一种具有抑制马兜铃酸致肾损伤作用的炭药制造技术

技术编号:39270491 阅读:12 留言:0更新日期:2023-11-07 10:50
本发明专利技术属于医药技术领域,具体涉及一种黄芪炭在制备抑制马兜铃酸致肾损伤作用药物中的用途。动物实验发现黄芪炭通过抗氧化应激、抗炎和抑制细胞凋亡途径,抑制马兜铃酸导致的肾损伤。肾损伤。肾损伤。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抑制马兜铃酸致肾损伤作用的炭药


[0001]本专利技术涉及医药领域,具体涉及黄芪炭在医药领域的新用途。

技术介绍

[0002]马兜铃酸广泛存在于马兜铃属植物中,具有增强吞噬细胞吞噬功能及增强机体免疫的药理作用。但近年来,由于中药所致马兜铃酸肾病的报道逐渐增多,使得国内外医学界更加关注含有马兜铃酸成分的中药及中成药的毒理作用。如何合理减轻含马兜铃酸中药的毒副作用成为临床研究的热点。目前研究发现,与含马兜铃酸中药配伍后,具有肾脏减毒作用的中药包括补益、活血、清热及泻下四类。
[0003]寻找一种安全、廉价的抑制马兜铃酸致肾损伤的策略成为当前临床的迫切需求。文献记载黄芪炭与其他药物一起配伍使用,可以起补肾、止血作用。但是否可以抑制马兜铃酸的肾毒性?尚未有报道。

技术实现思路

[0004]有鉴于此,本专利技术的目的在于:提供一种安全、廉价的抑制马兜铃酸致肾损伤的中药炭药,以便在临床中配伍或单独使用。
[0005]具体而言,本专利技术是这样实现的,黄芪炭在制备抑制马兜铃酸致肾损伤作用药物中的用途,包括如下步骤:
[0006]1)黄芪炭加入水或0

100%乙醇,提取,提取液浓缩;
[0007]2)提取液经胃肠道给药,通过抗氧化应激、抗炎和抑制细胞凋亡途径,抑制马兜铃酸导致的肾损伤。
[0008]本专利技术提供了一种黄芪炭的新用途。
附图说明
[0009]图1:黄芪炭对AAI诱导AKI小鼠血清中BUN(图1A)和CRE(图1B)的影响。
[0010]图2:黄芪炭对AAI诱导AKI小鼠肾组织中MCP

1(图2A),TNF

α(图2B),IL

6(图2C)和IL

1β(图2D)的影响。
[0011]图3:黄芪炭对AAI诱导AKI小鼠肾组织中SOD(图3A),MDA(图3B),和GSH(图3C)的影响。
[0012]图4:各组小鼠肾组织病理改变(HE染色,
×
200和
×
400视野),图4A和4F.正常组;图4B和4G.模型组;图4C和4H.黄芪炭高剂量组;图4D和4I.黄芪炭中剂量组;图4E和4J.黄芪炭低剂量组。
[0013]图5:各组小鼠肾组织细胞凋亡数。
[0014]图6:黄芪炭对AAI诱导AKI小鼠肾组织中p53(图6D),Bax(图6E)、Bcl

2(图6F)和Bax/Bcl

2(图6G)蛋白表达水平的影响(图6A)。
具体实施方式
[0015]下面结合具体实施例进一步阐明本专利技术,应理解这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围,在阅读了本专利技术之后,本领域技术人员对本专利技术的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
[0016]实施例1:一种制备黄芪炭的方法,包括如下步骤:
[0017]将黄芪药材置于密封坩埚中,并用马弗炉煅烧1h(煅烧温度200℃

