一种使用斑马鱼胚胎模型评价人类农药混合暴露健康风险的方法技术

本发明专利技术公开了一种使用斑马鱼胚胎模型评价人类农药混合暴露健康风险的方法，包括如下步骤：1)配置不同浓度的农药暴露液；2)将斑马鱼胚胎在农药暴露液中培养96h；3)记录培养过程中斑马鱼胚胎的发育指标；4)根据步骤3)中的发育指标进行毒性终点的计算；5)将毒性终点外推至人类暴露水平参考值。发明专利技术使用斑马鱼为模型，在农药混合暴露之后测量不同的生理指标，并使用数学模型筛选最敏感指标，之后采用剂量外推换算，最终为人类暴露于农药混合污染提供摄入参考值。摄入参考值。

【技术实现步骤摘要】
一种使用斑马鱼胚胎模型评价人类农药混合暴露健康风险的方法


[0001]本专利技术涉及农药毒性领域，具体的说涉及一种使用斑马鱼胚胎模型评价人类农药 混合暴露健康风险的方法。

技术介绍

[0002]目前生鲜食品中农药残留的相关标准都仅考虑单一农药的健康风险，因此，选择 一种可以评价农药混合暴露风险的模型，并使用外推方法为人类健康风险提供参考至 关重要。
[0003]目前农药风险评估的方法往往是采用进行大鼠、小鼠、兔或犬等哺乳动物实验， 找出最敏感的毒性终点，并选取适当的不确定系数进行换算(不确定系数往往是100)， 这种方法既不便于评价混合暴露的风险，也符合目前减少实验动物使用或者替代测试 的趋势。而斑马鱼模型不仅具有测试便捷，可高通量筛选的特点，还能够暴露于二元 或者三元混合毒物，目前已被广泛用于化学物混合暴露的风险评估。此外，斑马鱼的 毒性终点易于观测，便于采用数学模型拟合从而选择最敏感指标，在此基础上还可进 行外推与换算，从而最终实现为人类的健康风险提供参考。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于，提供一种使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种使用斑马鱼胚胎模型评价人类农药混合暴露健康风险的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)配置不同浓度的农药暴露液；2)将斑马鱼胚胎在农药暴露液中培养96h；3)记录培养过程中斑马鱼胚胎的发育指标；4)根据步骤3)中的发育指标进行毒性终点的计算；5)将毒性终点外推至人类暴露水平参考值。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)农药暴露液的配置方法为将不同重量的农药溶于二甲基亚砜溶解配制成储备液，使用Holt Buffer稀释成对应浓度的处理液，使得最终的DMSO浓度为0.1％，其中，Holt Buffer为含NaCl 3.5g/L,KCl 0.05g/L,CaCl
2 0.1g/L,NaHCO
3 0.05g/L的水溶液。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的培养方法是：每10mL农药暴露液中培育20枚斑马鱼胚胎；每个浓度3个重复，每24h更换一次暴露液，同时剔除死卵，染毒持续96h。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的斑马鱼胚胎选择方法为：将受精后4h卵置于体视显微镜下进行观察，剔除未受精、凝结及卵膜破损的，得到斑马鱼胚胎。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中记录培养过程中斑马鱼胚胎的发育指标，具体包括：对受精后24，48，72，96h的斑马鱼胚胎的死亡率进行统计；同时自受精后48h起每隔24h统计各组的畸形率；此外统计胚胎受精...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈义强，苑晓燕，贾栗，范瑞祺，张婉君，罗荪琳，刘颖，金永鹏，李泳琛，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：