MICRORNA-29化合物、组合物及其治疗用途制造技术

本发明专利技术涉及新的microRNA

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】MICRORNA
‑
29化合物、组合物及其治疗用途


[0001]本专利技术涉及新的microRNA
‑
29(miR
‑
29)化合物、包含其的组合物，及它们在治疗中的用途。特别地，本文提供了miR 29化合物以及在涉及局部胶原失调的疾病诸如肌腱损伤包括肌腱病，以及组织纤维化包括佩罗尼氏病和掌肌腱膜挛缩症的治疗中特别有效和安全的组合物。还提供了miR
‑
29化合物有利的剂量和治疗方案。
[0002]背景和概要
[0003]MicroRNA(miR)是小的非编码RNA，其与RNA诱导的沉默复合物(RISC)一起工作以减少或防止包含互补靶序列的信使RNA(mRNA)的翻译。
[0004]miR
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29家族的成员已被暗示为细胞外基质(例如，胶原)的转录后调节剂。失调的胶原合成，特别是一种或多种类型的胶原的过度产生，有助于在某些疾病诸如肌腱损伤包括肌腱病以及组织纤维化包括佩罗尼氏病和掌肌腱膜挛缩症中看到的病理。
[0005]专利技术人先前公开的研究(参考文献1、2、3)建立了miR
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29在肌腱损伤中调节胶原产生中的关腱疾病途径。例如，在健康肌腱细胞中，miR
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29(例如miR
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29a，在本文中也称为miR29a)抑制胶原3(col3)过度产生，而在肌腱病中，miR
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29水平降低和col3过度产生，这导致机械上较差的肌腱组织易于进一步损伤。在那些研究中，专利技术人表明，用miR
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29a化合物体外转染肌腱细胞显著降低了col3表达，而col1的水平，即肌腱中胶原的理想和生物力学上优异形式仍然很大程度上不受影响。本专利技术人还证明了，由于替代的多聚腺苷酸化位点的利用，肌腱细胞中大多数col1转录物缺乏miR
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29的结合位点，而肌腱细胞中大多数col3转录物保留了miR
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29结合位点。因此，肌腱细胞中的Col1转录物对miR
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29介导的下调不敏感，而miR
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29能够特异性地抑制那些细胞中的col3。这在肌腱损伤的体内模型中被证实，其中显示miR
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29a化合物递送至小鼠损伤的肌腱(参考文献1、2)或马(参考文献3)导致col3合成的减少，同时维持col1水平。先前的研究已经表明，在成纤维细胞中，miR
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29不仅抑制了col3的表达，而且抑制了其它类型的胶原包括col1的表达(例如，参考文献4)。
[0006]本专利技术提供了改进的miR
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29化合物，其在治疗中特别有效和安全。这些化合物可用于治疗需要增加的miR
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29(例如miR
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29a)活性的任何病况。这涵盖涉及局部胶原失调，并且需要减少或抑制一种或多种类型的胶原(诸如胶原3)的表达的病况，包括但不限于肌腱损伤，包括肌腱病(例如，外上髁炎，也称为网球肘)以及组织纤维化诸如佩罗尼氏病和掌肌腱膜挛缩症。本文所述的化合物模拟天然miR
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29的活性，同时某些化学修饰提供改善的药理性质，诸如增加的活性、稳定性和细胞摄取，又不引起免疫原性问题。本文所述的化合物和组合物的进一步优点是它们在简单水性载体中是稳定的，并且可以直接施用于患病(afflicted)位点，而不需要重构或稀释。
[0007]本文还提供了miR
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29化合物在治疗疾病诸如肌腱损伤包括肌腱病和组织纤维化诸如佩罗尼氏病和掌肌腱膜挛缩症中特别有利的剂量和治疗方案。专利技术人已经表明，例如在肌腱病的小鼠模型中通过局部(肌腱内)注入施用miR
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29化合物至损伤的肌腱改善肌腱愈合和肌腱纤维质量。令人惊讶的是，仅单一施用(即单剂量)就能达到治疗功效。提供了适合于治疗(例如，人治疗)的剂量。数据也可用来支持miR
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29化合物在组织纤维化诸如掌肌
腱膜挛缩症和佩罗尼氏病中的治疗功效。miR
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29化合物可以在简单水性载体中在病理学位点处(病灶内)局部施用。本文提供的数据表明，在局部病灶内施用后，存在可忽略的全身暴露或分布到其它组织中，从而提供特别安全的治疗。此外，因为单剂量可以是治疗有效的，所以仅需要保健专业人员随访一次，从而实现简单、成本有效的和快速有效的治疗。
[0008]本专利技术的公开
[0009]在一个方面，本专利技术提供了miR
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29化合物、包含其的组合物以及它们在治疗中的用途。本专利技术因此提供了miR
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29化合物或其盐，其包括引导(反义)链和乘客链(正义)链，其模拟天然miR
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29a的生物活性，例如下调胶原3表达。本专利技术的化合物因此能够减少或抑制胶原3表达。由于各种miR
