一种哈茨烷二萜类化合物、钩状木霉菌发酵液提取物、农药、及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于农药技术领域，具体涉及一种哈茨烷二萜类化合物、钩状木霉菌发酵液提取物、农药、及其制备方法和用途。本发明专利技术提供了一种从钩状木霉菌中提取分离的哈茨烷二萜类化合物以及含有该化合物的提取物，本发明专利技术的化合物及提取物对多种农业病害真菌具有良好的抑制效果。因而，它们可用于抑制农业病害真菌，提高植物抗病性。本发明专利技术的技术方案有利于钩状木霉菌推广和高效利用，具有很好的应用前景。具有很好的应用前景。具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种哈茨烷二萜类化合物、钩状木霉菌发酵液提取物、农药、及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于农药
，具体涉及一种哈茨烷二萜类化合物、钩状木霉菌发酵液提取物、农药、及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]木霉属（Trichoderma spp.）真菌被广泛用于植物病害生物防治，其生物防治机制多样。抗生作用是木霉属真菌的主要生防机制之一，研究表明，木霉菌产生的次生代谢产物不仅能够直接抑制病原菌的生长，还能够触发植物防御系统或促进植物营养生长从而提高植物抗病性。
[0003]钩状木霉菌（Trichoderma hamatum)为子囊菌门(Ascomycota)，子囊菌纲(Sordariomycetes)，肉座菌目(Hypocreales)，肉座菌科(Hypocreaceae)，木霉属(Trichodermasp.)真菌。目前，对于钩状木霉菌的次生代谢产物还缺乏全面的研究。因而，对于钩状木霉菌用于植物病害生物防治的活性成分尚不确定。这不利于钩状木霉菌广泛和高效的应用。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的问题，本专利技术提供一种哈茨烷二萜类化合物及其制备方法和用途，目的在于提供钩状木霉菌的次生代谢产物中的活性成分及其用途。
[0005]式I所示化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物：式I。
[0006]本专利技术还提供一种钩状木霉菌发酵液提取物，所述钩状木霉菌发酵液提取物中包括上述化合物。
[0007]优选的，所述钩状木霉菌为Trichoderma hamatum。
[0008]本专利技术还提供上述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或上述钩状木霉菌发酵液提取物用于提高植物抗病性的用途。
[0009]本专利技术还提供上述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或上述钩状木霉菌发酵液提取物用于抑制农业病害真菌的用途。
[0010]优选的，所述农业病害真菌包括如下真菌中的至少一种：小麦赤霉、辣椒疫霉、油菜菌核、黄瓜灰霉、水稻纹枯、玉米茎基腐、草莓炭疽、花生褐斑。
[0011]本专利技术还提供一种用于提高植物抗病性的农药，它是以上述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或上述钩状木霉菌发酵液提取物作为活性成分制成
的。
[0012]本专利技术还提供上述化合物的制备方法，包括如下步骤：步骤1，从钩状木霉菌的发酵液中提取乙酸乙酯部位提取物；步骤2，采用柱层析对所述乙酸乙酯部位提取物进行粗分，所述柱层析中采用体积比30：1~1：1的石油醚
‑
丙酮作为流动相，分离得到8个组分，依次记为Fr.1~Fr.8；步骤3，取Fr.3经轴向压缩柱洗脱，洗脱液为体积分数50~100%的甲醇水溶液，得到6个组分，依次记为Fr.3
‑
1~ Fr.3
‑
6；步骤4，取Fr.3
‑
4采用凝胶柱洗脱，洗脱液为甲醇，得到5个组分，依次记为Fr.3
‑4‑
1~ Fr.3
‑4‑
5；步骤5，取Fr.3
‑4‑
3纯化，即得。
[0013]优选的，所述钩状木霉菌为Trichoderma hamatum。
[0014]优选的，所述乙酸乙酯部位提取物的制备方法为：分离钩状木霉菌的发酵液，用乙酸乙酯浸泡，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯相，减压浓缩，即得。
[0015]本专利技术从钩状木霉菌次生代谢产物中分离得到一个新化合物（式I所示化合物），通过对核磁共振（NMR）、电喷雾质谱（ESIMS）和圆二色谱（CD）等光谱数据的综合分析，确定了化合物的绝对构型。其对油菜菌核、黄瓜灰霉等真菌具有显著的抑制活性，对玉米茎基腐、草莓炭疽等真菌具有良好的抑制活性。因而，该化合物或含有该化合物的提取物可用于提高植物抗病性。本专利技术的技术方案有利于钩状木霉菌推广和高效利用，具有很好的应用前景。
[0016]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0017]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0018]图1为式I化合物的ESI
‑
MS表征结果；图2为式I化合物的UV光谱表征结果；图3为式I化合物的IR光谱表征结果；图4为式I化合物的1H NMR表征结果；图5为式I化合物的
13
C NMR表征结果；图6为式I化合物的1H
‑1H COSY表征结果；图7为式I化合物的HSQC谱表征结果；图8为式I化合物的HMBC谱表征结果；图9为式I化合物的NOESY谱表征结果；图10为圆二色谱的计算和实验表征结果。
具体实施方式
[0019]以下实施例和实验例中，未特别说明的试剂和材料均为市售品，具体的：
一、试剂真菌2号培养基：麦芽糖20 g；味精10 g；葡萄糖10 g；酵母膏3 g；玉米浆1 g；甘露醇20 g；KH2PO40.5 g；MgSO
4.
