一种基于荧光显色的活性氧原位定量检测方法技术

本发明专利技术提供了一种基于荧光显色的活性氧原位定量检测方法，该方法以琼脂凝胶膜或聚酰胺膜为载体，将负载荧光分子底物的载体与活性氧氧化剂溶液混合，充分反应，将反应后体系进行辐照，得到反应后的荧光图像；将图像进行软件处理，数据计算，分别建立活性氧浓度与平均灰度的标准曲线，活性氧含量与总荧光强度的标准曲线。负载荧光分子底物后的载体与活性氧在特定波长下发生荧光显色反应，可用于场地活性氧的原位识别，实现活性氧的可视化及原位定量检测。该方法操作简单、经济高效，易于推广应用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
一种基于荧光显色的活性氧原位定量检测方法


[0001]本专利技术属于化学物质检测领域，尤其涉及一种基于荧光显色的活性氧原位定量检测方法。

技术介绍

[0002]活性氧(Reactive oxygen species，ROS)主要包括超氧化物(O2·
‑
)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(
·
OH)等物质，是氧气还原为水或其他氧化物的一类中间产物。据报道，活性氧广泛存在于自然界，如大气、土壤、河流、地下水以及各种氧化还原的环境界面等，具有较高的活性，可以氧化或还原环境中的各种物质，驱动大气、水和土壤中元素循环和污染物降解。同时在外界不利环境的胁迫下，生物体也会发生氧化应激反应，在细胞内产生活性氧，当活性氧含量过高时，生物体内抗氧化防御系体失衡，会对细胞膜、组织、器官等产生氧化损伤，严重时甚至会引发一系列的疾病。环境中的活性氧也会影响一些功能微生物的活性，如负责氮、铁和锰等元素循环以及光合氧气产生的相关微生物。因此活性氧作为一把双刃剑，在环境中具有重要角色，其检测方法的优化显得格外重要。r/>[0003]目本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于荧光显色的活性氧原位定量检测方法，其特征在于，按下列步骤进行：琼脂凝胶膜或聚酰胺膜载体制备：a、将琼脂颗粒加入磷酸盐缓冲溶液中，加热至80
‑
100℃，以500
‑
1000rpm搅拌直至完全溶解，降温至50
‑
60℃，加入荧光分子探针为2
′
,7
′‑
二氯二氢荧光素二乙酸酯，浓度为10
ꢀµ
M，缓慢注入专用模具中，待冷却凝固，得到负载荧光分子底物的含量为3
‑
5%琼脂凝胶膜载体；或将荧光分子探针2
′
,7
′‑
二氯二氢荧光素二乙酸酯与磷酸盐缓冲溶液充分混合后，加入聚酰胺膜浸没于混合液中0.5
‑
1h后取出；活性氧荧光成像过程：b、选择活性氧化剂为过氧化氢、羟基自由基或超氧阴离子自由基代表活性物种，分别配置浓度为0
ꢀµ
M、1
ꢀµ
M、4
ꢀµ
M、6
ꢀµ
M、8
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M、10
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M的过氧化氢、羟基自由基或超氧阴离子自由基标准水溶液，将配制的各浓度梯度的标准活性氧氧化剂分别添加至步骤a中...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾汉忠，申思奇，倪正，杨康杰，刘晋波，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：