一种基于生物发酵酶的烟叶发酵方法技术

基于生物发酵酶的烟叶发酵方法，使用生物发酵酶粉剂对烟叶进行发酵处理，生物发酵酶粉剂原料组成：乳酸球菌、解淀粉芽孢杆菌、粉状毕赤酵母菌、德克酵母菌、戊糖片球菌，其中有效菌落数不小于1千万个/克；大豆提取物、米糠提取物、玉米淀粉、奶粉、氨基酸、酵母提取物；有效菌落数1千万个/克；利用上述生物发酵酶处理改善低次烟叶品质或对烤烟进行陈化处理。低次烟叶品质或对烤烟进行陈化处理。低次烟叶品质或对烤烟进行陈化处理。

【技术实现步骤摘要】
一种基于生物发酵酶的烟叶发酵方法


[0001]本专利技术涉及基于生物发酵酶的烟叶发酵领域，特别涉及基于生物发酵酶的烟叶发酵方法。

技术介绍

[0002]烟草是中国，尤其是云南重要的经济作物。烟叶陈化是烟草加工过程中的一个重要步骤，同时陈化也是烟叶吸食品质形成过程中的一个重要环节。新鲜烟叶自然晾晒后，由于调制环境较温和，烟叶存在香气质单调、香气量不足、杂气较重和刺激性辛辣等品质缺陷，达不到工业加工的要求。因此，人们要通过陈化处理来改善这些品质缺陷，使烟叶弹性增强、色泽均匀、燃烧性好，烟叶品质明显改善。烟叶发酵主要有自然发酵(也称陈化或醇化)和人工发酵两种方式。自然发酵的优点是流程简单、操作容易、技术要求低，但也存在发酵时间长等缺点。人工发酵是在特定的人工强化温度和空气湿度的发酵室内，加速陈化烟丝，使其更符合吸食要求的烟叶发酵方式，它与自然陈化相比，有着发酵速度较快，发酵程度较彻底，发酵时间短等优点。近年来，关于生物酶制剂在烟叶发酵中的应用已见诸报端。
[0003]2022年万之源生物科技有限公司计划在云南开展烟丝发酵的预实验，并委托云南农业大学为评价第三方，云南农业大学烟草学院承担了本次评价服务。本团队高度重视本次发酵实验方案，并委派专业团队，以公平、公正的原则，对本次实验全程参与，并作出结题报告。

