一种人血清中肿瘤标记物Ｂｉｃｒ６蛋白的质谱筛选方法技术

本发明专利技术提供了一种人血清中肿瘤标记物Ｂｉｃｒ６蛋白的质谱筛选方法，其特征在于，具体步骤为：取人血清，用磁珠吸附后洗脱得到磁珠富集液；将磁珠富集液加入基质溶液，按以下条件进行基质辅助激光解离电离飞行时间质谱检测：第一离子源电压：２０ｋｖ；第二离子源电压：１８．６ｋｖ；晶体电压：７．６ｋｖ；脉冲离子时间：３２０ｎｓ；极性：正；矩阵抑制模式：门控；门控强度：最大；抑制高限：６００Ｄａ；检测器：１４００－１５００ｖ；样本率：１．００Ｇｓ／ｓ；电子获取：增强，１００ｍｖ；实时流畅：高；激光频率：２０Ｈｚ；激光衰减：关７３％，范围２０％；质荷比为４９６４±１处的峰为Ｂｉｃｒ６蛋白。本发明专利技术时间短、灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于蛋白检测 方法

技术介绍
Birc6 (baculoviral Inhibitor of Apoptosis (IAP) repeat-containing 6)被认 为是一种抗凋亡蛋白，其基因位于染色体2p22-21 。目前birc6的主要检测方法包括蛋白免 疫印记法、酶联免疫吸附法，它们的缺点是耗时、费力，灵敏度不够高，不适于大规模样本的 筛选。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服上述问题，提供一种人血清中肿瘤标记物Bicr6蛋白的质谱 筛选方法。 为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是提供一种人血清中肿瘤标记物Bicr6蛋 白的质谱筛选方法，其特征在于，具体步骤为 第一步采取人全血，4摄氏度下凝固1小时，离心，取上层血清，保存在-80摄氏 度冰箱中，将弱阳离子交换磁珠或免疫金属亲和铜离子磁珠与磁珠结合液在薄壁PCR管中 混合，加入血清样本，室温孵育5min，将薄壁PCR管置于磁珠分离器内进行磁珠分离，移去 上清，将所剩磁珠用磁珠洗涤液洗涤后，加入磁珠洗脱液，将薄壁PCR管置于磁珠分离器内 进行磁珠分离，得到洗脱液，将洗脱液与磁珠稳定液混合得到磁本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人血清中肿瘤标记物Ｂｉｃｒ６蛋白的质谱筛选方法，其特征在于，具体步骤为：第一步：采取人全血，４摄氏度下凝固１小时，离心，取上层血清，保存在－８０摄氏度冰箱中，将弱阳离子交换磁珠或免疫金属亲和铜离子磁珠与磁珠结合液在薄壁ＰＣＲ管中混合，加入血清样本，室温孵育５ｍｉｎ，将薄壁ＰＣＲ管置于磁珠分离器内进行磁珠分离，移去上清，将所剩磁珠用磁珠洗涤液洗涤后，加入磁珠洗脱液，将薄壁ＰＣＲ管置于磁珠分离器内进行磁珠分离，得到洗脱液，将洗脱液与磁珠稳定液混合得到磁珠富集液；第二步：将第一步得到的磁珠富集液加入基质溶液，按以下条件进行基质辅助激光解离电离飞行时间质谱检测：第一离子源电压：２０ｋｖ；第二离子源...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：沈锡中，薛如意，刘韬韬，董玲，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]