激活Hippo信号通路的多肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域。具体而言，本发明专利技术提供一种多肽，其包含WWC蛋白N端部分或其变体，所述多肽能够激活Hippo信号通路。本发明专利技术还提供所述多肽在制备用于治疗和/或预防Hippo通路失调相关疾病的药物中的用途。通路失调相关疾病的药物中的用途。通路失调相关疾病的药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
激活Hippo信号通路的多肽及其用途


[0001]本专利技术涉及生物医药领域。具体而言，本专利技术提供一种多肽，其包含WWC蛋白N端部分或其变体，并能够激活Hippo信号通路。本专利技术还提供所述多肽在制备用于治疗和/或预防Hippo通路失调相关疾病的药物中的用途。

技术介绍

[0002]Hippo通路最早发现于果蝇，是在调控多细胞动物器官大小方面发挥重要作用的信号通路。Hippo 通路与动物细胞的增殖、分化、凋亡和干细胞自我更新的调控紧密相关。Hippo通路在进化上非常保守性，它的组成主要为上游的激酶级联反应(在哺乳动物中由MST1/2(果蝇Hippo的同源蛋白)和 LATS1/2组成)和一些辅助蛋白(通常被称为支架(scaffold)蛋白或衔接(adaptor)蛋白，包括SAV、MOB1 (MOB1A和MOB1B)、NF2、AMOT、WWC等)以及下游的效应蛋白YAP和TAZ(二者为同源蛋白，同为转录共激活因子，可与TEAD等转录因子共同作用并调控靶基因的表达)。当Hippo通路被激活时，在辅助蛋白的参与下，MST1/2可以磷酸化并激活LATS1/2，LATS1/2进一步将YAP/TAZ磷酸化，磷酸化的YAP/TAZ处于失活状态，滞留在细胞质中，无法与转录因子(主要是TEAD)结合，从而抑制靶基因的表达；而当Hippo通路失活时，MST1/2和LATS1/2因去磷酸化而失活，YAP/TAZ在去磷酸化后被激活，从而迁移到细胞核中，与转录因子(主要是TEAD)相互作用并启动下游靶基因的表达。
[0003]正常的生理条件下，Hippo通路严格控制YAP/TAZ的活性，只在必需的时候(如胚胎发生和组织修复再生)才会激活YAP/TAZ；一旦Hippo通路失调(失活)，YAP/TAZ会被异常地活化，导致本来被 Hippo信号抑制的基因表达，从而导致疾病。例如，大量研究发现在神经纤维瘤、恶性间皮瘤、肾癌 (例如乳头状肾细胞癌(PRCC))、结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌、宫颈鳞癌和胃癌等不同类型癌症中都存在Hippo通路的异常失调(参见例如Zheng,Y.and D.Pan,Dev Cell,2019.50(3):p.264
‑
282)。此外，Hippo 通路会在一定程度上受到代谢信号和代谢物的调控，反过来Hippo通路也能通过影响代谢相关的基因表达从而影响细胞和机体的新陈代谢。因此，Hippo通路失调也参与和代谢相关的疾病，包括Ⅱ型糖尿病、脂肪肝和心血管疾病等(参见例如Ibar,C.and K.D.Irvine,Dev Cell,2020.54(2):p.256
‑