400℃)。待马弗炉自然冷却至室温后,将碳化的黄芪取出。
[0018]实施例2:一种制备黄芪炭的方法,包括如下步骤:
[0019]将黄芪药材置锅内,开盖,50

900℃下炒至内外均呈焦黑色,既得黄芪炭。将黄芪炭研磨成粉末。然后,将黄芪炭粉末以水/不同浓度乙醇(0

100%)为溶剂,提取,提取液浓缩成稠膏,以便进行以下实验。
[0020]实施例3:黄芪炭对马兜铃酸诱导急性肾损伤小鼠的治疗作用
[0021]3.1 分组、造模及给药
[0022]将40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、黄芪炭高、中、低剂量给药组,共5组,每组8只。黄芪炭给药组小鼠按照0.1ml
·
10g
‑1的给药体积进行灌胃给药,同时对照组和模型组小鼠灌胃给予生理盐水,持续7d。第5天给药2h后,模型组和黄芪炭给药组小鼠腹腔注射马兜铃酸I(AAI,10mg
·
kg
‑1),连续3d,建立急性肾损伤模型。最后一次给药后,所有小鼠均禁食12h,自由饮水。
[0023]3.2 肾功能检测
[0024]小鼠摘眼球取血静置4h,3500r
·
min
‑1离心10min,收集上层血清。随后通过全自动生化分析仪检测肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)含量,比较各组肾功能差异。
[0025]模型组小鼠连续三天腹腔注射AAI造模后,与对照组相比,小鼠血清中BUN和CRE明显升高(P<0.01);经过黄芪炭给药后,与模型组相比,各给药组小鼠血清BUN和CRE水平明显下降(P<0.01)。以上结果说明黄芪炭能有效缓解AAI致小鼠的急性肾损伤(图1)。
[0026]3.3 炎症因子指标检测
[0027]小鼠处死后立即取下两侧肾脏,剥去肾膜。将小鼠右肾在0.9%生理盐水中冲洗,用滤纸将水分吸干。按肾组织重量(g)∶磷酸盐缓冲液体积(mL)=1∶9的比例制成10%的组织匀浆液。于离心机中设置4000r
·
min
‑1离心10min,取上清液按照ELISA试剂盒说明书操作要求测定MCP

1、IL

1β、IL

6和TNF

α等炎症因子的含量。
[0028]炎症因子指标检测结果如图2所示。与正常组相比,模型组小鼠肺组织匀浆中MCP

1、TNF

α、IL

6及IL

1β水平均明显上升(P<0.01)。与模型组相比,经过黄芪炭低、中、高剂量组给药后,小鼠肾组织匀浆中MCP

1、TNF

α、IL

6及IL

1β水平均显著下降(P<0.01)。
[0029]3.4 氧化应激指标检测
[0030]取小鼠10%的肾组织匀浆上清液按照各测试盒操作方法,检测并计算肾组织中MDA、GSH含量以及SOD的酶活性。
[0031]氧化应激指标检测结果显示,模型组小鼠肾组织中MDA含量相较对照组明显增高(p<0.01),且SOD活性及GSH活性显著下降(P<0.01)。黄芪炭高、中、低剂量各组对小鼠肾组织MDA含量的升高有显著降低作用,对SOD活性及GSH活性有显著的升高作用(P<0.01)(图3)。
[0032]3.5 肾组织病理学检测
[0033]将小鼠左肾固定于4%多聚甲醛溶液中,经不同浓度的乙醇梯度洗脱后,石蜡包埋,以4μm厚度制作切片,进行HE染色,光学显微镜下观察小鼠肾组织的病理变化。
[0034]肾组织HE染色形态学观察如图4所示。对照组小鼠肾组织未见病理变化。模型组小鼠肾组织受损较严重,出现肾小管扩张或萎缩,部分肾小管上皮细胞本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.黄芪炭在制备抑制马兜铃酸致肾损伤作用药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,黄芪炭抑制马兜铃酸导致肾损伤的作用机制为:通过抗氧化应激、抗炎和抑制细胞凋亡途径。3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,所述的抑制肾损伤作用,可以是马兜铃酸引起的、可以是其他原因引...

【专利技术属性】
技术研发人员:孔慧赵琰屈会化张越王庆国董利洋曹天佑
申请(专利权)人:北京中医药大学
类型:发明
国别省市:

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