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29家族成员(miR
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29a、miR
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29b
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1、miR
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29b
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2和miR
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29c)之间的生物活性重叠，本文提供的miR
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29化合物也可模拟其他miR
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29家族成员的生物活性。miR
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29化合物因此也可称为miR
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29模拟物或miR
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29模拟化合物。
[0010]miR
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29化合物的引导链和乘客链是寡核苷酸，即它们包含通过核苷间键合连接的核苷。引导链和乘客链形成双链体，典型地在至少一条链中包含许多错配和悬垂。本文描述的miR
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29化合物典型地是化学修饰的，其意指至少一种糖、核苷间键合或核碱基具有不同于天然存在的miR
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29中的结构的化学结构。也可以选择化学修饰以改善miR
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29化合物的药理性质，例如，通过增强它的活性和/或稳定性。示例性修饰的糖是2
’‑
氟核糖、2
’‑
O
‑
甲基核糖或2
’‑
脱氧核糖。示例性修饰的核苷间键合是硫代磷酸核苷间键合。示例性修饰的核碱基是5
‑
甲基胞嘧啶。miR
‑
29化合物也可以典型地在乘客链的3
’
端处缀合(即共价连接)至亲脂性部分诸如胆固醇部分。此类至亲脂性部分的缀合可改善miR
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29化合物用于体内用途的性质，例如，通过改善它的细胞摄取。
[0011]在一个实施方式中，本专利技术因此提供了miR
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29化合物或其盐，其包括：
[0012](a)引导链，其包含在序列5
’‑
AGCACCA
‑3’
(SEQ ID NO:8，其是种子序列)外的不超过五个(或不超过四个、三个、两个或一个)位置处，以及任本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种miR
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29化合物或其盐，包括：(a)引导链，其包含核碱基序列5
’‑
UAGCACCAUCUGAAAUCGGUUA
‑3’
(SEQ ID NO:1)，或在序列5
’‑
AGCACCA
‑3’
(SEQ ID NO:8)外的不超过三个位置处不同于SEQ ID NO:1的核碱基序列；其中至少50％的核苷包括2
’‑
氟核糖并且其中一个或两个核苷在3
’
端处各自包括2
’‑
O
‑
甲基核糖；和(b)乘客链，其包含核碱基序列5
’‑
ACUGAUUUCUUUUGGUGUUCAG
‑3’
(SEQ ID NO:2)或5
’‑
ACUGAUUUCUUUUGGUGUUCA
‑3’
(SEQ ID NO:3)，或其包含在不超过三个位置处不同于SEQ ID NO:2的核碱基序列；并且其中至少10个连续核苷交替地是2
’‑
O
‑
甲基核糖核苷和具有未修饰的核糖部分的核苷。2.根据权利要求1所述的miR
‑
29化合物或盐，其中一个或两个核苷在引导链的3
’
端处各自包括2
’‑
O
‑
甲基核糖并且：(i)包括2
’‑
修饰的核糖的引导链的每个其余核苷是2
’‑
氟核糖核苷，或(ii)引导链的每个其余核苷是2
’‑
氟核糖核苷或未修饰的核糖部分。3.根据权利要求1所述的miR
‑
29化合物或盐，其中(i)引导链的每个核苷包括2
’‑
修饰的核糖，(ii)引导链的每个核苷包括2
’‑
O
‑
甲基核糖或2
’‑
氟核糖，或(iii)在引导链的3
’
端处的一个或两个核苷每个包括2
’‑
O
‑
甲基核糖并且引导链的每个其余核苷是2
’‑
氟核糖核苷。4.前述权利要求中任一项所述的miR
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29化合物或盐，其中引导链和/或乘客链的所有核苷间键合是磷酸二酯核苷间键合。5.前述权利要求中任一项所述的miR
‑
29化合物或盐，其中引导链的核碱基序列是SEQ ID NO:1定义的，和/或乘客链的核碱基序列是SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3定义的。6.前述权利要求中任一项所述的miR
‑
29化合物或盐，其中引导链是5
’‑
fUfAfGfCfAfCfCfAfUfCfUfGfAfAfAfUfCfGfGfUmUmA
‑3’
；和/或乘客链是5
’‑
mArCmUrGmArUmUrUmCrUmUrUmUrGmGrUmGrUmUrCdA
‑3’
。7.前述权利要求中任一项所述的miR
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29化合物或盐，进一步包括共价附接至乘客链的3
’
端的胆固醇部分。8.一种药物组合物，其包括根据前述权利要求中任一项所述的miR
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29化合物或其盐，以及药学上可接受的...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：高士威治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：