7H2O 0.3 g；CaCO320 g；5
‑
氮杂胞苷10 mg；蒸馏水1 L；氘代甲醇（阿达玛斯试剂有限公司）；氘代氯仿（阿达玛斯贝塔（上海）化学试剂有限公司）；分析级甲醇（上海星可高纯溶剂有限公司）；石油醚（上海星可高纯溶剂有限公司）；丙酮（成都市科隆化学品有限公司）；制备级乙腈（上海星可高纯溶剂有限公司）；二氯甲烷（上海星可高纯溶剂有限公司）；制备级甲醇（海星可高纯溶剂有限公司）；分析级乙酸乙酯（海星可高纯溶剂有限公司）。
[0020]二、仪器柱层析硅胶（200
‑
300目）（青岛海洋化工厂）；Diaion HP
‑
20（日本三菱化学公司）；MCI填料（日本三菱化学公司）；隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械有限公司）；超纯水器（四川优普超纯科技有限公司）；QExactive UHMR复合四极杆—轨道阱质谱仪（美国赛默飞世尔公司）；硅胶（200~300目，青岛海浪硅胶干燥剂有限公司）；LDZX
‑
50KBS立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）；轴向动态压缩柱（中国江苏汉邦科技）；NU3000型紫外检测器（中国江苏汉邦科技）；真空干燥箱（DZF型，北京科伟永兴仪器有限公司）；Kromasil100
‑5‑
C18,（10
×
250 mm, 4.5μm，瑞典阿克苏诺贝尔（Akzo Nobel）公司）；快速制备液相仪（常州三泰科技仪器有限公司）；Bruker Bruker
‑
Ascend
‑
700
‑
MHz核磁共振仪（德国布鲁克公司）；高速离心机（湘仪离心机仪本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.式I所示化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物：式I。2.一种钩状木霉菌发酵液提取物，其特征在于：所述钩状木霉菌发酵液提取物中包括权利要求1所述化合物。3.按照权利要求2所述的钩状木霉菌发酵液提取物，其特征在于：所述钩状木霉菌为Trichoderma hamatum。4.权利要求1所述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或权利要求2或3所述的钩状木霉菌发酵液提取物用于提高植物抗病性的用途。5.权利要求1所述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或权利要求2或3所述的钩状木霉菌发酵液提取物用于抑制农业病害真菌的用途。6.按照权利要求5所述的用途，其特征在于：所述农业病害真菌包括如下真菌中的至少一种：小麦赤霉、辣椒疫霉、油菜菌核、黄瓜灰霉、水稻纹枯、玉米茎基腐、草莓炭疽、花生褐斑。7.一种用于提高植物抗病性的农药，其特征在于：它是以权利要求1所述化合物，或其立体异构体，或其晶型，或其盐，或其衍生物，或权利要求2或3所述的钩状木霉菌发酵液提取物作为活性成分制成的。8.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭大乐，黄利，刘梦丹，王光志，邓赟，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：