本发明专利技术涉及一种从三孢布拉霉菌发酵液制备β－胡萝卜素的方法，包括：过滤三孢布拉霉菌发酵液，得到湿菌丝体；将湿菌丝体真空干燥，得到水分小于１０％的干菌丝体；研磨粉碎干菌丝体；用相当于干菌丝体质量１５～２０倍的二氯甲烷浸提过筛后的干菌丝体，蒸发浓缩浸提液至β－胡萝卜素浓度不低于５００００μｇ／ｍｌ后，保温、过滤得到β－胡萝卜素晶体的湿粗品；再用二氯甲烷溶解所述湿粗品，将溶解液过滤、蒸发浓缩至β－胡萝卜素浓度不低于５００００μｇ／ｍｌ后，保温、过滤、真空干燥得到β－胡萝卜素晶体。本方法工艺流程短，操作步骤少，全过程仅使用一种溶剂，生产过程易于控制，产品含量高，且成本低，收率高，适于工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品、医药、化工领域，涉及微生物发酵液提取技术，具体涉及一种从 三孢布拉霉菌发酵液中制备β-胡萝卜素的方法。
技术介绍
类胡萝卜素(包括β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素等)具有增强免疫、抗氧化等 多种重要的生理作用，其中的胡萝卜素是一种广泛存在的脂溶性类胡萝卜素，与人体 的健康密切相关，不仅具有抗癌、抗氧化、抗辐射等很高的药用价值，而且在人和动物体内 可转化为维生素Α，是人体必需的维生素A的重要来源。大量资料表明，人的血浆中β-胡萝卜素含量过低，与肺癌发生率高密切相关，与乳腺癌，胃癌，膀胱癌，宫颈癌等的发生率呈负 相关，同时还会引起眼疾，轻度者发生夜盲症，重度者造成角膜溃疡，晶体脱落甚至失明。因 此β-胡萝卜素兼具营养和很高的药用价值，目前已被广泛地应用于食品、药品、化妆品、 保健品等行业。天然β-胡萝卜素可从植物、藻类等含量较高的生物中提取，但受产量、条件等限 制，产量有限。发酵法生产的胡萝卜素具有与天然产物相同的单一的手性结构产物，且 不需复杂的光照等过程、生物量大，因此从上世纪70年代起就得到广泛的关注和研究。其 中，三孢布拉霉(Blakeslea trispora)的正负菌是目前为止发酵生产β-胡萝卜素最为高 产的生产菌株，可发酵产生大量的胡萝卜素。从植物、藻类等含量较高的生物中提取 β -胡萝卜素的研究较多，但从三孢布拉霉菌发酵液制备β “胡萝卜素的研究较少。现有从三孢布拉霉菌发酵液制备β -胡萝卜素的技术常因浸提不完全导致收率 不高，为了提高收率，通常要采取破壁技术。而采用各种破壁的方法又往往造成固液不易分 离，工业化应用性不强。如专利申请00116697. 2 —种β _胡萝卜素的提取方法，就是从三 孢布拉霉菌发酵液制备β -胡萝卜素，其包括过滤发酵液得到湿菌丝体；将湿菌丝体进行 细胞破壁；破壁后的湿菌丝体固液分离，用脱水剂进行脱水；脱水后用有机溶剂提取胡 萝卜素；提取液经结晶、真空干燥得到胡萝卜素晶体。该专利中使用了破壁技术，因此 后续引出了固液分离的步骤，增加了该方法提取胡萝卜素的难度。而本专利技术在对本申请人三孢布拉霉菌发酵液开展研究的基础上，开发了一种适于 工业化生产的方法。本专利技术不需要采取破壁技术，可以简便的从三孢布拉霉菌发酵液中制 备β-胡萝卜素。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供了一种不需采用破壁技术，减少溶剂使用量及 种类，更适于工业化生产的从三孢布拉霉菌发酵液制备胡萝卜素的方法。本专利技术的主要目的在于提供一种从三孢布拉霉菌发酵液制备胡萝卜素的方 法，其中，所述方法包括以下步骤(1)过滤三孢布拉霉菌发酵液，得到湿菌丝体；(2)将所述湿菌丝体在30 50°C真空干燥，得到水分小于10%的干菌丝体；(3)研磨粉碎所述干菌丝体，过40 60目筛；(4)用相当于干菌丝体质量15 20倍的二氯甲烷浸提过筛后的干菌丝体，蒸发浓 缩浸提液至β-胡萝卜素浓度不低于50000yg/ml后，在-5°C 15°C保温，过滤得到β-胡 萝卜素晶体的湿粗品；(5)再用二氯甲烷溶解所述湿粗品，将溶解液过滤、蒸发浓缩至β -胡萝卜素浓度 不低于50000μ g/ml后，在_5°C 15°C保温，过滤、真空干燥得到β -胡萝卜素晶体。最好，步骤⑵中所述湿菌丝体在30 50°C真空干燥20 30小时。最好，步骤(3)中经粉碎后的干菌丝体70%以上能通过40目筛。最好，步骤⑷中二氯甲烷浸提的温度为32 36°C，浸提时间为1 2小时。最好，步骤⑷中浸提液浓缩后在_5°C 15°C保温3 6小时。最好，步骤(5)中湿粗品与二氯甲烷的质量比为1 5 1 10，溶解温度为32 36 "C。最好，步骤(5)中溶解液浓缩后在_5°C 15°C保温3 6小时。最好，步骤(5)中在30 45°C真空干燥8 16小时。最好，所述β-胡萝卜素晶体中β-胡萝卜素含量高于98%。其中，粗品或成品的固液分离采用工业上常用的离心或过滤的方式。