一种促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌及其应用。分类命名为小孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora，分类地位为半知菌亚门腔孢纲黑盘孢目(科)拟盘多毛孢属，菌株号为JSNLSHGS

【技术实现步骤摘要】
一种促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及一种促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌及其应用。

技术介绍

[0003]目前，铁皮石斛市场需求主要靠人工栽培，但人工种植铁皮石斛的生长速度慢，人们为了追求产量，农药化肥滥施现象严重，导致了其品质低、农残高，食品安全事件时有发生，基于此，科研人员逐渐将铁皮石斛生产栽培过程中的用肥用药研究方向转向了微生物资源，由于石斛属兰科植物，需与真菌共生才能完成整个生活史，而自然界石斛种类众多，其菌根真菌资源亦资源丰富，这为广大科研人员提供了丰富的供研究的微生物资源。如何筛选出作用显著的菌根菌剂，进一步促进铁皮石斛生长，成为铁皮石斛产业研究发展的一个重要方向。

技术实现思路

[0004]专利技术目的：针对现有技术的不足与缺陷，本专利技术的目的之一是提供一种对铁皮石斛栽培中促生作用显著的菌根真菌—小孢拟盘多毛孢菌Pestalotiopsis microspora，菌株号为JSNLSHGS
‑
13。本专利技术的另一个目的是提供上述菌株在促进铁皮石斛生长中的应用。
[0005]技术方案：本专利技术的促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌，其分类命名为小孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora，其分类地位为半知菌亚门腔孢纲黑盘孢目(科)拟盘多毛孢属，菌株号为JSNLSHGS
‑
13，现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.18543，保藏日期为2019年09年02日。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
[0006]该菌株的主要生物学特性为：在PDA培养基上培养7d，菌落直径5.4cm，生长较慢。菌落扁平，表面白色絮状，背面有环状色素沉淀，轮状生长，边缘不整齐，菌丝不发达，生长速度慢。
[0007]扩增ITS区全序列并进行测序，PCR扩增得到的16sRNA全序列(SEQ ID NO.1)GTGACTTACCTTTTGTTGCCTCGGCAGAAGTTATAGGTCTTCTTATAGCTGCTGCCGGCGGACCATTAAACTCTTGTTATTTTATGTAATCTGAGCGTCTTATTTTAATAAGTCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCATTAGTATTCTAGTGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTTAAGCCTAGCTTAGTGTTGGGAATCTACTTCTCTTAGGAGTTGTAGTTCCTGAAATACAACGGCGGATTTGTAGTATCCTCTGAGCGTAGTAATTTTTTTCTCGCTTTTGTTAGGTGCTATAACTCCCAGCCGCTAAACCCCCAATTTTTTGTGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGA。
[0008]本专利技术的促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌的应用。
[0009]本专利技术的菌株JSNLSHGS
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13生产的微生物菌剂。
[0010]本专利技术的菌株JSNLSHGS
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13生产的微生物菌剂的制备方法：包括下述步骤：
[0011]1)以玉米粉为培养基质、硫酸铵为外源氮源，葡萄糖为外源碳源，制备成固体培养基；pH调至5.5～6.5，灭菌后接种菌株JSNLSHGS
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13；
[0012]2)在25℃～30℃，12h光照/12h暗培养条件下培养20d～30d；
[0013]3)将步骤2)培养好的固体菌剂粉碎成粉末状，获得微生物菌剂。
[0014]所述的步骤1)中玉米粉、硫酸铵、葡萄糖的质量比为40～50:5:8～10；每100g上述质量比混合物加纯净水45g～55g，混匀灭菌制成固体培养基。
[0015]所述的灭菌条件为121℃和0.11MP的高压条件下灭菌30min。
[0016]本专利技术的菌株JSNLSHGS
‑
13生产的微生物菌剂在铁皮石斛栽培中的应用。
[0017]每立方铁皮石斛栽培基质接种菌剂的接种量为20g～50g。
[0018]所述的铁皮石斛栽培基质相对含水量维持在60％～90％之间10d以上。
[0019]选取铁皮石斛组培苗为栽培材料，将铁皮石斛苗洗净，晾干至根发白，称重后，按照5株/丛，30丛/
㎡
的种植密度种植于接菌栽培基质中。
[0020]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有以下显著优点：本专利技术小孢拟盘多毛孢菌Pestalotiopsis microspora菌株JSNLSHGS
‑
13对铁皮石斛苗促生长作用明显，对减少化学肥料的施用有一定作用，施用后能显著提高铁皮石斛苗的叶绿素含量，降低MDA和POD酶活，从而促进其生长。同时，该菌株能够人工培养、培养条件简单、施用方便、容易保存，易于规模化生产，具有良好的开发应用前景。
附图说明
[0021]图1为本专利技术的菌株培养的菌落正面形态图；
[0022]图2为本专利技术的菌株培养的菌落背面形态图。
具体实施方式
[0023]下面结合附图及具体实施方式对本专利技术的技术方案做进一步的描述。
[0024]实施例1：
[0025]2017年6月在江苏省句容市江苏农博园内从石斛栽培区生长状态良好的高山石斛根系分离筛选到一株能促进铁皮石斛幼苗生长的菌株获得的菌菌株JSNLSHGS
‑
13。
[0026]该菌株JSNLSHGS
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13的菌落特征如下：在PDA培养基上培养7d，菌落直径5.4cm，生长较慢。菌落扁平，表面白色絮状，背面有环状色素沉淀，轮状生长，边缘不整齐，菌丝不发达，生长速度慢。
[0027]扩增ITS区全序列并进行测序，PCR扩增得到的16s RNA全序列如下所示。PCR扩增得到的全序列(SEQ ID NO.1)：
[0028]GTGACTTACCTTTTGTTGCCTCGGCAGAAGTTATAGGTCTTCTTATAGCTGCTGCCG
[0029]GCGGACCATTAAACTCTTGTTATTTTATGTAATCTGAGCGTCTTATTTTAATAAGTCA
[0030]AAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAAT
[0031]GCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACA
[0032]TTGCGCCCATTAGTA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌，其分类命名为小孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora，菌株号为JSNLSHGS
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13，现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.18543，保藏日期为2019年09年02日。2.权利要求1所述的促进铁皮石斛生长的小孢拟盘多毛孢菌的应用。3.权利要求1所述的菌株JSNLSHGS
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13生产的微生物菌剂。4.权利要求3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：1)以玉米粉为培养基质、硫酸铵为外源氮源，葡萄糖为外源碳源，制备成固体培养基；pH调至5.5～6.5，灭菌后接种菌株JSNLSHGS
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13；2)在25℃～30℃，12h光照/12h暗培养条...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹤同，席刚俊，贾君，史俊，高大响，马爱军，丁久玲，方敏彦，张勇，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：