一种lncRNAUPK1A-AS1的抗体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种lncRNAUPK1A

【技术实现步骤摘要】
一种lncRNA UPK1A
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AS1的抗体及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，尤其是涉及一种lncRNA UPK1A
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AS1的抗体及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC，简称肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一，全球发病率呈逐年增长趋势。肝癌起病隐匿，70％以上的患者就诊时已是晚期，索拉非尼和仑伐替尼靶向治疗是晚期肝癌的一线治疗手段，但治疗效果欠佳，免疫检查点抑制剂单药治疗在肝癌中的总体有效率仅15％～20％。
[0003]因此，需要提供一种治疗效果好的新的抗肝癌药物。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种免疫原，用于免疫动物制备得到的抗体，能够特异性识别lncRNA UPK1A
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AS1编码的多肽，还能够用于预防治疗肝癌。
[0005]本专利技术还提供一种生物材料。
[0006]本专利技术还提供一种多克隆抗体的制备方法。
[0007]本专利技术还提供一种多克隆抗体。
[0008]本专利技术还提供上述多克隆抗体在制备预防或治疗肝癌的药物中的应用。
[0009]本专利技术还提供一种用于预防或治疗肝癌的药物。
[0010]本专利技术还提供上述多克隆抗体在制备检测lncRNA UPK1A
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AS1编码的多肽的试剂盒中的应用。
[0011]本专利技术还提供一种试剂盒。
[0012]根据本专利技术的第一方面实施例的一种免疫原，包括：氨基酸序列如SEQ ID NO.1的多肽和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的多肽。
[0013]根据本专利技术实施例的免疫原，至少具有如下有益效果：
[0014]既往研究认为lncRNA缺乏编码蛋白的能力，本专利技术首次发现lncRNA UPK1A
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AS1能编码多肽，氨基酸序列如SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.2所示的多肽能够促进肝癌细胞的增殖，且作为免疫原用于免疫动物能够制备得到可特异性识别lncRNA UPK1A
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AS1编码的多肽的抗体，该抗体还可以用于治疗肝癌。
[0015]根据本专利技术的一些实施例，所述免疫原用于制备抗lncRNA UPK1A
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AS1编码蛋白的抗体。所述抗体选自多克隆抗体或单克隆抗体。
[0016]根据本专利技术的一些实施例，所述免疫原还包括载体蛋白，所述载体蛋白与氨基酸序列如SEQ ID NO.1和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的多肽偶联。载体蛋白与多肽偶联作为免疫原有利于刺激辅助性T细胞，进一步诱导B细胞免疫反应。
[0017]根据本专利技术的一些实施例，所述血清白蛋白、血蓝蛋白、卵清蛋白、甲状腺球蛋白、
霍乱毒素B亚单位、大肠杆菌不稳定毒素B亚单位、白喉类毒素、破伤风类毒素中的至少一种。所述载体蛋白具体可以为血蓝蛋白。
[0018]根据本专利技术的一些实施例，所述免疫原可以经过原核表达或真核表达纯化，也可以根据其多肽序列由生物公司通过化学合成制备。
[0019]根据本专利技术的第二方面实施例的一种生物材料，包括1)至4)中的至少一种，
[0020]1)编码本专利技术第一方面实施例中所述的免疫原的核酸分子；
[0021]2)包含1)中所述核酸分子的表达盒；
[0022]3)包含1)中所述核酸分子或2)中所述表达盒的重组载体；
[0023]4)包含1)中所述核酸分子或2)中所述表达盒或3)中所述重组载体的重组细胞。
