为55°C，用0. 5mol/L氢本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗氧化活性的鸡骨泥酶解物的制备方法，其特征在于：包括下列步骤：（１）原料预处理：将鸡骨进行粉碎，制成８０～１００目的骨泥，加水配制成鸡骨泥悬浮液，浓度为５％～９％（重量，以下百分比类同），在８０～１００℃下加热２０～３０分钟；（２）对步骤（１）制得的悬浮液进行酶解：添加蛋白酶进行水解；（３）对步骤（２）制得的溶液灭酶：升高反应体系温度至８５℃～９５℃，保持１０～２０分钟；（４）将步骤（３）灭酶后的溶液进行过滤：采用离心机，４０００～４８００转／分钟离心８～１５分钟；（５）干燥：取步骤（４）所述离心后的上清液，干燥至淡黄色粉末，得到鸡骨蛋白酶解物，所述干燥采用冻干、喷雾干燥、真空干燥或加热干燥。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：倪莉，易余艳，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：35[中国|福建]