一种水中细菌总数便捷检测盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种水中细菌总数便捷检测盒及检测方法。检测盒包括多个毛细管和稀释管、一个固态培养基盒；固态培养基盒内设有多个格子，格子内设有固态培养基，固态培养基的表面设有2层无菌滤纸片。本发明专利技术利用毛细管进行10倍梯度稀释，可以比较方便地对样品进行稀释，且可以使做到小型化。本发明专利技术在液体稀释培养计数法的原理的基础上，创新性的把液态培养转化为固态培养，利用毛细管吸取水样点接到固态培养基上。本发明专利技术检测盒具有体积小、便携、操作方便等特点，可适用于环境科学科研人员专业检测和普通非专业人员家庭日常检测使用。检测和普通非专业人员家庭日常检测使用。检测和普通非专业人员家庭日常检测使用。

【技术实现步骤摘要】
一种水中细菌总数便捷检测盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及环境监测
，具体涉及一种水中细菌总数便捷检测盒及检测方法。

技术介绍

[0002]饮用水的安全性关乎人们的健康，饮用水中重金属离子、有害阴离子、有机农药等有害有机物威胁着人们的健康，饮用水的微生物学指标更是饮用水安全性的重要指标。水中活细菌数的含量是一个表征是否适合饮用的重要卫生指标，如何快速、简单有效检测水中细菌总数特别是活细菌数，是一个值得探讨的问题。
[0003]现有的对于水中细菌总数的检测方法，不论是传统的标准检测方法还是新开发的基于现代科技理论的检测方法还是一些专用检测仪器设备，要么存在对实验室仪器设备具有较大的依赖性、要么对现代仪器设备的依赖性较强而提升了检测成本、或者设备的不便携性或者操作的复杂性而使得非专业人士很难方便地操作完成。以上方法存在的不足使水中细菌总数的检测变得非常不方便，而饮用水中细菌总数又是关乎饮用水安全的一个重要指标，普通家庭非常有必要了解。现有的检测设备对于普通家庭的一般人群难以掌握，同时一般家庭和普通人群不具备相应的实验条件。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中的上述不足，本专利技术的目的在于提供一种水中细菌总数便捷检测盒及检测方法。使得不具备专业知识的人员通过使用说明和简单的操作步骤也能方便应用。
[0005]为了达到上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0006]一方面，提供一种水中细菌总数便捷检测盒，其包括多个毛细管和稀释管、一个固态培养基盒；固态培养基盒内设有多个格子，格子内设有固态培养基，固态培养基的表面设有2层无菌滤纸片。
[0007]进一步地，固态培养基是在牛肉膏蛋白胨固态培养基基础上，将琼脂的量减少至0.8％。
[0008]另一方面，提供一种使用检测盒检测水中细菌总数的方法，该方法包括以下步骤：
[0009]步骤1、从待测水源采集水样，利用毛细管对水样进行10倍梯度系列稀释；
[0010]步骤2、将系列稀释后的水样接种于固态培养基盒；
[0011]步骤3、将接种后的固态培养基盒置室温2－5d，观察格子内菌落形成情况，记录长菌格子的数量和数量指标。
[0012]进一步地，检测盒每行设有5个格子，共9排，每5个小格点接1个稀释度的水样，9排为9个稀释度，稀释度为10
‑2－10
‑
10
。
[0013]本专利技术的有益效果为：
[0014]1、在液体稀释培养计数(最大可能数MPN)法的原理的基础上，创新性的把液态培
养转化为固态培养，利用毛细管吸取水样点接到固态培养基上。
[0015]2、本专利技术利用毛细管进行10倍梯度稀释，可以比较方便地对样品进行稀释，且可以使做到小型化。
[0016]3、本专利技术检测盒具有体积小、便携、操作方便等特点，可适用于环境科学科研人员专业检测和普通非专业人员家庭日常检测使用。
附图说明
[0017]图1为金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨平板(加了2层滤纸)上的生长情况示意图。
具体实施方式
[0018]下面对本专利技术的具体实施方式进行描述，以便于本
