一种高效抗氧化驴精子稀释液及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及牲畜类精子抗氧化技术领域，提供了一种高效抗氧化驴精子稀释液及其制备方法和应用。一种高效能抗氧化驴精子稀释液，包括基础液和添加物，其中：基础液是每1000mL水中包括以下重量的成分：葡萄糖30～60g、4

【技术实现步骤摘要】
一种高效抗氧化驴精子稀释液及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及牲畜类精子抗氧化
，尤其涉及一种高效抗氧化驴精子稀释液及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]驴具有很高的经济使用价值，驴皮是制作名贵中药阿胶的主要原料，具有滋阴、补肺、补血等功效，驴肉是美味营养的食品，深受广大消费者青睐。随着我国社会经济的发展和国民收入的增加，以及饮食结构的调整和保健养生意识的增强，国内外市场对驴产品的需求量急速增长，驴产品市场不断扩大，出现了驴资源紧缺的现象，致使驴的价格也不断上升，从而给养驴业带来了新的活力。
[0003]然而，我国虽为养驴大国，养驴历史悠久，但由于驴产业在国内的发展起步晚，农役需求转向商用养殖的时间较短，肉驴的养殖业以分散散养的比例为主，标准化规模养殖程度低，饲养管理较粗放，生产方式落后，尚未形成配套的繁育体系、饲养标准和饲料生产技术体系，缺乏配套的规模化驴场的规划设计参数和环境质量控制技术，导致养驴业生产相对滞后，在技术研究领域还存在许多空白，所以发展规模化养殖体系已成为势在必行的发展趋势。
[0004]规模化养殖一大养殖要点就是繁殖技术，人工输精技术是繁殖技术的基础，也成为驴产业发展的基石。驴是一种发情期较长难以把握排卵时间的单胎动物，集中发情期为每年的3月份到8月份，从母驴体现发情表现到排卵，持续3
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13天不等，期间优势卵泡持续发育直至排卵，情期受胎率为30％
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50％，繁殖率为60％左右。驴是一种子宫内射精的动物，驴生殖管道较长，射精量较大，一般公驴射精量平均70mL。若规模化驴场开展人工输精，为保证受胎率输精量不低于2亿个精子，且精子活力不能低于80％。因此，开发延长精子体外存活的稀释液是基础中的基础。
[0005]由于精子在离开公驴身体后，其活力会逐渐下降。然而，目前市场上售卖的精液稀释液在维持精子的活力方面效果有限，精子稀释后活力下降明显，所以导致受胎率无法保障；同时，在输精管穿过阴道时，容易将环境中及阴道内的细菌带入子宫，使母驴引发子宫炎，不仅影响母驴的子宫健康，还会影响胚胎着床，进一步影响受胎率。为了提高母驴受胎率，提高精子体外存活率，并保证母驴的子宫健康，对驴精液稀释液配方进行改良优化显得尤为重要。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种高效抗氧化驴精子稀释液及其制备方法和应用，以便有效提高母驴受胎率、降低子宫炎发病率，提高体外精子活力。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种高效能抗氧化驴精子稀释液，包括基础液和添加物，其中：
[0009]所述基础液是每1000mL水中包括以下重量的成分：葡萄糖30～60g、4
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羟乙基哌嗪
乙磺酸钠4～6g、脱脂奶粉12～24g、柠檬酸钾0.5～1.1g；
[0010]所述添加物是每1000mL基础液中包括以下重量的成分：萝卜硫素5mg～10mg、豆甾醇0.1mg～0.2mg、恩诺沙星浓液40μg～100μg、头孢噻呋钠3mg～5mg。
[0011]本专利技术提供了一种高效能抗氧化驴精子稀释液的制备方法，包括如下步骤：
[0012](1)将基础液的各成分进行混匀，制得基础液；
[0013](2)将所述基础液灭菌，在无菌环境下加入所述添加物，即得高效抗氧化驴精子稀释液。
[0014]优选地，步骤(2)所述灭菌的条件为：基础液在压力100.4～106.4kPa、温度111.3～131.3℃的条件下，维持15～30分钟，进行灭菌。
[0015]优选地，所述添加物中萝卜硫素、豆甾醇、恩诺沙星分别用二甲基亚砜溶解后添加到所述基础液中。
