Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用，涉及药物应用技术领域。本发明专利技术通过对孕中期的小鼠施加Tolcapone构建子痫前期动物模型。本发明专利技术的子痫前期动物模型可用于子痫前期病因、发生发展机制和开发相关治疗药物的研究；本发明专利技术将Tolcapone应用于子痫前期动物模型的构建中，操作简单，构建成功率高，构建周期短，为子痫前期病因诊断、预防和治疗提供了新的思路和新手段，同时也挖掘了Tolcapone新的药用价值。Tolcapone新的药用价值。Tolcapone新的药用价值。

【技术实现步骤摘要】
Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用


[0001]本专利技术涉及药物应用
，具体涉及Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用。

技术介绍

[0002]子痫前期(preeclampsia)指妊娠20周以后，孕妇出现血压升高和蛋白尿，并可出现头痛、眼花、恶心、呕吐、上腹不适等症状。子痫前期的发生率约为孕妇的5％，初产妇、有高血压及血管疾病的孕妇更为常见。子痫前期的病因至今尚不清楚，可导致严重的母儿并发症，除终止妊娠外，无有效治疗方法，但过早终止妊娠使得大量的早产儿、低出生体重儿的出现，围产儿发病率和婴幼儿致残率增高，现有的治疗是为了控制病情，争取延长孕周。动物模型是研究子痫前期发病机制、研究和开发子痫前期治疗药物的重要工具。理想的子痫前期(PE)动物模型应该具备妊娠特有的高血压、蛋白尿、肾脏损伤、胎儿生长受限、滋养细胞侵袭不足、螺旋动脉重铸不良、内皮细胞功能障碍等特点。
[0003]现有的子痫前期的动物模型主要通过手术、药物诱导、转基因和基因敲除构建。RUPP手术制作的子痫前期模型为利用手术狭窄大鼠腹主动脉和卵巢动脉，减少子宫供血造成胎盘氧化应激，然而RUPP手术难度高，对孕鼠创伤大容易造成流产和死亡。目前研究中广泛使用的一氧化氮合成酶抑制剂L
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NAME诱导构建的小鼠子痫前期模型，可诱导孕鼠高血压和胎鼠生长受限，然而其机理为抑制血管扩张素一氧化氮的合成，通过诱导血管收缩引起高血压症状，不能完全模拟子痫前期的发生。转基因和基因敲除构建的子痫前期动物模型仅能改变其调控的下游信号通路，不能体现子痫前期多病因的特点，且基因缺陷动物模型构建周期长、造价高。现有技术中呈现的子痫前期样动物模型的构建方法相对复杂，构建周期长，因此，构建一种操作简易、周期短的子痫前期样动物模型，对于子痫前期发病过程及机制的研究具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：COMT酶抑制剂在子痫前期动物模型的构建中的应用。
[0006]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述COMT酶抑制剂包括Tolcapone。
[0007]Tolcapone是一种儿茶酚
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O
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位甲基转移酶(catechol
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O
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methyl transferase,COMT)的抑制剂，通过抑制COMT酶活，减缓多巴胺的代谢，对于多巴胺缺乏导致的运动并发症，如帕金森、Ⅱ型精神分裂及相关认知功能障碍、多动症，具有治疗效果。Tolcapone也能够抑制运甲状腺素蛋白聚集，因此也可用于治疗家族性全身淀粉样变。此外，Tolcapone影响了线粒体呼吸链复合物的活性，导致氧化磷酸化解偶联，产生较多活性氧簇ROS及乳酸，诱导肝细胞凋亡；在神经母细胞瘤中，由于相似的机制，Tolcapone能够诱导神经母细胞凋
亡，从而抑制肿瘤生长。动物研究表明孕早期使用Tolcapone会导致流产机率增加。本申请专利技术人经过大量的实验研究首次发现，孕中期Tolcapone可诱导小鼠具有子痫前期的表型，包括母体高血压、蛋白尿、胎鼠生长受限、胎盘滋养细胞侵袭障碍，表明Tolcapone可以用于构建子痫前期动物模型。
[0008]本专利技术还提供一种子痫前期动物模型的构建方法，自孕中期开始，每天对妊娠动物施加COMT酶抑制剂至妊娠结束。
[0009]作为本专利技术所述子痫前期动物模型的构建方法的优选实施方式，所述动物为雌性小鼠或雌性大鼠。
[0010]作为本专利技术所述子痫前期动物模型的构建方法的优选实施方式，所述孕中期为妊娠第9.5天。
