本发明专利技术公开了一种蓝莓快速增殖的培养方法，使用改良MS液体培养基，结合超声波气雾激发装置对蓝莓的无菌组培苗进行培养；所述改良MS液体培养基还加入1.0
【技术实现步骤摘要】
一种蓝莓快速增殖的培养方法
[0001]本专利技术涉及一种蓝莓快速增殖的培养方法，属于植物培养领域。
技术介绍
[0002]蓝莓(Vaccinium corymbosum)为杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium)多年生落叶或常绿灌木，其果实营养丰富，果肉细腻，风味独特，具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人体免疫等功能，是世界粮食及农业组织推荐的五大健康水果之一。现代人对蓝莓的需求量越来越大，因此需要研发一种简单易行的、蓝莓的快速增殖方法。
技术实现思路
[0003]专利技术目的：本专利技术的目的是提供了一种操作简单、增殖速度快的蓝莓的培养方法。
[0004]技术方案：本专利技术的一种蓝莓快速增殖的培养方法，包括以下步骤：
[0005]使用改良MS液体培养基，结合超声波气雾激发装置对蓝莓的无菌组培苗进行培养；所述改良MS液体培养基的成分及含量为：KNO3：1000mg/L，(NH4)2SO4：300mg/L，KH2PO4：300mg/L，CaCl2·
2H2O：440mg/L，MgSO4·
7H2O：180mg/L，FeSO4·
7H2O：27.8mg/L，Na2·
EDTA
·
2H2O：37.3mg/L，KI：0.83mg/L，H3BO3：6.2mg/L，MnSO4·
4H2O：22.3mg/L，ZnSO4·
7H2O：8.6mg/L，CuSO4·
5H2O：0.025mg/L，Na2MoO4·
2H2O：0.25mg/L，CoCl2·
6H2O：0.025mg/L，肌醇：100mg/L，烟酸：0.5mg/L，盐酸吡哆醇：0.5mg/L，盐酸硫胺素：0.1mg/L，甘氨酸：2mg/L，并加入1.0
‑
1.5mg/L的ZT和30g/L的蔗糖。
[0006]进一步地，所述声波气雾激发装置所用的培养容器为无菌杯。
[0007]进一步地，所述无菌杯在使用前经电离辐射灭菌。
[0008]进一步地，所述无菌杯为160mm高的方形塑料无菌杯。
[0009]进一步地，所述无菌杯所用的无菌膜为透气的热焊接膜，热焊时温度为160
‑
170℃。
[0010]进一步地，所述无菌杯使用压膜机自动封膜。
[0011]进一步地，所述蓝莓的无菌组培苗在培养容器中的放置方法为平放。
[0012]进一步地，所述超声波气雾激发装置的设置条件为气雾激发频次4次/d，激发时间为5min/次。
[0013]进一步地，培养条件为培养温度25
±
2℃，相对湿度70
‑
80％，光照强度2000
‑
3000Lx，光照时间12h/d。
[0014]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下突出的显著优点：本专利技术的蓝莓快速增殖的培养方法，操作简单，整体培养时间短，污染率低，增殖系数最高可达到11.2。
具体实施方式
[0015]下面结合具体方案对本专利技术的技术方案作进一步说明。
[0016]实施例1
[0017]1、蓝莓培养方法
[0018]1.1材料：蓝莓的无菌组培苗。
[0019]1.2.方法与步骤：
[0020]1.2.1液体培养基配制、灭菌以及杯托的灭菌
[0021]所使用的培养基为改良MS液体培养基，成分为KNO3：1000mg/L，(NH4)2SO4：300mg/L，KH2PO4：300mg/L，CaCl2·
2H2O：440mg/L，MgSO4·
7H2O：180mg/L，FeSO4·
7H2O：27.8mg/L，Na2·
EDTA
·
2H2O：37.3mg/L，KI：0.83mg/L，H3BO3：6.2mg/L，MnSO4·
4H2O：22.3mg/L，ZnSO4·
7H2O：8.6mg/L，CuSO4·
5H2O：0.025mg/L，Na2MoO4·
2H2O：0.25mg/L，CoCl2·
