一种吲哚生物碱化合物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种吲哚生物碱化合物及其提取方法和应用，属于生物医药技术领域。所述的吲哚生物碱化合物结构式如下所示：，并包括药学上可接受的盐和衍生物。本发明专利技术从岩生羊角棉植物中分离获得具有抗炎作用的岩生羊角棉甲素，为吲哚生物碱化合物，并以此为基础制备一系列衍生物或药学上可接受的盐，其能够抑制巨噬细胞释放NO的作用，并可显著地降低COX

【技术实现步骤摘要】
一种吲哚生物碱化合物及其提取方法和应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种吲哚生物碱化合物及其提取方法和应用。

技术介绍

[0002]非甾体抗炎药一般是指不含有甾体结构的抗炎药，具有解热、镇痛、消炎等作用，临床上被广泛应用于发热、疼痛症状的缓解，以及类风湿性关节炎、骨关节炎的治疗，是目前处方及非处方药用量最大的药物。然而长期使用非甾体类抗炎药易引起胃肠道、肾脏、肝脏和血液系统的不良反应，因此，从天然植物或动物中寻找、开发安全、有效、不良反应小的非甾体抗炎药是近年来天然抗炎药物研发的重点。
[0003]岩生羊角棉（Alstonia rupestris）为夹竹桃科鸡骨常山属植物，主要分布在我国广西省，鸡骨常山属植物富含结构新颖的单萜吲哚生物碱化合物，部分化合物具有抗炎、抗肿瘤等生物活性。但从岩生羊角棉中分离、提纯获得具有抗炎作用的有效成分具有重要意义。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中非甾体抗炎药副作用大的问题，本专利技术提供了一种吲哚生物碱化合物及其提取方法和应用，吲哚生物碱化合物从岩生羊角棉中分离获得，包括药学上可接受的盐和衍生物，具有预防或治疗炎症的药物开发潜力。
[0005]本专利技术通过以下技术方案实现：一种吲哚生物碱化合物，所述的吲哚生物碱化合物结构式如式Ⅰ所示：式Ⅰ。
[0006]进一步地，还包括其药学上可接受的盐和衍生物，所述的药学上可接受的盐为衍生自无机酸和有机酸的酸加成盐；这些盐可以是在化合物的最后分离和纯化中直接得到。
也可以是通过将上述化合物，与一定数量的酸适当(例如等当量)进行混合而得到。这些盐可能在溶液中形成沉淀而以过滤方法收集，或在溶剂蒸发后回收而得到，或在水介质中反应后冷冻干燥制得。在本申请的一些实施方式中，本申请中所述药学上可接受的盐可以是上文中所述化合物的无机酸盐或有机酸盐，比如所述无机酸包括盐酸、硫酸、磷酸、氢溴酸和氢碘酸；所述有机酸选自柠檬酸、酒石酸、甲酸、乙二酸、甲磺酸、碳酸、琥珀酸、苯甲酸、乙酸、草酸、对甲苯磺酸和对溴苯磺酸。
[0007]进一步地，所述的吲哚生物碱化合物的提取方法为，取岩生羊角棉植物在有机溶剂Ⅰ中回流提取或浸提，提取或浸提后的溶液加水混悬，酸性条件下用有机溶剂Ⅱ萃取，水层在碱性条件下用有机溶剂Ⅲ萃取，萃取后的有机层采用柱层析分离获得吲哚生物碱化合物。
[0008]进一步地，所述的酸性条件的pH为3，所述的碱性条件的pH为10；所述的有机溶剂Ⅰ、有机溶剂Ⅱ和有机溶剂Ⅲ分别为C1‑6醇、C3‑6酮、C2‑6醚、C2‑6酯和C1‑6卤代烃中的一种。
[0009]进一步地，所述的C1‑6醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、正戊醇、异戊醇、正己醇和环己醇中的一种；所述C3‑6酮为丙酮、甲乙酮和甲基异丁酮中的一种；所述C2‑6醚为甲醚或乙醚；所述C2‑
6酯为甲酸乙酯、乙酸乙酯和丙酸乙酯中的一种；所述C1‑6卤代烃为二氯甲烷、三氯甲烷和二氯乙烷中的一种。
[0010]进一步地，所述的有机溶剂Ⅰ为C1‑6醇，有机溶剂Ⅱ和有机溶剂Ⅲ为C1‑6卤代烃；所述的柱层析的洗脱剂为二氯甲烷/甲醇或石油醚/丙酮。
[0011]进一步地，所述的有机溶剂Ⅰ为乙醇，有机溶剂Ⅱ和有机溶剂Ⅲ为二氯甲烷，所述的洗脱剂中二氯甲烷和甲醇的体积比为100:1~1:1，石油醚和丙酮的体积比为10:1~1:5。
[0012]进一步地，所述的柱层析的方法具体为：硅胶拌样，200‑300目硅胶柱层析，划分为10段，记为R1~R10段，R8段经硅胶柱层析，以石油醚
‑
丙酮为洗脱机，以体积比10:1至1:5进行梯度洗脱，得7段R8a~R8g，R8g段经制备液相，以体积比为73:27的MeOH
