针对SORT1的多肽化合物及其药物偶联物制造技术

本发明专利技术涉及一种特异性靶向Sorti lin/SORT1蛋白的靶向肽，以及包含所述靶向肽的靶向肽

【技术实现步骤摘要】
针对SORT1的多肽化合物及其药物偶联物


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种针对Sort1靶点的多肽化合物及其药物偶联药物，以及它们的制备方法和用途。

技术介绍

[0002]癌症，是威胁人类健康的头号杀手。世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC) 公布的数据显示，2020年全球新诊断癌症1930万例。手术虽然可以切除早期的局限性肿瘤，但对于晚期或全身性癌症来说收效甚微；而放疗和化疗会带来脱发、呕吐等副作用。
[0003]靶向药是抗肿瘤药市场的“明日之星”。靶向药的一大特点是针对特定靶点产生作用，每个病人的情况各不相同，可以选用的靶向药也各有不同，一定程度上实现对肿瘤的个体化治疗。从药品的需求趋势来看，疗效明显、副作用小是未来产品发展的主要需求方向，在这种市场需求驱动下，抗肿瘤靶向药的研发与临床应用将是抗肿瘤药物行业未来主要发展方向之一。
[0004]Sortilin(NP_002950.3)也称为神经降压素受体3(NTSR3)，是一种100kDa 的1型膜糖蛋白，它由SORT1基因(Gene ID:6272)编码，该基因位于人类染色体1P13.3。SORT1基因编码5种Sortilin的变体，包括831个氨基酸(aa)的全长序列、4个截短剪接变体694、118、60、和20aa(Fatemeh Ghaemimanesh等， 2021)。Sortilin属于空泡蛋白分选10蛋白(VPS10)受体家族。Vps10蛋白家族包括异源1型跨膜受体，包括Sortilin(100kDa)、SorLA、SorCS1、SorCS2 和SorCS3，成熟的Sortilin是由前体prepro
‑
Sortilin分化而来(MunckPetersen等，1999)。Sortilin不仅可定位在高尔基体膜上作为分拣蛋白，还可定位于细胞膜上作为清除受体。
[0005]Sortilin由pre
‑
peptide前肽(插入细胞膜的蛋白质的常见信号序列；1
‑
33 aa)、pro
‑
peptide前肽(34
‑
77aa)、大管腔/胞外区(Vps10p结构域；78
–ꢀ
755aa)、756
–
778aa的跨膜片段和779
–
831aa的胞内结构域组成(图1)(FatemehGhaemimanesh等，2021)。信号肽酶和furin蛋白转化酶两种酶负责从 pre
‑
peptide前肽切割位点切割前肽和pro
‑
peptide前肽以产生成熟形式的蛋白质(Munck Petersen等，1999)。
[0006]Sortilin因为其能够结合神经降压素的能力而首次被发现，而后被发现可以结合神经营养因子前体等一系列配体。越来越多的研究证实了Sortilin能够与许多分子相互作用并影响它们的细胞内分布。如在神经元和B淋巴细胞内， Sortilin调节神经营养因子的细胞内的转运。特别的是，Sortilin的前体形式被剪切掉N端的前体部分后，变成成熟的Sortilin后被持续分泌到细胞膜，这一过程使得Sortilin暴露于细胞膜上并结合其配体，进而促进其结合配体并转导其胞内信号或者直接介导配体的细胞内化。现有的研究表明Sortilin在细胞内具有双重的功能：不仅参与物质的细胞转运的调节，而且作为受体在胞内发挥转导细胞外配体的信号的作用(Fatemeh Ghaemimanesh等，2021)。
[0007]Sortilin的过度表达及其在肿瘤学中的临床病理学意义已在各种类型的人类实体癌中陆续报道(例如：神经内分泌，Kim等，2018年；乳腺癌，Demont 等，2012年；Rhost等，
2018年；Roselli等，2015年；结肠直肠癌，Akil等,2011 年；卵巢癌，Ghaemimanesh等，2014年；Hemmati等，2009年)和血液系统恶性肿瘤(慢性淋巴细胞白血病，Lia Farahi等，2019年)。
[0008]抗体药物偶联物(ADC)主要应用于在靶向肿瘤治疗领域。ADC药物是一类由抗体、连接子和细胞毒性药物组成的靶向生物制剂。
[0009]ADC所使用的抗体与肿瘤细胞表面抗原有极高的亲和力，对含有相同靶点的正常细胞由于抗体半衰期较长(1
‑
3周)，因此其在体内留存的时间内会不断地杀伤正常细胞，极大的增大了药物的毒副作用，另外抗体是个比较笨拙的运输工具、在肿瘤的小胡同穿行比较困难，据估计只有0.1％的药物能到达肿瘤组织，为了保证其它99％的剧毒弹头不要带来系统毒性，连接弹头与抗体的化学链接必须足够稳定。但为了能在细胞内释放弹头又不能太稳定，这显然为药物设计带来麻烦。由于分子量的巨大差异，对于相同摩尔数的有效载荷 (payload)，ADC药物所用的质量是有效载荷的300倍左右，因此副作用相对较大。
[0010]ADC还易于聚集，ADC聚集会导致修饰从而降低其与抗原的结合能力。蛋白质聚集是ADC开发的主要障碍，聚集可以发生在每个阶段以及运输和长期储存期间。聚集体具有免疫原性。此外，蛋白质聚集会导致产品损失。总体而言，任何化学或物理降解都可能导致ADC的结构改变并导致蛋白质过度聚集。还有各种其他因素会导致聚集，例如频繁的冷冻/解冻、高浓度蛋白和盐浓度、升高的温度或低pH值。此外，大多数有效载荷是疏水的，在蛋白质表面以高DAR 结合有效载荷会导致蛋白质过度聚集，从而阻碍ADC的成功开发。
[0011]另外抗体偶联药物(ADC)与抗体药物一样也存在免疫原性，其免疫原性风险对病人来说，免疫原性影响了药物的安全性和有效性、甚至会因为ADA和内源蛋白交叉给病人带来致命的新疾病。
[0012]PDC(Peptide
‑
Drug Conjugate)即多肽偶联药物，由连接子(linker)、归巢肽(homing peptide)以及具有细胞毒性的有效载荷(payload)构成，归巢肽可以特异性靶向肿瘤细胞表面过表达的蛋白受体从而传递细胞毒素诱导肿瘤细胞凋亡。相比于目前ADC药物，PDC药物具有分子量小、肿瘤穿透性强、免疫原性低、利用固相合成法可大规模合成、生产成本较低、相对较好的药代动力学等特点，成为继小分子靶向药、单克隆抗体、ADC之后的下一代靶向抗肿瘤药。

