【技术实现步骤摘要】
一种PE
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STOP基因编辑系统及基因敲除方法和应用
[0001]本专利技术属于基因编辑
,具体涉及一种PE
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STOP基因编辑系统及基因敲除方法和应用。
技术介绍
[0002]先导编辑(Prime editing,PE)系统是由Anzalone等人于2019年开发的一种基于“搜索和替换”的新型基因组编辑工具,此系统无需在被编辑生物基因组中引入双链断裂和供体DNA模板即可实现小片段插入、缺失及四种碱基的任意替换。最早的PE系统由改造后的引导RNA—pegRNA和prime editor蛋白组成,其中pegRNA由Spacer、scaffold和引物结合序列(Primerbinding site,PBS)及逆转录序列(Reverse transcriptase,RT)组成,行使搜索功能并将RT序列的编辑信息逆转录至编辑位点,prime editor蛋白由逆转录酶和Cas9切口酶融合而成。该系统弥补了CRISPR/Cas9、ABE、CBE等编辑工具编辑类型有限、indel发生率高及易产生 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种PE
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STOP基因编辑系统,其特征在于,其包括primeeditor蛋白、靶向目标位点的pegRNA及其配套切割的nickingsgRNA,所述primeeditor蛋白选自PEmax,所述PEmax的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的PE
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STOP基因编辑系统,其特征在于,所述pegRNA的3
′
端包含xrRNA的抗降解修饰。3.权利要求1所述基因编辑系统在生物体或生物细胞基因组序列的编辑中的应用。4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述编辑是将目的基因序列进行碱基替...
【专利技术属性】
技术研发人员:王小龙,宋梓虢,黄舒泓,陈炳春,陈玉林,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:
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