一种生产L-缬氨酸的基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种生产L

【技术实现步骤摘要】
一种生产L
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缬氨酸的基因工程菌及其应用

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[0001]本专利技术涉及一种生产L
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缬氨酸的基因工程菌及其应用，属于代谢工程领域。

技术介绍
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[0002]L
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缬氨酸是一种支链氨基酸(branch chain amino acid，BCAAs)，在哺乳动物生长和代谢中发挥着重要作用。在工业生产上，L
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缬氨酸广泛应用于化妆品，制药，食品添加剂，动物饲料等领域。尤其在动物饲料行业，L
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缬氨酸被证明可以显著改善家畜和家禽的生产性能，同时作为一种必需氨基酸，L
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缬氨酸也是低粗蛋白日粮中最具限制性的四种氨基酸之一。随着市场需求的不断扩增，进一步提高缬氨酸产量显得尤为重要。现阶段L
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缬氨酸的生产方法主要为生物发酵法。近年来，随着合成生物学和代谢工程的迅速发展，通过育种可获得高效生产L
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缬氨酸、遗传背景清晰、且易于培养的重组工程菌。但总体而言，现有L
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缬氨酸工程菌株产量和转化率不高，限本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株L
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缬氨酸生产菌株，其特征在于，所述菌株以Escherichia coli W3110为出发菌株，在基因组上敲除乳糖操纵子阻遏蛋白编码基因lacI，在基因组上过表达解除反馈抑制的乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN
M
，在基因组上表过达羟酸还原异构酶编码基因ilvC及枯草芽孢杆菌亮氨酸脱氢酶的编码基因bcd，然后敲除分支链氨基酸氨基转移酶编码基因ilvE，接着过表达吡啶核苷酸转氢酶的基因pntAB、枯草芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因rocG，敲除乙酸激酶编码基因ackA、丙酮酸脱氢酶编码基因poxB、乳酸脱氢酶编码基因ldhA，将基因组中柠檬酸合酶编码基因gltA的启动子替换为受缬氨酸弱化的P
ilvB
启动子，将基因组中丙酮酸脱氢酶编码基因aceE启动子替换为弱启动子BBA_J23114，利用生长依赖性启动子P
fliC
在基因组上表达磷酸解酮酶编码基因fxpk，敲除6
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磷酸葡萄糖酸脱氢酶编码基因edd、月桂酰基转移酶编码基因lpxL及肉豆蔻酰基转移酶编码基因lpxM。2.如权利要求1所述的一株L
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缬氨酸生产菌株，其特征在于，所述乳糖操纵子阻遏蛋白编码基因lacI，NCBI中Protein ID:BAE76127.1；所述解除反馈抑制的乙酰羟酸合酶编码基因ilvBN
M
，已公开于中国发明专利ZL201910484362.5；所述羟酸还原异构酶编码基因ilvC来自大肠杆菌W3110，NCBI中Protein ID:BAE77523.1；所述亮氨酸脱氢酶的编码基因bcd来自枯草芽孢杆菌168，NCBI中Protein ID:NP_390288.1；所述分支链氨基酸氨基转移酶编码基因ilvE，NCBI中Protein ID:BAE77527.1；所述乙酸激酶编码基因ackA来自大肠杆菌W3110，NCBI中Protein ID:BAA16135.1；所述丙酮酸脱氢酶编码基因poxB来自大肠杆菌W3110，NCBI中Protein ID:BAA35585.1；所述乳酸脱氢酶编码基因ldhA来自大肠杆菌W3110，NCBI中Protein ID...

【专利技术属性】
技术研发人员：张成林，丁啸虎，魏敏华，杨文君，闫倩玉，张佳蓉，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：