技术实现思路

[0013]本专利技术的目的在于提供一种具有非天然氨基酸或环肽的靶向肿瘤高表达靶蛋白Sortilin的靶向肽，以及含有所述靶向肽的靶向肽
‑
药物偶联物。
[0014]本专利技术的第一方面，提供了一种分离的多肽或其药学上可接受的盐，所述多肽包含修饰或未修饰的非天然氨基酸，和/或通过链内连接子(intro
‑
chain linker) 环化连接的两个半胱氨酸残基，并且所述多肽特异性靶向SORT1蛋白；
[0015]其中，所述链内连接子为或二硫键。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的多肽或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述多肽包含修饰或未修饰的非天然氨基酸，和/或通过链内连接子(intro
‑
chain linker)环化连接的两个半胱氨酸残基，并且所述多肽特异性靶向SORT1蛋白；其中，所述链内连接子为或二硫键。2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽为线性肽或环肽。3.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽为环肽，所述环肽是由多肽序列中隔开的两个半胱氨酸残基环化形成，其中，所述半胱氨酸残基分别位于多肽序列N末端起第1
‑
6位的范围内，和多肽序列C末端起第1
‑
6位的范围内，且所述两个半胱氨酸残基之间的间隔不少于3个氨基酸。4.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列结构如式I所示：X0‑
X1‑
X2‑
X3‑
X4‑
X5‑
Ala
‑
X7‑
Val
‑
Arg
‑
X
10
‑
X
11
‑
X
12
‑
X
13
‑
X
14
‑
X
15
‑
X
16
‑
X
17
‑
X
18
(I)其中，X0为乙酰化(Ac)修饰或未修饰的Cys或无，或Z0‑
Cys，其中Z0为1
‑
3个氨基酸残基；X1为乙酰化(Ac)修饰或未修饰的Gly、D
‑
Ala、Val、Asn、Arg、Gln或无；X2为Val、1Nal、2Nal、D
‑2‑
Nal、或Tyr；X3为Arg或hArg；X4为Ala、Arg或无；X5为Lys、hArg、Arg或Cys；X7为Gly、Arg、D
‑
Ala、Leu、Phe、或Cys；X
10
为Asp或AsnX
11
为Val或Nle；X
12

【专利技术属性】
技术研发人员：董志超，陈昌发，
申请(专利权)人：上海智肽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：