267；以及Ardestani,A.,B.Lupse,and K.Maedler,Trends Endocrinol Metab,2018.29(7):p.492
‑
509)。
[0004]Hippo信号通路的失调与癌症等疾病有着密切联系，这提示着Hippo通路可以作为靶点进行疾病的治疗。目前靶向Hippo通路相关蛋白的尝试主要有以下几种：(1)靶向YAP/TAZ及其下游的转录复合物。Verteporfin(维替泊芬)，一种FDA批准用于治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)的小分子抑制剂，能有效地直接阻断YAP/TAZ同TEAD之间的相互作用，大大降低Hippo通路下游靶基因CYR61、CTGF、 AXL和BIRC
‑
5的表达(参见Liu
‑
Chittenden,Y.,et al.,Genes Dev,2012.26(12):p.1300
‑
5)。但与此同时 Verteporfin也会导致某些参与主要细胞进程的蛋白的低聚反应，由此可能引起副作用(参见Brodowska, K.,et al.,Exp Eye Res,2014.124:p.67
‑
73；以及Gibault,F.,et al.,Curr Med Chem,2016.23(11):
p.1171
‑ꢀ
84)。另有一些化合物是通过抑制TEAD的棕榈酰化进而破坏YAP/TAZ与TEAD之间的相互作用(参见 Chan,P.,et al.,Nat Chem Biol,2016.12(4):p.282
‑
9；Pobbati,A.V.,et al.,Structure,2015.23(11):p.2076
‑ꢀ
86；Bum
‑
Erdene,K.,et al.,Cell Chem Biol,2019.26(3):p.378
‑
389e13；以及WO2017053706)。Super
‑ꢀ
TDU则是根据VGLL4蛋白设计的多肽，通过与YAP/TAZ竞争性结合TEAD，从而削弱YAP/TAZ与 TEAD的相互作用并抑制Hippo通路靶基因的表达(参见Jiao,S.,et al.,Cancer Cell,2014.25(2):p.166
‑ꢀ
80)。(2)靶向Hippo通路上游的调控元件。SHAP(STRN3
‑
derived Hippo
‑
activating peptide，STRN3衍生的Hippo激活肽)是根据STRN3与PP2Aa相互作用的结构设计的多肽，能有效阻断STRN3
‑
PP2Aa相互作用，从而激活MST1/2进而促进整个Hippo信号通路的活化(参见Tang,Y.,et al.,Cancer Cell,2020. 38(1):p.115
‑
128e9)。除此之外，还有MST1/2的抑制剂XMU
‑
MP
‑
1(Fan,F.,et al.,Sci Transl Med,2016. 8(352):p.352ra108)和LATS的抑制剂6
‑
6稠合双环杂芳基化合物(参见WO2018198077A2)，都能通过抑制Hippo通路上游的信号促进YAP/TAZ靶基因的表达，从而促进组织再生修复。总的来说，虽然近年来尝试靶向Hippo通路相关蛋白的研究很多，但目前尚没有进入临床试验的成功方案。