的技术人员理解本专利技术，但应该清楚，本专利技术不限于具体实施方式的范围，对本
的普通技术人员来讲，只要各种变化在所附的权利要求限定和确定的本专利技术的精神和范围内，这些变化是显而易见的，一切利用本专利技术构思的专利技术创造均在保护之列。
[0019]实施例1
[0020]一种水中细菌总数便捷检测盒，其包括15支1.0
×
100mm的毛细管(两端开口，无菌)；9个200μL离心管(无菌，每个里面180μL无菌生理盐水)，用于10梯度稀释；1个包括5列9行小格子的固态培养基盒，每个小格子为10mm
×
10mm
×
15mm，每个小格子内设有固态培养基，固态培养基是在牛肉膏蛋白胨固态培养基基础上，将琼脂的量减少至0.8％制成。固态培养基的表面设有2层无菌滤纸片。
[0021]因本专利技术接种是利用毛细管进行点接，因用毛细管吸水样后在固态培养基表面点接时不吸水，所以需在固态培养基表面覆盖2层无菌滤纸片(前期试验证明1层滤纸片吸水效果也不好)。经预试验证明，由于固态培养基可以持续为细菌生长提供营养源和水分，细菌可以在滤纸表面形成菌落。作为一种优选方式，可在固态培养基盒表面覆盖一层无菌锡箔纸以避免被空气中的微生物污染还能起到保湿作用。
[0022]实施例2
[0023]一种使用实施例1提供的检测盒检测水中细菌总数的方法，该方法具体包括以下步骤：
[0024]步骤1、从待测水源采集水样10mL(如测土壤样品，先对土壤用无菌水做成土壤悬液)，利用毛细管对水样进行10倍梯度系列稀释；
[0025]稀释器具：规格为1.0
×
100mm的毛细管(两端开口，水样吸取量为20μL)、稀释管(200μL离心管)；无菌生理盐水(0.9％ NaCl)。梯度稀释前的加水量：稀释管数量及每管加无菌生理盐水量见下表：
[0026][0027]水样的稀释过程：用规格为1.0
×
100mm的毛细管吸取水样加入到第1列稀释管
‑
1中，每管各加入20μL(0.02mL，作为第一次稀释倍数2
×
10
‑2)。毛细管加入到稀释管
‑
1无菌生理盐水中上下快速移动5次，使吸附的水样进入1号稀释管
‑
1中，并混匀是为10
‑3倍稀释液；吸取20μL水样加入到稀释管
‑
2中混匀，其稀释倍数为10
‑4倍稀释液。以此类推，于稀释管
‑
7中，得到稀释倍数为10
‑9倍稀释液，如上表所示。
[0028]步骤2、将系列稀释后的水样接种于固态培养基盒；
[0029]点接时用毛细管从每一稀释度每次取20μL，因此如果用毛细管吸取水样点接，相当于又稀释了1次(10
‑1倍)。接种方式如下表。
[0030][0031]注意，用毛细管从原水样中吸取水样为20μL即0.02mL进行点接，0.02mL为2
×
10
‑2mL，记为10
‑2数量级。
[0032]步骤3、将接种后的固态培养基盒置室温2－5d，观察格子内菌落形成情况，记录长菌格子的数量和数量指标。根据数量指标对照《5管最大或然数表》并结合稀释倍数计算每mL细菌总数。注意因规格为1.0
×
100mm的毛细管吸取水样的量为20μL，是1mL的2
×
10
‑2倍，所以每mL细菌总数还需
×
2。
[0033]实施例3
[0034]为了验证本专利技术的可靠性，做了如下实验：
[0035](1)对含菌水样10倍梯度系列稀释：
[0036]1)含菌样品的制备：取1mL无菌生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种水中细菌总数便捷检测盒，其特征在于，包括多个毛细管和稀释管、一个固态培养基盒；固态培养基盒内设有多个格子，格子内设有固态培养基，固态培养基的表面设有2层无菌滤纸片。2.根据权利要求1所述的水中细菌总数便捷检测盒，其特征在于，所述固态培养基是在牛肉膏蛋白胨固态培养基基础上，将琼脂的量减少至0.8％。3.一种使用权利要求1或2所述的检测盒检测水中细菌总数的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、从待测水源采集水...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新军，王瑞红，王天辰，孙伟铭，刘天派，张首超，卢杰，
申请(专利权)人：西藏农牧学院，
类型：发明
国别省市：