一种超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方法技术

本发明专利技术提供了一种超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方法，它以蕨麻为原料，经超声波提取３０～１２０分钟，在０．０６～０．０８ＭＰａ压力条件下过滤，滤液在压力０．０６～０．０８ＭＰａ、温度５５℃～６５℃下减压浓缩，乙醇沉淀、离心，收集下层沉淀物，冷冻干燥，再经木瓜蛋白酶酶解，正丁醇和氯仿混合液萃取，减压浓缩，透析后，得到天然蕨麻多糖，其无毒副作用，对Ｘ射线辐射引起的自由基所造成的体内氧化损伤有较好的修复作用。经３．５Ｇｙ　Ｘ射线照射小鼠的抗氧化能力实验表明：７天服用该制剂使辐射损伤动物的ＳＯＤ活性升高６６．７％；Ｔ－ＡＯＣ活力上升５４．６％，ＣＡＴ活力上升１０５．７％，ＭＤＡ含量下降６３．２％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然多糖的制备方法，具体地说是一种超声波提取具有抗辐射氧化作用的蕨麻多糖的方法。
技术介绍
电离辐射对生物体的损伤既有能量传递的直接作用，也有通过水的辐射反应，大量产生自由基的间接作用。DNA分子中碱基、核糖和磷酸键都 可能遭受自由基的攻击，造成碱基与核糖氧化、链断裂、与蛋白质交联等多种 类型的损伤。自由基引发的脂类过氧化作用可造成生物膜中饱和与不饱和脂肪 酸的比例失调，改变膜结构的刚柔特性，增加膜的通透性，甚至发生崩解。MDA 是脂质过氧化的分解产物，其含量可反映脂质过氧化的程度以及机体受自由基 攻击的程度。SOD和CAT是催化02'和分解H202的抗氧化酶，它们都反映机体 的抗氧化能力。自由基作用于脂质过氧化反应，氧化终产物丙二醛等会引起蛋 白质、核酸等生命大分子的交联聚合，该现象是衰老的一个基本因素。为了减缓氧化、衰老的过程，修复治疗受伤的机体，人们通常食用一些含 有天然存在的抗氧化剂的食物，如含维生素A、维生素C、维生素E、硒、锌的 水果、绿叶蔬菜、浆果等。与此同时，人们也在有目的地寻找毒性低且活性高 的抗氧化物质。专利CN 1143084A公开了一种抗氧化剂接枝的多糖或抗氧化剂 交联的多糖在治疗关节炎、作为药物介质方面的作用，降低术后粘连的发生率、 促进慢性创伤和溃疡的愈合。专利CN 101353382A公开了一种具有抗氧化活性 虫草多糖的提取方法，报道了一种用虫草废液提取抗氧化活性多糖的方法，精 多糖的提取率约为7.8%。专利CN 1144835A公开了一种从迷迭植物中提取抗氧 化剂的方法，该方法是在提取抗氧化剂之前，先用水蒸汽或超临界提取迷迭植 物中的精油，再提取其中的抗氧化剂。专利CN 101233950A公开了一种从低值海水鱼及下脚料蛋白中提取抗氧化剂的技术，得到的抗氧化剂其抗氧化活性达到维生素E的57.1 94.4。/。；专利CN 101099768A公开了一种从香椿老叶中提 取抗氧化活性物质的方法。蕨麻(蔷薇科委陵菜属鹅绒委陵菜的块根)具有治疗脾虚腹泻、病后贫血、 营养不良、健脾益胃、生津止渴、益气补血等效果。专利CN 02138522. X公开 了一种含有蕨麻提取物的保健食品及其制备，采用水和/或乙醇提取蕨麻，制得 蕨麻提取物，加入或不加食品添加剂制成保健食品，具有调解人体免疫功能、 抗疲劳的功效。专利CN 101001842A公开了蕨麻在制备抗缺氧药物中的应用， 可显著提高窒息性缺氧和急性减压缺氧小鼠的存活率和存活时间。专利 ZL200610090097.5公开了一种抗辐射蕨麻多糖的制备方法，得到了能增强动物 抗辐射能力的多糖，纯化后多糖得率为6.32%;专利CN 101358222A公开了一 种以蕨麻为原料微波辅助提取抗辐射多糖的方法，纯化后多糖的得率为12.18%， 用于治疗X射线引起的辐射损伤。超声波的优点是并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之 间产生声波空化作用，导致溶液内气泡的形成、增长和爆破压縮，从而使固 体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移 到液相的传质速率。专利ZL200610166326.7授权了一种米糠多糖的超声波提 取方法，超声波功率200 400W，并未考虑到提取条件对样品纯度的影响，纯 化后多糖的得率较低，仅为2.87%，很难应用于实际生产。上述技术中，常规提取多糖方法存在耗时长、溶剂消耗量大、提取效率低 及运行成本高等问题；而微波提取会对多糖分子结构产生影响，可能导致大分 子链的降解。抗辐射氧化作用不同于单纯的抗辐射作用，需以机体各器官的 抗氧化杨酶、抗氧化系统综合评价。而多糖结构的变化会对其生物活性产生巨大的影响，因此，在提取过程中如何能避免上述技术问题、克服现有技术 缺陷，得到目标生物活性物质是亟待解决的问题