‑
H2O为洗脱剂，分离得吲哚生物碱化合物。
[0013]本专利技术中，所述的吲哚生物碱化合物在制备抗炎制剂中的应用，岩生羊角棉甲素是一种具有新型结构的吲哚生物碱化合物，具有良好的抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞Raw 264.7 NO释放活性，且效果略优于地塞米松，具有良好的药用和保健前景；所述的制剂为药品、食品或保健品，可包含符合药品、食品会保健品相关添加规定的、安全的辅料，比如赋形剂、填充剂等使其具备一定的形状，矫味剂等使其具有良好的口感。本专利技术取得的有益效果为：本专利技术从岩生羊角棉植物中分离获得具有抗炎作用的岩生羊角棉甲素，为吲哚生物碱化合物，并以此为基础制备一系列衍生物或药学上可接受的盐，其能够抑制巨噬细胞释放NO的作用，并可显著地降低COX
‑
2的生成，岩生羊角棉甲素的IC
50
在1.0
‑
20.0 μM之间具有预防或治疗炎症的药物开发潜力。岩生羊角棉甲素抑制巨噬细胞释放NO活性IC
50
低至4.2
ꢀ±ꢀ
1.3 μM，其活性优于阳性对照药地塞米松，具有良好的应用前景。
附图说明
[0014]图1为岩生羊角棉甲素的1H NMR图；图2为岩生羊角棉甲素的
13
C NMR图；
图3为岩生羊角棉甲素对COX
‑
2蛋白表达的影响图，A为凝胶电泳显像图，B为柱状图。
具体实施方式
[0015]下面结合具体实施例，进一步阐述本申请。应理解，这些实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
[0016]除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。本申请所使用的试剂或原料均可通过常规途径购买获得，如无特殊说明，本申请所使用的试剂或原料均按照本领域常规方式使用或者按照产品说明书使用。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本申请方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0017]实施例1取风干后的岩生羊角棉植物根茎10 kg，用95%乙醇加热回流提取3次，回收溶剂至无醇味，加入水混悬后，以2% HCl调节pH至2，用二氯甲烷萃取5次，水层用10%NaOH调节pH至10，用二氯甲烷萃取4次，有机层回收二氯甲烷得总生物碱，用硅胶拌样，200
‑
300目硅胶柱层析，划分为10段（R1~R10），R8经硅胶柱层析，以石油醚
‑
丙酮 (10:1 至 1:5)为梯度洗脱剂，得7段(R8a~R8g)，R8g段经制备液相，以MeOH
‑
H2O (73:27) 为洗脱剂，得岩生羊角棉甲素。
[0018]岩生羊角棉甲素的结构式通过红外光谱、质谱、一维及二维核磁共振谱而确定。红外光谱数据：IR (max, KBr)：3285, 2947, 2914, 1743, 1711, 1633, 1321 cm
–1；质谱数据：HR
‑
ESI
‑
MS (m/z)：533.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种吲哚生物碱化合物，其特征在于，所述的吲哚生物碱化合物结构式如式Ⅰ所示：式Ⅰ。2.根据权利要求1所述的吲哚生物碱化合物，其特征在于，还包括其药学上可接受的盐和衍生物。3.一种权利要求1所述的吲哚生物碱化合物的提取方法，其特征在于，取岩生羊角棉植物在乙醇中回流提取或浸提，提取或浸提后的溶液加水混悬，酸性条件下用二氯甲烷萃取，水层在碱性条件下用二氯甲烷萃取，萃取后的有机层采用柱层析分离获得吲哚生物碱化合物。4.根据权利要求3所述的吲哚生物碱化合物的提取方法，其特征在于，所述酸性条件的pH为3，所述的碱性条件的pH为10。5.根据权利要求3所述的吲哚生物碱化合物的提取方法，其特征在于，所述柱层析的洗脱剂为二氯甲烷/甲醇或石油醚/丙酮。6.根据权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：白媛媛，王志伟，夏红旻，王变利，刘月程，王博阳，
申请(专利权)人：山东省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：