一种用于治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗及其制药应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗及其制药应用，属于肝纤维化治疗药物技术领域。本发明专利技术的HBcΔ

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗及其制药应用


[0001]本专利技术属于肝纤维化治疗药物
，具体涉及一种用于治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗及其制药应用。

技术介绍

[0002]肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的共同病理过程，表现为肝内结缔组织异常增生，进而影响肝脏功能，最终导致肝硬化，造成肝衰竭甚至危及生命。目前，大部分慢性肝病都缺乏有效的病因治疗，延缓肝纤维化的发生发展，防止其进展为肝硬化成为慢性肝病治疗的主要途径之一。但针对肝纤维化目前尚无特效药物，故探索安全有效的抗肝纤维化治疗方法至关重要。
[0003]高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1，HMGB1)于1973年发现，属于进化上高度保守的非组蛋白染色体结合蛋白。HMGB1的氨基酸序列包括三个结构域，分别是A
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Box(aa 7
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79)、B
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Box(aa 89
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162)、C
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tail(aa 186
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215)。HMGB1包括胞内及胞外两种形式。在正常情况下，HMGB1广泛存在于真核生物细胞核，属于DNA结合蛋白，调节基因转录、稳定核小体、促进DNA折叠、复制及修复等。由单核/巨噬细胞等免疫细胞主动分泌或者损伤细胞被动释放至细胞外的HMGB1，可发挥促炎症因子和趋化因子的作用，参与炎症反应和多种免疫反应，包括发热、脓毒症、类风湿性关节炎等风湿免疫疾病、动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤、哮喘、肿瘤等。除了在调节免疫方面的作用外，HMGB1还参与造血，调节表皮或者神经细胞的活动。迄今为止，已发现HMGB1可作为一种损伤相关分子模式(damage
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associated molecular pattern,DAMP)分子与多种受体结合，包括晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products，RAGE)、Toll样受体(Toll
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like receptor,TLR)2、4、9、趋化因子CXC受体4(CXC chemokine receptor 4，CXCR4)等。除了直接与受体结合，HMGB1还可与其他分子如IL
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1、CXCL12、DNA、RNA、组蛋白或脂多糖形成杂合体，并进一步与受体结合。RAGE是HMGB1的主要配体之一，也是最早被发现和鉴定的HMGB1受体(1995年)。HMGB1激活RAGE依赖于其分子结构中aa150
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183肽段。HMGB1与RAGE结合后，主要通过两个途径向胞内传导信号，一条是激活CDC42和Rac，主要作用是调节细胞活力和神经生长、细胞迁移、免疫细胞及肿瘤细胞分化、促进自噬和上调细胞表面受体等作用；另一种途径是激活MAPKs(包括p38和p42/44激酶、JNK、ERK1/2)，进而导致NF
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κB激活，诱导NF
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κB核转位，从而产生炎症因子及趋化因子，参与炎症免疫反应。
[0004]阻断HMGB1的释放及下游信号通路是肝纤维化治疗的研究方向。研究发现，抗HMGB1抗体及RAGE抗体均能有效减轻急性肝损伤及肝纤维化，抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSC)的增殖，减少炎症因子和纤维化因子的表达。同时，可溶性RAGE(sRAGE)可与HMGB1结合，阻止HMGB1与RAGE结合，从而阻断RAGE的信号通路，减少细胞外基质的产生，抑制纤维化的发生。
[0005]但是，目前尚未有采用抗细胞因子疫苗技术，产生针对HMGB1
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RAGE结合位点的抗体，通过抑制HMGB1与RGAE的结合，达到抑制HMGB1生物学作用的研究。同时，等特点，更具临
床应用前景。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种用于治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗及其制药应用，以原核表达重组蛋白作为疫苗具有高生产效率和低成本，更具临床应用前景。
[0007]为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
[0008]本专利技术公开的一种治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗，将HMGB1的抗原表位aa第150至183的氨基酸插入到乙肝核心抗原的c/e1 B细胞表位中，构建得到能够自行装配成乙肝核心病毒样颗粒的HBcΔ
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HMGB1
34
(150
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183)重组疫苗。
[0009]优选地，所述HMGB1抗原表位aa第150至183的氨基酸的序列如SEQ.ID.NO.1所示。
[0010]本专利技术还公开了上述的治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗在制备抗肝纤维化的药物中的应用。
[0011]优选地，所述的药物为减缓肝纤维化进程的药物。
[0012]进一步优选地，所述的药物为通过降低肝组织中α
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SMA、Col1a2、Col3a1、CTGF、TGF
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β1、PDGF
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B、vimentin和PAI
‑
1表达水平减缓肝纤维化进程的药物药物。
[0013]优选地，所述的药物为抑制肝脏星状细胞激活程度的药物。
[0014]进一步优选地，通过减少细胞外基质的沉积抑制肝脏星状细胞活化。
[0015]优选地，所述的药物为减少胶原合成与分泌的药物。
[0016]本专利技术还公开了上述的治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗在制备抗HMGB1中和性抗体中的应用。
[0017]优选地，该HMGB1重组疫苗能够用作特异性地阻断HMGB1与RAGE结合并阻断其介导的HMGB1功能研究的生物学工具。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0019]本专利技术公开了一种治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗，通过将HMGB1抗原表位(aa150
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183,KLKEKYEKDIAAYRAKGKPDAAKKGVVKAEKSKK)插入乙肝核心抗原的c/e1 B细胞表位，构建可以装配成乙肝核心病毒样颗粒的HBcΔ
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HMGB1
34
(150
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183)疫苗。实验发现，用该HBcΔ
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HMGB1
34
(150
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183)疫苗免疫小鼠后，可使小鼠产生高效价的抗HMGB1中和性抗体，该抗体可以有效的减轻CCl4诱导的小鼠实验性肝纤维化。HBcΔ
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HMGB1
34
(150
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183)重组疫苗免疫可以明显减少细胞外基质的沉积，抑制肝脏HSC的活化，减少胶原的合成与分泌，进而发挥抗纤维化作用。另外，肝组织内α
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SMA、Col1a2、Col3a1、CTGF、TGF
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β1、PDGF
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗，其特征在于，将HMGB1的抗原表位aa第150至183的氨基酸插入到乙肝核心抗原的c/e1 B细胞表位中，构建得到能够自行装配成乙肝核心病毒样颗粒的HBcΔ
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HMGB1
34
(150
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183)重组疫苗。2.如权利要求1所述的治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗，其特征在于，所述HMGB1抗原表位aa第150至183的氨基酸的序列如SEQ.ID.NO.1所示。3.权利要求1或2所述的治疗肝纤维化的HMGB1重组疫苗在制备抗肝纤维化的药物中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的药物为减缓肝纤维化进程的药物。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的药物为通过降低肝组织中α
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【专利技术属性】
技术研发人员：郝志明，李倩，孙文刚，李汉超，郑晓燕，朱丽，
申请(专利权)人：西安交通大学医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：