技术实现思路

[0004]为解决上述现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于提供基于生物发酵酶的烟叶发酵方法。
[0005]为达到上述目的，本专利技术的技术方案为：
[0006]基于生物发酵酶的烟叶发酵方法，使用的生物发酵酶粉剂，其中生物发酵酶粉剂按重量份计由如下原料组成：乳酸球菌1份、解淀粉芽孢杆菌1份、粉状毕赤酵母菌1份、德克酵母菌1份、戊糖片球菌1份，其中有效菌落数不小于1千万个/克；大豆提取物15份、米糠提取物13份、玉米淀粉20份、奶粉5份、氨基酸3份、酵母提取物3份。
[0007]利用上述生物发酵酶处理改善低次烟叶品质或对烤烟进行陈化处理；
[0008]进一步的，利用生物发酵酶处理改善低次烟叶品质的方法由如下步骤构成：
[0009](1)取配方烟叶装袋，放入恒温恒湿箱(温度20℃，相对湿度60％)平衡水分48h；并用快速水分测定仪测定平衡好的烟叶水分，待用。
[0010](2)将酶加入水中，搅拌过滤，配制成浓度为0.5％、1％、2％、3％、4％浓度。
[0011](3)用小型喷雾器将酶溶液均匀地喷洒在500g的烟丝上(含水率10％，15％，20％，25％)，将烟丝用塑料密封袋装好，放置于35℃、湿度为60％的恒温恒湿箱中进行发酵、降解，观察烟丝颜色香气。用高压蒸汽灭菌锅灭菌后的蒸馏水浸泡烟叶，取浸泡过烟叶的蒸馏水放入培养基培养，在三个时间段(24h，48h，72h)观察其霉菌变化，筛选出最佳的发酵烟丝
含水率。
[0012](4)以不喷任何试剂烟丝作为对照，在选定含水量的烟丝中开展生物酶发酵实验，于发酵12h、24h、48h、72h、96h取样品，进行酶灭活，测定化学成分和香气成分。同时烟丝卷制卷烟，平衡水分，感官评吸及化学成分测定。
[0013]进一步的，利用生物发酵酶对烤烟进行陈化处理的方法由如下步骤构成：(1)选取初烤后B2F烟叶装袋，放入恒温恒湿箱(温度20℃，相对湿度60％)平衡水分48h；
[0014](2)用快速水分测定仪测定平衡好的烟叶水分；
[0015](3)每个处理烟叶为2.5kg，处理
①
～
③
采用半叶法进行，即一半烟叶用于酶制剂处理，喷施浓度为0.5％，1％和2％，另一半作为对照。喷施水分质量为烟叶质量的5％。
[0016](4)将7个实验样品装入透气塑料袋，放置闭光室温中，按照自然发酵的条件来进行样品的发酵。按照烟厂采样的规律，于陈化1、2、3月时分别进行取样分析。未陈化的烟叶作为陈化0月的样品。
[0017](5)烟叶进行酶灭活，切丝卷制卷烟，平衡水分，进行感官评吸及化学成分测定。
[0018]进一步的，对烤烟进行陈化处理测试指标及方法
[0019](1)常规化学成分分析：
[0020]烟碱含量的测定：添加活性炭法；总氮含量的测定：H2O2‑
H2SO4消化
‑
蒸馏法；钾含量的测定：火焰光度法；氯含量的测定：硝酸银容量法；还原糖与水溶性总糖的测定：3，5
‑
二硝基水杨酸(DNS)比色法。
[0021](2)烟丝感官质量评定：
[0022]试验过程中每次取出的配方烟丝，用手工卷烟器卷制成单料烟支，把烟支放置于恒温恒湿箱中(温度20℃，相对湿度60％)平衡48h后，用于内在质量评吸鉴定。
[0023]评分参照YC/T 415—2011烟草在制品感官评价方法的相关评吸评判标准进行，对生物酶制剂处理后烟丝的感官品质进行评吸鉴定，对配方烟丝香气质、香气量、杂气、浓度、刺激性、余味和劲头等7项指标进行打分，各指标评吸总分以5名评吸员的评分平均值为最后分值。
[0024](3)烟丝香气成分检测：
[0025]采用同时蒸馏萃取法，用GC
‑
MS进行定性定量分析。
[0026]GC
‑
MS检测条件为：进样口温度：250℃；载气：高纯He；柱流速：1mL/min；进样量：1μL；分流比10:1。程序升温：初始温度50℃(保持1min)，5℃/min的速度升至200℃，再以10℃/min的速度升至260℃(保持5min)。电离方式：EI；离子源温度：230℃；电子能量：70eV；四级杆温度：150℃；扫描方式：全扫描；质量范围：35
‑
450(amu)；溶剂延迟3min。
[0027]进一步的，对于密封发酵条件下，烟丝喷施3％浓度酶制剂发酵72h可协调烟叶化学成分，增加致香物质含量，改善烟叶感官品质，进而提高烟叶品质；而自然陈化条件下，喷施2％浓度生物酶制剂效果更好。
[0028]相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0029]基于生物发酵酶的烟叶发酵方法，本专利技术使用生物发酵酶粉剂对于低次配方烟丝和上部初烤烟叶进行发酵和陈化实验。结果表明，使用一定浓度生物酶制剂可以加快烟叶的醇化，使烟叶品质更加协调，改善感官品质。其中，对于密封发酵条件下，烟丝喷施3％浓度酶制剂发酵72h可协调烟叶化学成分，增加致香物质含量，改善烟叶感官品质，进而提高
烟叶品质；而自然陈化条件下，喷施2％浓度生物酶制剂效果更好。
附图说明
[0030]图1高含水量烟叶发酵图。
[0031]图2发酵烟丝的霉菌培养平板照片(24h)。(其中a.水添加量10％、酶制剂浓度1％h；b.水添加量10％、酶制剂浓度2％；c.水添加量15％、酶制剂浓度1％h；d.水添加量15％、酶制剂浓度2％)
[0032]图3不同浓度酶发酵烟丝的外观照片。
[0033]图4不同浓度酶发酵烟丝的平板培养本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于生物发酵酶的烟叶发酵方法，使用生物发酵酶粉剂对烟叶进行发酵以改善低次烟叶品质或对烤烟进行陈化处理，其中生物发酵酶粉剂按重量份计由如下原料组成：乳酸球菌1份、解淀粉芽孢杆菌1份、粉状毕赤酵母菌1份、德克酵母菌1份、戊糖片球菌1份，其中有效菌落数不小于1千万个/克；大豆提取物15份、米糠提取物13份、玉米淀粉20份、奶粉5份、氨基酸3份、酵母提取物3份。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：利用生物发酵酶处理改善低次烟叶品质的方法由如下步骤构成：(1)取配方烟叶装袋，放入恒温恒湿箱，温度20℃，相对湿度60％，平衡水分48h；并用快速水分测定仪测定平衡好的烟叶水分，待用；(2)将酶加入水中，搅拌过滤，配制成浓度为0.5％、1％、2％、3％、4％浓度；(3)用小型喷雾器将酶溶液均匀地喷洒在500g的烟丝上(含水率10％，15％，20％，25％)，将烟丝用塑料密封袋装好，放置于35℃、湿度为60％的恒温恒湿箱中进行发酵、降解，观察烟丝颜色香气；用高压蒸汽灭菌锅灭菌后的蒸馏水浸泡烟叶，取浸泡过烟叶的蒸馏水放入培养基培养，在三个时间段(24h，48h，72h)观察其霉菌变化，筛选出最佳的发酵烟丝含水率；(4)以不喷任何试剂烟丝作为对照，在选定含水量的烟丝中开展生物酶发酵实验，于发酵12h、24h、48h、72h、96h取样品，进行酶灭活，测定化学成分和香气成分；同时烟丝卷制卷烟，平衡水分，感官评吸及化学成分测定。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：利用生物发酵酶对烤烟进行陈化处理的方法由如下步骤构成：(1)选取初烤后B2F烟叶装袋，放入恒温恒湿箱(温度20℃，相对湿度60％)平衡水分48h；(2)用快速水分测定仪测定平衡好的烟叶水分；(3)每个处理烟叶为2.5kg，处理
①
～
③
采用半叶法进行，即一半烟叶用于酶制剂处理，喷施浓度为0.5％，1％和2％，另一半作为对照；喷施水分质量为烟叶质量的5％；(4)将7个实验样品装入透气塑料袋，放置闭光室温中，按照自然发酵的条件来进行样...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜荣，曾松江，侯孝民，
申请(专利权)人：菀之源生物科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：