6H2O：0.025mg/L，肌醇：100mg/L，烟酸：0.5mg/L，盐酸吡哆醇：0.5mg/L，盐酸硫胺素：0.1mg/L，甘氨酸：2mg/L，并加入1.0mg/L或1.5mg/L的ZT和30g/L的蔗糖。使用前需要先进行配制并灭菌。液体培养基配制好后装入500ml的三角瓶中，用封口膜密封；同时将5cm高的方形杯托放入牛皮纸袋包装好，与培养基一起放入高压灭菌锅灭菌，有效灭菌温度为121℃，有效灭菌时间为20min。
[0022]1.2.2压膜机上无菌膜的安装，机器的开启
[0023]将无菌膜安装到压膜机，开启压膜机电源开关，选择自动压模模式，待加热温度达170℃就可以进行无菌膜的塑封了。
[0024]1.2.3无菌操作及压膜机封膜
[0025]进行无菌操作前半小时，开启超净工作台的紫外灯及风机，待时间到后关闭紫外灯，即可进行接种操作。在超净工作台上，首先将灭菌的杯托，放入无菌杯中；然后将液体培养基倒入无菌杯，并进行接种苗木的剪切，将剪切为1.5cm后的无菌苗放置于杯托上，每瓶培养基放置8
‑
10个无菌苗，放置方式为平放；最后将无菌杯放置于压膜机的压模盒，机器开始进行自动封膜。所述无菌杯为160mm高的方形塑料无菌杯。
[0026]1.2.4超声波气雾激发装置的准备及设置
[0027]将超声波气雾激发底座装入适量去离子水，淹没底层，接通电源，在电源的控制面板上设置超声波激发时间和频次，频次为4次/d，时间5min/次。
[0028]1.2.5培养物的培养
[0029]设置培养室的培养温度(25
±
2)℃，室内相对湿度70
‑
80％，光照强度保持在2000
‑
3000Lx，培养时间控制在每天12h。将接种和塑封好的无菌杯，放入超声波气雾激发底座上进行雾培。培养过程中注意底座中的去离子水要及时进行添加，并随时观察无菌苗的生长过程。
[0030]1.2.6数据记录及分析：培养25d后，对气雾培养激发高度进行记录，使用无菌杯及压膜技术进行增殖培养与利用培养瓶培养的污染率对比、接种效率对比；利用气雾培养装置进行气雾培养与固体培养两种方式下蓝莓的增殖与生长效果对比，利用spss对数据进行处理分析。
[0031]2最优培养条件的确定
[0032]2.1、最优培养容器的确定
[0033]分别用无菌杯和培养瓶做培养容器，其余步骤同1中的培养方法。
[0034]利用无菌杯培养的气雾激发高度明显高于培养瓶，气雾高度可以达到杯托以上1
‑
2cm高度，而利用培养瓶培养，气雾激发的高度仅能达到杯托位置，究其原因是由于塑料无菌杯材料薄，超声波效果容易穿透瓶壁，使气雾高度上升。培养过程中材料不本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种蓝莓快速增殖的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：使用改良MS液体培养基，结合超声波气雾激发装置对蓝莓的无菌组培苗进行培养；所述改良MS液体培养基的成分及含量为：KNO3：1000mg/L，(NH4)2SO4：300mg/L，KH2PO4：300mg/L，CaCl2·
2H2O：440mg/L，MgSO4·
7H2O：180mg/L，FeSO4·
7H2O：27.8mg/L，Na2·
EDTA
·
2H2O：37.3mg/L，KI：0.83mg/L，H3BO3：6.2mg/L，MnSO4·
4H2O：22.3mg/L，ZnSO4·
7H2O：8.6mg/L，CuSO4·
5H2O：0.025mg/L，Na2MoO4·
2H2O：0.25mg/L，CoCl2·
6H2O：0.025mg/L，肌醇：100mg/L，烟酸：0.5mg/L，盐酸吡哆醇：0.5mg/L，盐酸硫胺素：0.1mg/L，甘氨酸：2mg/L，并加入1.0
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1.5mg/L的ZT和30g/L的蔗糖。2.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：王红梅，王剑，王永平，毛霞，黄莉清，范利静，呼苗苗，冯朵，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：
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