PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用，PLX8394的结构式如式1所示，本发明专利技术首次发现PLX8394可用于治疗ZIKV引起的感染性疾病，并通过实验表明，PLX8394对于ZIKV有极强的抗病毒活性，可以显著抑制ZIKV在宿主细胞A549上的复制，提高细胞存活率，能抑制病毒进入宿主细胞A549的过程，在细胞水平表现出极强的抗病毒效果，具有明显的抗ZIKV效果。具有明显的抗ZIKV效果。具有明显的抗ZIKV效果。

【技术实现步骤摘要】
PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用


[0001]本专利技术专利涉及医药
，尤其是指一种PLX8394在抗ZIKV感染中的应用。

技术介绍

[0002]寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是黄病毒科(Flaviviridae)，黄病毒属(Flavivirus)的成员之一，也是引起新生儿小头症和吉兰
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巴雷综合征的最主要病原体。自1947年首次报道以来，ZIKV相关的感染性疾病已在世界范围内多次爆发与流行。目前，对于病毒性疾病的预防和治疗主要依靠疫苗和药物。而尚未有预防ZIKV感染的疫苗上市，并且针对ZIKV感染性疾病的治疗方法也相当有限。主要治疗手段为对症治疗、支持治疗和广谱抗病毒疗法，然而这些方法个体差异较大，且难以推广。因此，开发特异有效的抗ZIKV药物势在必行。
[0003]ZIKV入侵宿主细胞的过程中，会劫持细胞信号通路和降解特定的宿主蛋白，以促进自身的复制。因此，病毒支持性细胞信号通路可能是有前途的新型抗病毒靶点。RAF/MEK/ERK信号通路属于经典的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联通路，在细胞的生长发育过程中发挥重要作用。RAF家族包括A
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RAF、B
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RAF和C
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RAF，它们是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可以形成RAF同源或异源二聚体，通过磷酸化激活下游MEK1/2蛋白；MEK激酶通过MEK磷酸化激活下游ERK1/2。
[0004]因此，研发一种有效的抗寨卡病毒的药物显得很有必要。
专利
技术实现思路

[0005]PLX8394是一种新型RAF抑制剂，可以通过特异性抑制B
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RAF的二聚体来抑制ERK信号传导，包括B
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RAF同源二聚体和B
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RAF:C
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RAF异二聚体，但不能破坏C
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RAF同源二聚体或含A
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RAF的二聚体。RAF亚型激酶结构域的氨基(N)末端部分氨基酸残基的不同是造成这种差异脆弱性的原因。PLX8394选择性抑制由二聚体B
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RAF突变体驱动的肿瘤中的ERK信号传导，但在C
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RAF同源二聚体可以驱动信号传导的正常细胞中保留RAF功能。因此，PLX8394对于B
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RAF突变驱动的转移性黑色素瘤和转移性结直肠癌等肿瘤有着良好的治疗作用。目前，已有PLX8394对于肠道病毒EV71抑制作用的报道，但抗ZIKV感染作用却未见报道。
[0006]PLX8394的结构如下式1所示：
[0007][0008]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一，由此，在本
专利技术的第一方面，本专利技术提供PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用，PLX8394的结构式如式1所示，
[0009][0010]在本专利技术的第二方面，本专利技术提供PLX8394在制备预防寨卡病毒感染药物中的应用，PLX8394的结构式如式1所示，
[0011][0012]在本专利技术的一个或多个实施方案中，所述预防寨卡病毒感染药物为预防寨卡病毒重度感染药物。
[0013]在本专利技术的一个或多个实施方案中，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物中PLX8394的浓度为0.01
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10μM。
[0014]优选地，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物中PLX8394的浓度为0.1
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10μM。
[0015]更优选地，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物中PLX8394的浓度为1
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10μM。专利技术人通过实验发现，当PLX8394的浓度为1umol/L时，可以达到对ZIKV50％的抑制率。
[0016]在本专利技术的一个或多个实施方案中，所述应用包括PLX8394与利巴韦林的联用。
[0017]在本专利技术的一个或多个实施方案中，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物还包括药剂学可接受的辅料和载体。
[0018]在本专利技术的一个或多个实施方案中，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物剂型为颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂或注射剂。
[0019]专利技术人对PLX8394对ZIKV的抑制活性进行评估，通过标准的病毒活性测试方法对其进行活性测试。经过大量生物学实验，发现PLX8394具有较好的抑制ZIKV进入细胞的活性。由此，PLX8394对于ZIKV具有抑制作用。
[0020]本专利技术的有益效果在于：
[0021]1、本专利技术PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用，本专利技术首次发现PLX8394可用于治疗ZIKV引起的感染性疾病，并通过实验表明，PLX8394对于ZIKV有极强的抗病毒活性，
可以显著抑制ZIKV在宿主细胞A549上的复制，提高细胞存活率，能抑制病毒进入宿主细胞A549的过程，在细胞水平表现出极强的抗病毒效果，具有明显的抗ZIKV效果。
[0022]2、PLX8394在制备预防寨卡病毒感染药物中的应用，本专利技术首次发现，PLX8394在ZIKV入侵前或入侵过程中用药，可以更有效地抑制病毒。
附图说明
[0023]图1为本专利技术实施例1中PLX8394对于ZIKV作用的A549细胞毒性检测结果图；
[0024]图2为本专利技术实施例2中PLX8394作为抗病毒药物的安全有效性结果图；
[0025]图3为0.1μM、1μM浓度下PLX8394以及利巴韦林对ZIKV病毒抑制的免疫荧光示意图；
[0026]图4为不同浓度PLX8394对ZIKV病毒蛋白表达水平的抑制效果图；
[0027]图5为不同浓度PLX8394对ZIKVmRNA水平的抑制效果图；
[0028]图6为不同浓度利巴韦林对ZIKV病毒蛋白表达水平的抑制效果图；
[0029]图7为PLX8394处理的时间轴示意图；
[0030]图8为PLX8394在ZIKV感染细胞的不同阶段对ZIKV病毒蛋白表达水平的影响；
[0031]图9为PLX8394对ZIKV吸附、入侵细胞阶段的抑制作用；
[0032]图10为PLX8394对ZIKV入侵细胞前以及入侵细胞后阶段的抑制效果。
具体实施方式
[0033]以下结合具体实施例和附图对本专利技术作进一步说明，但下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。以下实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行，使用的方法如无特别说明，均为本领域公知的常规方法，使用的耗材和试剂如无特别说明，均为市场购得。除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本专利技术中。
[0034]本专利技术在以下实施例中，结合病毒RNA水平分析，滴度测定和Alamar Blue测定细胞存活率检测方法，对PLX8394进行抗ZIKV活性研究实验，实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PLX8394在制备抗寨卡病毒药物中的应用，其特征在于，PLX8394的结构式如式1所示，2.PLX8394在制备预防寨卡病毒感染药物中的应用，其特征在于，PLX8394的结构式如式1所示，3.根据权利要求2所述的PLX8394在制备预防寨卡病毒感染药物中的应用，其特征在于，所述预防寨卡病毒感染药物为预防寨卡病毒重度感染药物。4.根据权利要求1或2所述的的应用，其特征在于，所述抗寨卡病毒药物或预防寨卡病毒感染药物中PLX8394的浓度为0.01
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10μM。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴莹，赵丁燃，张灿薇，郭雪洋，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：