一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法技术

本发明专利技术提供一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法，采用8周龄Sprague

【技术实现步骤摘要】
一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法。

技术介绍

[0002]硬脊膜动静脉瘘最常见的病理生理表现是静脉高压性脊髓病，或者说充血性脊髓损伤。有学者认为硬脊膜动静脉瘘属于后天获得性疾病。一种可能的假说是脊髓硬膜上存在生理性微小的动静脉吻合，并且在一定条件刺激下(如外伤和静脉血栓)，动静脉吻合扩张形成病理性瘘口。一些尸检研究支持引流静脉高压是脊髓损伤的前驱原因。术中血流动力学证据证明引流静脉血压是动脉压力的70％。手术切断瘘口可以明显阻止病程进展，但是其术后效果却因人而异。超过70％的患者留有残疾，甚至25
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50％出现手术后延迟性神经功能恶化。所以，进一步研究这种充血性脊髓损伤的分子机制十分重要。
[0003]除了常见的主动性因素(如脊髓动静脉瘘)，有少数研究报道引流静脉狭窄(比如下腔静脉，椎管内外静脉丛)也可能导致被动性的静脉高压性脊髓病。在这一前提下，本申请团队前期通过肾动静脉吻合和下腔静脉结扎构的方式增加下腔静脉至椎管内静脉丛压力，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：（1）实验对象采用8周龄雌性Sprague
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Dawley大鼠作为研究对象，将大鼠饲养在恒温恒湿的环境里，并提供自由饮食和饮水，将研究对象分为三组，第一组为单纯动静脉瘘组即F组，仅做T13水平血管搭桥，第二组为动静脉瘘+远端狭窄组，即F+S组，在T13血管搭桥基础上，于T11水平模拟引流静脉狭窄，第三组为假手术组，仅做T13背侧静脉结扎；（2）手术方案大鼠手术前3天采用双抗饮水，其含有0.4mg/ml 阿司匹林泡腾片、0.05mg/ml氯吡格雷，并在术后维持抗栓直至处死；术后连续使用3天丁丙诺菲进行皮下注射，q12h，0.05mg/kg；和头孢呋辛钠进行肌肉注射，qd，100mg/kg；使用小动物气体麻醉系统进行麻醉诱导和麻醉维持；术中全程使用恒温垫维持大鼠体表温度38
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40℃；手术流程包括股动脉取材和制备、T13椎板摘除、肾动脉袖套吻合和脊髓背侧静脉插管四部分；（3）下肢运动功能评估在术后第1、3、5、14天，对大鼠下肢运动功能进行评估，采用BBB法，从下肢的肢体活动、负重能力、运动协调性、躯干的平衡性以及尾部的活动各个方面评分；试验场地为半径1米的圆形封闭旷场；试验中采用双人独立观察记录，最后取均值为准；（4）彩色多普勒超声成像系统在手术后第5天，使用超高分辨率小动物彩色多普勒超声成像系统监测移植动脉血流；使用彩色多普勒模块，配合MS400探头，频率设定24MHz，目标深度大约皮下9mm；尽可能采集移植动脉远端、移植导管内和引流静脉近端血流频谱图像，并比较最大峰值流速；若三段均无法探及动脉血流信号则定义为移植血管闭塞；所有经历搭桥手术的大鼠计算通畅率，移植血管闭塞大鼠不纳入后续研究；（5）磁共振成像在手术后第14天，采用7.0T小动物核磁扫描系统对大鼠胸腰髓进行检查；大鼠经面罩麻醉，仰卧位放置专用线圈内进行检查，使大鼠脊髓位于专用线圈的中心；成像过程中密切监测体温、心率和呼吸；使用直径为89mm的大鼠线圈进行扫描；首先进行快速全身定位扫描后，使用脂肪饱和的RARE序列获取以手术区域为中心的矢状面和轴向T2加权图像；正式扫描参数如下：矢状位，TR/TE = 3000/33 ms，矩阵大小 = 256
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256，视场角FOV = 60
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40mm2，层厚 = 0.6mm，无间隙，层数 = 10，NEX = 8，分辨率 = 0.147
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1mm3；轴位，TR/TE = 3600/33ms，矩阵尺寸= 256
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256，FOV = 60
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40mm2，层厚= 1mm，无间隙，层数= 30，NEX = 8，分辨率= 0.147
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1mm3；每个序列扫描需要12分钟；选取约T12水平轴位图像分析各组脊髓背侧静脉横截面积差异；使用ImageJ软件提取进行数据；若椎管内未见异常扩张的血管则定义为移植血管闭塞；所有经历搭桥手术的大鼠计算通畅率，移植血管闭塞大鼠不纳入后续研究；（6）通过以上步骤之后，构建完成硬脊膜动静脉瘘大鼠模型。2.根据权利要求1所述的一种硬脊膜动静脉瘘大鼠模型的构建方法，其特征在于：所述手术方法还包括如下步骤：手术流程包括自体动脉取材和制备、T13椎板摘除、肾动脉袖套吻合和脊髓背侧静脉插管四部分；
（1）第一部分：采用俯卧位，使用自制拉钩固定左下肢；沿体表静脉投影切开皮肤，切口顶端至腹股沟韧带处，末端至踝关节，采用锐性和钝性相结合的方式分离皮下结缔组织，暴露股动静脉鞘膜，用显微剪剪开血管鞘膜，并钝性分离股动脉，股动脉全长约有3
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【专利技术属性】
技术研发人员：王殷庆，马永杰，张鸿祺，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：