[0016]优选地，所述萝卜硫素与二甲基亚砜的溶解比例为5mg～10mg：1mL，豆甾醇与二甲基亚砜的溶解比例为0.1mg～0.2mg：100μL。
[0017]优选地，所述恩诺沙星的添加是将5～15mg恩诺沙星粉末溶于0.5～1.5mL二甲基亚砜中制备得到恩诺沙星浓缩液，后将40μg～100μg恩诺沙星浓缩液加入到1000mL基础液中。
[0018]本专利技术还提供了一种高效能抗氧化驴精子稀释液在驴精子抗氧化中的应用。
[0019]本专利技术通过添加4
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羟乙基哌嗪乙磺酸钠，既保证维持稀释液PH为7.5，又能为精子提供钠离子，保证精子钠钾泵的正常运行，维持精子渗透压；通过添加柠檬酸钾，既保证为精子提供柠檬酸根离子，又能为精子提供钾离子，保证精子钠钾泵的正常运行，维持精子渗透压。
[0020]本专利技术添加的萝卜硫素可有效降低精子因剧烈运动产生的自由基，抑制脂质过氧化反应，保护线粒体膜和线粒体功能，及精子质膜等膜系统，降低辐射、药物、有毒物质、剧烈运动等因素引起的精子氧化应激；本专利技术添加的豆甾醇具有抗氧化和抗炎作用，可提高精子膜流动性继而提高精子获能的效率。
[0021]本专利技术添加的恩诺沙星和头孢噻呋钠，可有效抑制稀释后精液内细菌繁殖，进一步提高了精子体外存活的能力，起到1+1大于2的作用。
[0022]目前规模化牧场长期人工输精易造成致病菌产生抗药性，恩诺沙星对由耐药性致病菌引起的严重感染有效，与其它抗菌素无交叉耐药性，可有效降低母驴发生子宫炎的几率，保证母驴健康的子宫环境，促进本稀释液的应用推广，可进一步提高受胎率。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0024]图1为实验例1中实验组1和对照组1的精子活力检测结果；
[0025]图2为实验例1中24h时实验组1和对照组1的精子ROS检测结果；
[0026]图3为实验例1中24h时实验组1和对照组1的高效抗氧化驴精子稀释液处理驴精液
后精子蛋白磷酸化的富集分析。
具体实施方式
[0027]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0028]实施例1
[0029]一种高效能抗氧化驴精子稀释液的制备方法，包括以下步骤：
[0030]将50g的葡萄糖、5.2g的4
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羟乙基哌嗪乙磺酸钠、24g的脱脂奶粉、0.8g的柠檬酸钾加纯水定容至1000mL制备得到基础液；将基础液在121.3℃、103.4kPa下灭菌25min。
[0031]将9mg的萝卜硫素粉末溶于1mL的二甲基亚砜(DMSO)、将0.1mg的豆甾醇粉末溶于100μL的二甲基亚砜(DMSO)后加入基础液中；将10mg恩诺沙星粉末溶于1mL二甲基亚砜(DMSO)中，得到恩诺沙星浓液，取100μg加入基础液中，将5mg的头孢噻呋钠直接加入基础液中混匀，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效能抗氧化驴精子稀释液，其特征在于，包括基础液和添加物，其中：所述基础液是每1000mL水中包括以下重量的成分：葡萄糖30～60g、4
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羟乙基哌嗪乙磺酸钠4～6g、脱脂奶粉12～24g、柠檬酸钾0.5～1.1g；所述添加物是每1000mL基础液中包括以下重量的成分：萝卜硫素5mg～10mg、豆甾醇0.1mg～0.2mg、恩诺沙星浓液40μg～100μg、头孢噻呋钠3mg～5mg。2.一种权利要求1所述的高效能抗氧化驴精子稀释液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将基础液的各成分进行混匀，制得基础液；(2)将所述基础液灭菌，在无菌环境下加入所述添加物，即得高效抗氧化驴精子稀释液。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述灭菌的条件...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴海青，苏少锋，乔健敏，特日格勒，田婧，贾晓清，马跃军，孙培陪，白晋宇，
申请(专利权)人：内蒙古自治区农牧业科学院，
类型：发明
国别省市：