[0011]作为本专利技术所述子痫前期动物模型的构建方法的优选实施方式，所述COMT酶抑制剂为Tolcapone。
[0012]作为本专利技术所述子痫前期动物模型的构建方法的优选实施方式，所述Tolcapone的浓度为5
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15mg/mL。
[0013]作为本专利技术所述子痫前期动物模型的构建方法的优选实施方式，所述Tolcapone的使用剂量为30
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60mg/kg/day。
[0014]本专利技术还提供一种子痫前期动物模型，采用所述的构建方法构建得到。
[0015]本专利技术还提供所述的子痫前期动物模型的构建方法在筛选子痫前期治疗候选药物或研究子痫前期的发生发展机制中的应用。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术提供Tolcapone在子痫前期动物模型的构建中的应用，本专利技术通过对孕中期的小鼠施加Tolcapone构建子痫前期动物模型。本专利技术的子痫前期动物模型可用于子痫前期病因、发生发展机制和开发相关治疗药物的研究；本专利技术将Tolcapone应用于子痫前期动物模型的构建中，操作简单，构建成功率高，构建周期短，为子痫前期病因诊断、预防和治疗提供了新的思路和新手段，同时也挖掘了Tolcapone新的药用价值。
附图说明
[0017]图1为实施例1构建子痫前期动物模型的构建策略：于孕鼠怀孕的第9.5天(D9.5)，通过灌胃方法给药Tolcapone直至D17.5，D18.5终止妊娠。
[0018]图2为施加Tolcapone前后小鼠不同孕期的收缩压测定和D18.5尿蛋白含量的测定结果，α：H
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Tol组与对照组相比，p<0.05；β：L
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Tol组与对照组相比，p<0.05。
[0019]图3为孕D18.5胎鼠的身长、体重测定，以及胎鼠成活率统计。
[0020]图4为小鼠D18.5胎盘石蜡切片的H&E染色结果，其中LZ为迷路区；JZ为连接区；de为蜕膜；SP为海绵体滋养细胞；gc为滋养层巨细胞。
[0021]图5为通过对小鼠胎盘石蜡连续切片的免疫组化，测定滋养细胞在蜕膜中的侵袭水平。
[0022]图6为对孕鼠施加Entacapone后孕期血压监测结果。
具体实施方式
[0023]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
[0024]实施例1
[0025]本实施例提供一种子痫前期动物模型的构建方法，具体构建策略图如图1所示，具体包括以下步骤：选取10
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12周龄，体重20
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26g的C57BL/6雌鼠与雄鼠，按照雌鼠与雄鼠为2：1的比例合笼，第二天早上检验阴道栓并记为怀孕的D0.5天；将确认怀孕的孕鼠分为saline组(对照组)，L
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Tol组(低给药组)和H
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Tol组(高给药组)，共3组，每组6只；Saline组孕鼠采用生理盐水灌胃，L
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.COMT酶抑制剂在子痫前期动物模型的构建中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述COMT酶抑制剂包括Tolcapone。3.一种子痫前期动物模型的构建方法，其特征在于，自孕中期开始，每天对妊娠动物施加COMT酶抑制剂至妊娠结束。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述动物为雌性小鼠或雌性大鼠。5.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述孕中期为妊娠第9.5天。6.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述COMT酶抑制剂为Tolcapone...

【专利技术属性】
技术研发人员：岳晓婧，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：