一种提高植物外泌体稳定性的提取方法技术

本发明专利技术提供了一种提高植物外泌体稳定性的提取方法，属于植物外泌体技术领域。本发明专利技术的提取方法，包括如下步骤：(1)采用聚合物沉淀法制备植物外泌体粗溶液；(2)对所述植物外泌体粗溶液依次进行脂肪酸修饰和聚乙二醇修饰，得到植物外泌体交联体系；(3)向所述植物外泌体交联体系中加入海藻糖溶液，混合，离心，重悬，得到高稳定性的植物外泌体。本发明专利技术结合聚合物沉淀法、脂肪酸修饰法、聚乙二醇修饰法，提高了植物外泌体的产量，增加了植物外泌体的稳定性、生物可行性和生物活性，减少其在提取、保存等过程中的降解率。存等过程中的降解率。存等过程中的降解率。

【技术实现步骤摘要】
一种提高植物外泌体稳定性的提取方法


[0001]本专利技术涉及植物外泌体
，尤其涉及一种提高植物外泌体稳定性的提取方法。

技术介绍

[0002]外泌体是一种细胞外分泌的囊泡，包含了一系列的生物活性分子，如蛋白质、核酸、脂质等，具有广泛的生物学功能和应用价值。植物外泌体样纳米囊泡(plant exosome
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like nanovesicles，PELNVs)是源于植物真核细胞的多泡体，通过后者与质膜融合释放到细胞外的一种膜性小囊泡，由于来源于植物，资源广泛，因此具有大规模生产的可行性。与此同时，来源于药用植物的PELNVs往往富含各种具有生物活性的脂质、蛋白质、RNA等成分，是天然的纳米制剂，被证明在肿瘤、免疫调节、肠道疾病与再生医学等方面具有显著的调控作用。并且，PELNVs兼具纳米载体的形态与特点，因此可作为低毒的纳米载体实现对外源性药物分子的递送，相比哺乳动物来源和人工合成的纳米囊泡，基于PELNV的药物递送纳米平台在生物相容性、稳定性、体内分布、延长半衰期和细胞内化等方面都表现出显著的优势。此外，PELNVs还具本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高植物外泌体稳定性的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用聚合物沉淀法制备植物外泌体粗溶液；(2)对所述植物外泌体粗溶液依次进行脂肪酸修饰和聚乙二醇修饰，得到植物外泌体交联体系；(3)向所述植物外泌体交联体系中加入海藻糖溶液，混合，离心，重悬，得到高稳定性的植物外泌体。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)所述植物外泌体粗溶液的制备方法，包括如下步骤：a.向植物组织中加入PBS溶液，经破碎，得到植物提取汁；b.将所述植物提取汁以800～1200g离心10～20min，取上清液；c.将步骤b所得上清液以4000～6000g离心25～40min，取上清液；d.将步骤c所得上清液与聚乙二醇
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800混合，使聚乙二醇
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800的终浓度为5～15％，离心，取沉淀物；e.将所述沉淀物溶于PBS溶液，并加入聚乙二醇
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800，使聚乙二醇
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800的终浓度为2～5％，混合均匀后，离心，重悬，得到所述植物外泌体粗溶液。3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤a中，所述植物组织与所述PBS溶液的体积比为(0.5～2)：(0.5～2)。4.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，步骤d中，所述聚乙二醇
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800的原始浓度为50～60％；所述混合的温度为0～4℃，所述混合的时间为12～16h。5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，步骤e中，所述PBS溶液的体积为2～8...

【专利技术属性】
技术研发人员：王卫中，张鹏飞，连昕，谭雅，王子霆，刘琳娜，张晓松，
申请(专利权)人：深圳市华健生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：