一种抗结肠炎与结肠癌的核桃粕多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗结肠炎与结肠癌的核桃粕多肽及其应用，所述抗溃疡性结肠炎肽自C端至N端的氨基酸序列为：Ser

【技术实现步骤摘要】
一种抗结肠炎与结肠癌的核桃粕多肽及其应用


[0001]本专利技术涉及一种抗结肠炎与结肠癌的核桃粕多肽及其应用，属于食品深加工


技术介绍

[0002]炎症性肠病(IBD)是一种慢性肠道炎症性疾病，包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)。溃疡性结肠炎是一种病因复杂的肠道炎症性疾病，由于其反复发作并且发病率逐年增加已成为全球性疾病。UC主要发生在结肠黏膜且病变多从结肠远端发展，并且以持续腹泻，腹痛、血便为主要临床特点。传统治疗IBD的方法包括5
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氨基水杨酸，类固醇和免疫抑制剂等。然而，长期服这些药物用给患者带来很大的副作用，加重患者身体和社会心理负担。此外，患IBD多年的患者面临着更高的患相关癌症的风险，特别是结肠癌(CRC)。在过去十年中，许多患有结肠炎及其癌症患者一直在补充天然产品以防止结肠癌的发展。天然产品，特别是生物活性肽，在治疗和预防疾病方面具有潜在的价值。目前发现的生物活性肽只能单独抑制结肠炎，或者单独抑制结肠癌，尚无发现可以同时抑制结肠炎和结肠癌的天然生物活性肽。因此，发现新的、安全的、天然的抗溃疡性结肠炎和抗癌肽具有重要意义。
[0003]基于此，天然植物或具有药用功能的食物来源的生物活性物质是有前途的候选者。核桃(Juglans regia L.)为胡桃科胡桃属植物，蛋白质含量高达40
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50％，富含不饱和脂肪酸和必需氨基酸，具有较高的营养价值，是药食同源植物。多项研究表明，核桃蛋白具有多种生理活性，并且在生产生物活性肽方面具有广泛潜力，包括抗氧化、抗骨质疏松、抑制二肽基肽酶IV(DPP
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IV)活性和抗糖尿病等多种生物活性，但是尚无研究表明核桃蛋白兼具缓解溃疡性结肠炎和结肠癌的作用。

