【技术实现步骤摘要】
一种表达SARS
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CoV
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2S蛋白的重组质粒,其构建方法和应用
[0001]本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种重组质粒,特别是涉及一种表达SARS
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CoV
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2S蛋白的重组质粒、其构建方法和应用。
技术介绍
[0002]新型冠状病毒是冠状病毒的一种,可以侵染包括人类在内的许多种高等动物,属于冠状病毒属。根据基因组特点,SARS
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CoV
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2病毒属于冠状病毒(CoV)亚科β属中Sarbecovirus亚属成员。SARS
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CoV
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2病毒基因组长度约为29.8Kb,5
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端2/3的基因编码病毒复制相关的酶,剩下1/3的基因编码刺突蛋白(Spike,S)、小囊膜蛋白(Envelope,E)、膜蛋白(Membrane,M)、核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N)四个结构蛋白以及其他一些辅助蛋白。
[0003]国外比较成熟的技术主要为mRNA疫苗, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种表达SARS
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CoV
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2S蛋白的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒以pcDNA3.4为骨架质粒,插入有编码新型冠状病毒S蛋白片段的多倍体,所述SARS
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CoV
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2S蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述重组质粒,其特征在于,所述编码SARS
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CoV
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2S蛋白基因片段的多倍体在pcDNA3.4上的插入位点为插入位点Nhe1和Not1。3.根据权利要求1所述重组质粒,其特征在于,所述pcDNA3.4载体包含位于该载体C端的氨基酸序列Fc
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tag,所述Fc
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tag的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。4.根据权利要求1所述的重组质粒,其特征在于,所述新型冠状病毒S蛋白片段的多倍体由至少两个新型冠状病毒S蛋白受体结合区域片段串联构成;所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区域片段的核苷酸序列N端位于S蛋白核苷酸序列的第319
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328位之间,C端位于S蛋白核苷酸序列的529
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596位之间;所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区域片段之间通过GGS、GGGS、GSGS、SGGS、GGGGS、GSGGS、GGSGS、GGSGGS、GGGSGS、GGGGGS或GGGSGGS序列串联。5.根据权利要求4所述的重组质粒,其特征在于,所述新型冠状病毒S蛋白受体结合区域片段的C...
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