[0024]根据本专利技术的一些实施例，所述表达盒是指能够在宿主细胞中表达所述免疫原的DNA。该DNA不但可包括启动编码所述免疫原的核酸分子转录的启动子，还可包括终止转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。
[0025]根据本专利技术的一些实施例，所述重组载体可以为在所述载体的多克隆位点插入编码所述免疫原的核酸分子得到的重组载体。
[0026]根据本专利技术的一些实施例，所述重组生物细胞包括原核细胞和真核细胞。所述原核细胞包括细菌或藻。所述真核细胞包括真菌、哺乳动物细胞或昆虫细胞。所述重组生物细胞不包含生殖材料。
[0027]根据本专利技术的一些实施例，所述重组生物细胞为向生物细胞中导入1)所述核酸分子、2)所述表达盒或3)所述重组载体，得到的重组生物细胞。
[0028]根据本专利技术的第三方面实施例的一种lncRNA UPK1A
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AS1的多克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：
[0029]以上述第一方面所示的实施例中的免疫原对动物进行免疫，得到多克隆抗体。
[0030]根据本专利技术的一些实施例，所述动物包括但不限于鼠、牛、兔、马、羊或猪。所述动物具体可以为大耳白兔。
[0031]根据本专利技术的一些实施例，所述免疫的部位包括但不限于背部皮下、腹部皮下、腋窝皮下、四肢皮下。
[0032]根据本专利技术的一些实施例，所述制备方法中，免疫的次数为5～6次。
[0033]根据本专利技术的一些实施例，第一次免疫为初次免疫，采用弗式完全佐剂。其余免疫均为加强免疫，采用弗式不完全佐剂。
[0034]根据本专利技术的一些实施例，初次免疫与第一次加强免疫间隔10～14天。具体可以为12天。
[0035]根据本专利技术的一些实施例，每次加强免疫间间隔12～16天。具体可以为14天。
[0036]根据本专利技术的一些实施例，用于初次免疫的所述免疫原的剂量为0.6mg/只～0.8mg/只。用于加强免疫的所述免疫原的剂量为0.25mg/只～0.45mg/只。
[0037]根据本专利技术的一些实施例，所述制备方法还包括对采集的动物血清进行亲和纯化，得到多克隆抗体。
[0038]根据本专利技术的一些实施例，所述多克隆抗体包括IgG抗体。
[0039]根据本专利技术的第四方面实施例的一种lncRNA UPK1A
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AS1的多克隆抗体，由上述第二方面所示的实施例中的制备方法制备得到。
[0040]根据本专利技术实施例的多克隆抗体，至少具有如下有益效果：
[0041]实施例的多克隆抗体能够特异性识别lncRNA UPK1A
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AS1编码的多肽；还可以用于预防、治疗肝癌，能够显著抑制肿瘤的增殖，减少肿瘤体积和重量，且没有相关的药物治疗的副作用。
[0042]根据本专利技术的第五方面实施例的上述多克隆抗体在制备预防或治疗肝癌的药物中的应用。
[0043]根据本专利技术的第六方面实施例的一种用于预防或治疗肝癌的药物，包括上述多克隆抗体。由于药物采用了上述实施例的多克隆抗体的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果。
[0044]根据本专利技术的一些实施例，所述药物还包括药学上可接受的载体。所述载体包括稀释剂、赋形本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫原，其特征在于，包括：氨基酸序列如SEQ ID NO.1的多肽和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的多肽。2.根据权利要求1所述的免疫原，其特征在于，所述免疫原还包括载体蛋白，所述载体蛋白与氨基酸序列如SEQ ID NO.1的多肽和/或氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的多肽偶联；优选地，所述载体蛋白包括血清白蛋白、血蓝蛋白、卵清蛋白、甲状腺球蛋白、霍乱毒素B亚单位、大肠杆菌不稳定毒素B亚单位、白喉类毒素、破伤风类毒素中的至少一种。3.一种生物材料，其特征在于，包括1)至4)中的至少一种，1)编码权利要求1或2所述的免疫原的核酸分子；2)包含1)中所述核酸分子的表达盒；3)包含1)中所述核酸分子或2)中所述表达盒的重组载体；4)包含1)中所述核酸分子或2)中所述表...

【专利技术属性】
技术研发人员：张冬艳，吴德华，邹雪晶，宋旸，张雅璇，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：