技术实现思路

[0004]为解决以上问题，本申请以核桃粕为原料，通过传统的酶解、超滤分离纯化的方法制备多肽，采用nano
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LC
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MS/MS鉴定多肽序列，结合网络药理学、生物信息学和分子对接方法虚拟筛选潜在抗溃疡性结肠炎核桃粕多肽，筛选出一条具有抗溃疡性结肠炎的核桃粕蛋白肽，且其他功能性肽段也可参照此方法进行筛选。
[0005]网络药理学是结合系统生物学、生物信息学、网络科学等学科，分析药物与治疗对象之间的分子关系，从系统层面和生物网络的整体视角揭示药物的系统药理机制，从而指导药物研发的一门新兴学科。与传统的研发药物模式不同的是，网络药理学从综合角度研究多个疾病靶点和多个活性成分之间的协同相互作用，筛选有效成分及关键靶点和生物学功能。与从蛋白质中分离生物活性肽的传统方法相比，采用虚拟药物筛选、网络药理学和生物信息学的方法可大大缩短分离步骤，速度更快效率更高。目前，应用网络药理学和虚拟筛选的方法与传统的分离鉴定方法从核桃粕中寻找发现具有潜在抗溃疡性结肠炎及抗结肠癌活性的多肽，尚未见相关文献报道。
[0006]本专利技术提供一种兼具抗溃疡性结肠炎和结肠癌功能的核桃粕蛋白肽，所述核桃粕
蛋白肽的氨基酸序列为Ser
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His
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Thr
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Leu
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Pro，简称SHTLP，分子量为553.5Da。
[0007]本专利技术还提供了从核桃粕中获得的兼具抗溃疡性结肠炎和抗结肠癌作用的多肽的方法，是结合传统分离方法和虚拟筛选的方法所获得。
[0008]在一种实施方式中，所述传统分离方法包括蛋白酶酶解、超滤分离和nano
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LC
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MS/MS鉴定。
[0009]在一种实施方式中，所述虚拟筛选方法包括网络药理学分析、生物信息学分析和分子对接。
[0010]在一种实施方式中，所述网络药理学分析包括利用SwissADME数据库(http://www.swissadme.ch/index.php)获得多肽的SMILES号，利用Swiss Target Prediction数据库(http://www.swisstargetprediction.ch/)进行肽
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作用靶点预测，使用Disgenet数据库(https://www.disgenet.org/)、GeneCards数据库(https://www.genecards.org/)、Drugbank数据库(https://go.drugbank.com/)和OMIM网络数据库(https://omim.org/)中搜索溃疡性结肠炎相关靶点信息。利用CytoScape 3.8.2软件(http://www.cytoscape.org/)构建对网络进行分析。
[0011]在一种实施方式中，所述生物信息学分析包括使用David数据库(https://david.ncifcrf.gov/)的功能注释和通路富集工具筛选出关键靶点进行生物信息学分析，使用生物信息学数据库(http://www.bioinformatics.com.cn/)进行数据分析和可视化。
[0012]在一种实施方式中，所述分子对接的方法包括使用蛋白质PDB数据库(https://www.rcsb.org/)获得核心靶点蛋白质的3D X射线晶体结构；使用PyMOL2.3.0软件对蛋白结构进行处理；采用ChemBioDraw Ultra14.0软件构建肽结构；使用AutodockTools
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1.5.6对多肽进行前处理；使用POCASA 1.1预测蛋白结合位点，采用AutoDock Vina1.1.2进行对接；利用PyMOL2.3.0和LIGPLOTV2.2.4对对接结果进行相互作用模式分析。
[0013]本专利技术还提供了含所述核桃粕蛋白肽的产品，所述的产品为食品、保健品或药品。
[0014]在一种实施方式中，所述药品为抗肠炎药品或抗结肠癌药品。
[0015]在一种实施方式中，所述抗肠炎药品中含所述的核桃粕蛋白肽≥800mg/kg。
[0016]在一种实施方式中，所述抗结肠癌药品中含所述的核桃粕蛋白肽≥246.3μM。
[0017]在一种实施方式中，所述保健品用于辅助保护肠粘膜。
[0018]本专利技术还提供了所述的核桃粕蛋白肽在制备预防、治疗和/或缓解溃疡性结肠炎的产品中的应用。
[0019]在一种实施方式中，所述的产品具有(a)～(f)至少一种功能：
[0020](a)缓解体重减轻；
[0021](b)缓解直肠出血、粪便稠度和疾病活动指数(DAI)增加情况；
[0022](c)降低脾脏系数、缓解结肠缩短；
[0023](d)减轻系统和结肠炎症；
[0024](e)减少炎性细胞巨噬细胞(F4/80)和中性粒细胞(LY6G)浸润；
[0025](f)改善结肠物理屏障和化学屏障功能。
[0026]在一种实施方式中，所述的结肠粘膜损伤包括炎性细胞浸润、隐窝结构破坏和杯状细胞丢失。
[0027]在一种实施方式中，所述的减轻结肠炎症包括抑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种兼具抗溃疡性结肠炎和抗结肠癌活性的核桃粕蛋白肽，其特征在于，所述核桃粕蛋白肽的氨基酸序列为Ser
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His
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Thr
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Leu
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Pro。2.含有权利要求1所述核桃粕蛋白肽的产品，其特征在于，所述的产品为食品、保健品或药品。3.根据权利要求2所述产品，其特征在于，所述药品为抗肠炎药品或抗结肠癌药品。4.根据权利要求3所述产品，其特征在于，所述抗肠炎药品中含权利要求1所述的核桃粕蛋白肽≥800mg/kg。5.根据权利要求3所述产品，其特征在于，所述抗结肠癌药品中含权利要求1所述的核桃粕蛋白肽≥...

【专利技术属性】
技术研发人员：田洋，解静，弘子姗，盛军，胡霞，代晶晶，李婷婷，陈锦莲，白玉英，张丽，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：