技术实现思路

[0005]在一方面，本专利技术提供一种多肽，其包含WWC蛋白N端部分或其变体，并且所述多肽相对于全长WWC蛋白是截短的，其中
[0006]所述WWC蛋白N端部分包含以下氨基酸序列中的任一个：
[0007]i)SEQ ID NO:1的氨基酸6
‑
180，
[0008]ⅱ
)SEQ ID NO:3的氨基酸10
‑
184，或
[0009]ⅱ
i)SEQ ID NO:5的氨基酸60
‑
234；
[0010]所述变体与所述WWC蛋白N端部分具有至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少 85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其包含WWC蛋白N端部分或其变体，并且所述多肽相对于全长WWC蛋白是截短的，其中所述WWC蛋白N端部分包含以下氨基酸序列中的任一个：i)SEQ ID NO:1的氨基酸6
‑
180，
ⅱ
)SEQ ID NO:3的氨基酸10
‑
184，或
ⅱ
i)SEQ ID NO:5的氨基酸60
‑
234；所述变体与所述WWC蛋白N端部分具有至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列相同性；并且所述WWC蛋白N端部分或其变体具有激活Hippo信号通路的活性。2.权利要求1的多肽，其中所述WWC蛋白N端部分包含以下氨基酸序列中的任一个：
ⅰ
)SEQ ID NO:1的氨基酸6
‑
180、6
‑
190、6
‑
200、1
‑
180、1
‑
190或1
‑
200；
ⅱ
)SEQ ID NO:3的氨基酸10
‑
184、10
‑
194、10
‑
204、1
‑
184、1
‑
194或1
‑
204；或
ⅲ
)SEQ ID NO:5的氨基酸60
‑
234、60
‑
244、60
‑
254、51
‑
234、51
‑
244、51
‑
250、51
‑
254、1
‑
234、1
‑
244或1
‑
254；所述变体与以上氨基酸序列中的任一个具有至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列相同性。3.权利要求2的多肽，其中所述变体包含以下氨基酸序列中的任一个：(1)SEQ ID NO:7、8、9、10、11或12的氨基酸6
‑
180、6
‑
190、6
‑
200、1
‑
180、1
‑
190或1
‑
200；(2)SEQ ID NO:13的氨基酸49
‑
223、50
‑
250或1
‑
250；(3)SEQ ID NO:14、15、16、17或18的氨基酸10
‑
184、10
‑
194、10
‑
204、1
‑
184、1
‑
194或1
‑
204；(4)SEQ ID NO:19的氨基酸61
‑
235、52
‑
251或1
‑
235；或者(5)SEQ ID NO:20的氨基酸44
‑
218、35
‑
234或1
‑
218。4.权利要求2的多肽，其中所述变体包含相对于以下氨基酸序列中的任一个具有一个或多个突变的氨基酸序列：
ⅰ
)SEQ ID NO:1的氨基酸6
‑
180、6
‑
190、6
‑
200、1
‑
180、1
‑
190或1
‑
200；
ⅱ
)SEQ ID NO:3的氨基酸10
‑
184、10
‑
194、10
‑
204、1
‑
184、1
‑
194或1
‑
204；或
ⅲ
)SEQ ID NO:5的氨基酸60
‑
234、60
‑
244、60
‑
254、51
‑
234、51
‑
244、51
‑
250、51
‑
254、1
‑
234、1
‑
244或1
‑
254；其中所述突变包括氨基酸的取代和/或缺失。5.权利要求4的多肽，其中所述突变包括：
ⅰ
)相对于SEQ ID NO:1的氨基酸6
‑
180、6
‑
190、6
‑
200、1
‑
180、1
‑
190或1
‑
200所示的氨基酸序列包含氨基酸取代；优选地，所述取代包括对应于SEQ ID NO:1中以下位置处的一个或多个氨基酸的取代：87、88、89、90、91、92、93、94、97、98以及101
‑
150；
ⅱ
)相对于SEQ ID NO:3的氨基酸10
‑
184、10
‑
194、10
‑
204、1
‑
184、1
‑
194或1
‑
204所示的氨基酸序列包含氨基酸取代；优选地，所述取代包括对应于SEQ ID NO:3中以下位置处的一个或多个氨基酸的取代：91、92、93、94、95、96、97、98、101、102以及105
‑
154；
ⅲ
)相对于SEQ ID NO:5的氨基酸60
‑
234、60
‑
244、60
‑
254、51
‑
234、51
‑
244、51
‑
250、51
‑
254、1
‑
234、1
‑
244或1
‑
254所示的氨基酸序列包含氨基酸取代；优选地，所述取代包括对应于SEQ ID NO:5中以下位置处的一个或多个氨基酸的取代：141、142、143、144、145、146、147、148、151、152以及155
‑
204。6.权利要求5的多肽，其中所述取代包括
ⅰ
)用丙氨酸取代对应于SEQ ID NO:1中以下位置处的一个或多个氨基酸：87、88、89、90、91、92、93、94、97和98；
ⅱ
)用丙氨酸取代对应于SEQ ID NO:3中以下位置处的一个或多个氨基酸：91、92、93、94、95、96、97、98、101和102；或
ⅲ
)用丙氨酸取代对应于SEQ ID NO:5中以下位置处的一个或多个氨基酸：141、142、143、144、145、146、147、...

【专利技术属性】
技术研发人员：余发星，祁思娴，钟振兴，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：