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方 法，它首次使用超声波法提取蕨麻多糖，提取效率高、运行成本低，且能最大 限度地减小对多糖分子结构及其生物活性产生影响。本专利技术的另一目的在于提供一种蕨麻多糖在制备具有修复X-射线引发的自 由基氧化损伤功能的天然制品或保健食品中的应用。本专利技术提供的超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方法，可以通过以下技术 方案来实现，其步骤为1) 称取一定量蕨麻干粉，置于超声波提取设备中，加入20 50倍(m/v) 蒸馏水，搅拌、混匀；在超声波功率为100 180W、温度为4(TC 7(TC下提取 30 l20分钟，在0.06 0.08MPa压力条件下过滤，滤液在压力为0.06 0.08MPa、 温度为55。C 65。C的条件下减压浓縮至原体积的1/9 1/3，在浓縮液中加入乙 醇，所述的乙醇含量占加入乙醇后溶液总体积的70 80%，室温下静置24 36 小时后在4000 5000转/分钟的转速下离心，收集下层沉淀物，并在-60 -5(TC、 1 13Pa的条件下冷冻干燥24 30小时，得物质A;2) 称取一定量物质A，用6 9倍重量的蒸馏水溶解，后加入IO ^g/ml木 瓜蛋白酶液，酶液与A液的体积比为1 : 100，在温度40 5(TC下酶解10 12 小时，再用正丁醇和氯仿体积比为l:2 4的混合液，萃取3 5次，收集上层水 溶液，在温度40 5(TC、压力0.06 0.08MPa条件下，减压浓縮至原水溶液体 积的1/10 1/12，放入截留分子量6000 8000Da的透析袋中，流水透析20 24 小时，再用蒸馏水透析18 36小时，将透析袋内液体在温度40 50°C、压力0.06 0.08MPa条件下减压浓縮至原水溶液体积的1/10 1/12，加入乙醇，所述 的乙醇含量占加入乙醇后溶液总体积的70 80%，静置10 14小时，在4000 5000转/分钟的转速下离心，收集沉淀物在温度-60 -5(TC、压力1 13Pa条件 下冷冻干燥30 36小时，得纯化的蕨麻多糖。纯化后的蕨麻多糖经红外扫描，红外光谱显示如图5:在2829.67cm"处有 一特征峰，是分子中C-H键的变角振动引起的；在3423.56cm"处有一特征峰， 是O-H的伸縮振动引起的；802.3cm"附近吸收峰表明了 a-D-吡喃半乳糖的存在； 862.67cm"处的吸收峰说明含有(3-D-吡喃甘露糖，这些均为多糖的吸收峰。本专利技术提供的上述超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方法，与热水浸提和 微波萃取工艺相比，超声波提取具有如下突出特点无需高温，萃取效率高， 纯度高，对活性物质破坏小，具有广谱性，能耗较小，工艺成本低，综合经 济效益显著(见下表)。本专利技术是以蕨麻为原料，经过超声波提取、纯化制备 的一种可以修复由辐射引起的氧化损伤的天然产品，此天然产品无毒副作用， 且抗辐射氧化效果好。对X射线辐射引起的自由基所造成的体内氧化损伤有较 好的疗效。经3.5GyX射线照射小鼠的抗氧化能力实验表明7天服用该制剂使 辐射损伤动物的SOD活性升高66.7%; T-AOC活力54.6%, CAT活力上升 105.7%， MDA含量下降63.20/0。超声波取法与传统提取法、微波法比较<table>table see original document page 6本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超声波提取抗辐射氧化蕨麻多糖的方法，其特征是该方法的步骤为：　１）称取一定量蕨麻干粉，置于超声波提取设备中，加入２０～５０倍（ｍ／ｖ）蒸馏水，搅拌、混匀；在超声波功率为１００～１８０Ｗ、温度为４０℃～７０℃下提取３０～１２０分钟， 在０．０６～０．０８ＭＰａ压力条件下过滤，滤液在压力０．０６～０．０８ＭＰａ、温度为５５℃～６５℃下减压浓缩至原体积的１／９～１／３，在浓缩液中加入乙醇，所述的乙醇含量占加入乙醇后溶液总体积的７０～８０％，室温下静置２４～３６小时后在４０００～５０００转／分钟的转速下离心，收集下层沉淀物，并在－６０～－５０℃、１～１３Ｐａ的条件下冷冻干燥２４～３０小时，得物质Ａ；　２）称取一定量物质Ａ，用６～９倍重量的蒸馏水溶解，后加入１０μｇ／ｍｌ木瓜蛋白酶液，酶液与Ａ液的体积比为１ ∶１００，在温度４０～５０℃下酶解１０～１２小时，再用正丁醇和氯仿体积比为１∶２～４的混合液，萃取３～５次，收集上层水溶液，在温度４０～５０℃、压力０．０６～０．０８ＭＰａ条件下，减压浓缩至原水溶液体积的１／１０～１／１２，放入截留分子量６０００～８０００Ｄａ的透析袋中，流水透析２０～２４小时，再用蒸馏水透析１８～３６小时，将透析袋内液体在温度４０～５０℃、压力０．０６～０．０８ＭＰａ条件下减压浓缩至原水溶液体积的１／１０～１／１２，加入乙醇，所述的乙醇含量占加入乙醇后溶液总体积的７０～８０％，静置１０～１４小时，在４０００～５０００转／分钟的转速下离心，收集沉淀物在温度－６０～－５０℃、压力１～１３Ｐａ条件下冷冻干燥３０～３６小时，得纯化的蕨麻多糖。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张继，赵保堂，王俊龙，吴依茜，郭红云，王小芳，赵美荣，姚健，梁俊玉，马君义，杨云云，
申请(专利权)人：西北师范大学，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]