本专利技术提供的从三孢布拉霉菌发酵液制备胡萝卜素的方法，与现有技术相 比，有以下有益效果本专利技术的方法不需要采用破壁技术，工艺流程短，操作步骤少，全过程仅使用一 种溶剂，生产过程易于控制，成本低，收率高，适于工业化生产，产品含量高。按USP标准， β-胡萝卜素含量要求是96.0 101%，本专利技术所得产品含量均超过98%。具体实施例方式下面通过对本专利技术的具体实施例的详细描述来进一步说明本专利技术，但实施例不是 对本专利技术的限制。实施例1采用三孢布拉霉菌(Blakeslea trispora)发酵后的发酵液，用板框过滤得到湿菌 丝体，取IOOg湿菌丝体在30°C真空干燥30小时，干菌丝体重40g，水分9. 5%，研磨过40目 筛后，菌丝体用800ml (20倍菌丝体重)二氯甲烷32°C浸提2小时，浸提液浓缩至β-胡萝卜 素浓度50000 μ g/ml后，在-5°C保温3小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体3. 51g，用17. 6ml (5 倍湿粗品)二氯甲烷36°C溶解、过滤后浓缩至β -胡萝卜素浓度50000 μ g/ml在_5°C保温 3小时，过滤得到胡萝卜素晶体，再经过30°C真空干燥16小时得到胡萝卜素晶体 1. 12g，产品含量为98. 5%。实施例2取IOOg湿菌丝体在50°C真空干燥20小时，干菌丝体重39g，水分7. 2%，研磨过 40目筛后，585ml(15倍菌丝体重)二氯甲烷36°C浸提1小时，浸提液浓缩至β-胡萝卜素 浓度50000 μ g/ml后，在15°C保温6小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体3. 54g，用35. 4ml (10 倍湿粗品)二氯甲烷32°C溶解、过滤后浓缩至β-胡萝卜素浓度50000 μ g/ml在15°C保温46小时，过滤得到β-胡萝卜素晶体，再经过45°C真空干燥8小时，得到β-胡萝卜素晶体 1. 14g，含量为 98. 8%。实施例3取IOOg湿菌丝体在40°C真空干燥25小时，干菌丝体重39. 2g，水分7. 3%，研磨 过40目筛后，686ml (17. 5倍菌丝体重)二氯甲烷34°C浸提1. 5小时，浸提液浓缩至β-胡 萝卜素浓度50000 μ g/ml后，在5°C保温4. 5小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体3.56g，用 26. 7ml(7.5倍湿粗品)二氯甲烷34 °C溶解、过滤后浓缩至β-胡萝卜素浓度50000 μ g/ ml在5°C保温4. 5小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体，再经过38°C真空干燥14小时，得到 β-胡萝卜素晶体1. 15g，含量为99. 1%。实施例4取IOOg湿菌丝体在40°C真空干燥25小时，干菌丝体重39. 2g，水分7. 3%，研磨， 70%能过40目筛，合并干菌丝，用686ml (17. 5倍菌丝体重)二氯甲烷34°C浸提1. 5小时， 浸提液浓缩至β-胡萝卜素浓度50000yg/ml后，在5°C保温4.5小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体3.48g，用26. Iml (7.5倍湿粗品)二氯甲烷34°C溶解、过滤后浓缩至β -胡萝卜 素浓度50000 μ g/ml在5°C保温4. 5小时，过滤得到β -胡萝卜素晶体，再经过38°C真空干 燥14小时，得到β -胡萝卜素晶体1. 10g，含量为本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从三孢布拉霉菌发酵液制备β－胡萝卜素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： （１）过滤三孢布拉霉菌发酵液，得到湿菌丝体； （２）将所述湿菌丝体在３０～５０℃真空干燥，得到水分小于１０％的干菌丝体； （３）研磨粉碎所述干菌丝体，过４０～６０目筛； （４）用相当于干菌丝体质量１５～２０倍的二氯甲烷浸提过筛后的干菌丝体，蒸发浓缩浸提液至β－胡萝卜素浓度不低于５００００μｇ／ｍｌ后，在－５℃～１５℃保温，过滤得到β－胡萝卜素晶体的湿粗品； （５）再用二氯甲烷溶解所述湿粗品，将溶解液过滤、蒸发浓缩至β－胡萝卜素浓度不低于５００００μｇ／ｍｌ后，在－５℃～１５℃保温，过滤、真空干燥得到β－胡萝卜素晶体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：邵东，吴亚铭，
申请(专利权)人：浙江医药股份有限公司新昌制药厂，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]
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