本发明专利技术公开了一种富含铁水稻的选育方法，是利用显色法对菲律宾国际水稻所引进的资源材料进行筛选，获得高于正常材料铁含量的３倍左右的富含铁的水稻特异性材料Ｙ３７６。其次，利用富含铁的水稻特异性材料Ｙ３７６通过杂交、回交等育种技术将Ｙ３７６富铁基因转入生产上大规模推广的产量高、抗性好、米质优水稻优良品种（系），获得富含铁的水稻新品种。本发明专利技术选育产量高、抗性好、米质优且富含铁的水稻新品种，满足了广大缺铁贫血者的需求。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种水稻的选育方法，具体是。
技术介绍
铁作为人体必需的多种微量金属元素中的一种，对人体的健康是十分重要 的。铁是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运 输，铁还能促进脂肪的氧化。缺铁可造成贫血并容易疲劳。大米，特别是在中国 南方，在人们日常生活饮食中占有极大比重。在食用大米的同时进行补铁是一举 两得的方法，所以，大米中铁的测定具有很大的营养学意义。而富含铁水稻新品 种的选育，意义则更为重大，其可从根本上解决缺铁引起的贫血等疾病。已有的 铁的测定方法主要有硫氰酸盐比色法、邻二氮菲比色法、联吡啶比色法和原子吸 收分光光度法等。然而，已有研究往往局限于现有水稻品种的大米中铁的测定。
技术实现思路
本专利技术提供了，其操作简单，运用显色法获得铁 含量高的水稻。本专利技术的技术方案如下，其特征在于包括以下步骤(1) 、选取多种水稻分别粉碎，放入不同研钵中，加入3-5mol/L盐酸研磨 至糊状，然后用3-5mol/L盐酸洗涤研钵后，转移至离心管，离心，离心后的上 清液再在80-ll(TC的水浴中温浴l-3小时后，震荡过滤，分别得到滤液；(2) 、吸取不同的滤液0. 5-1.5ml，然后在不同的滤液中按体积比例1: 1. 5-2. 5: 0. 5-1. 5: 4. 5-5. 5加入lmol/L盐酸溶液、10%氯化幾胺、0. 12% 4， 7-二 苯基菲罗啉和lmol/L乙酸钠，溶液显橘红色，颜色深表示铁含量高，浅则表示 铁含量低，无色表示不含铁，以不含铁的蒸馏水为空白对照；(3) 、将篩选获得的富含铁的特异性水稻品种与产量高、抗性好、米质优 的水稻进行杂交，获得F1代杂交种，然后从F1代杂交种开始进行自交、回交至 获得Fn代，F2至Fn每代采用步骤(1 )、 ( 2 )方法进行铁含量的检测，筛选得铁含量高的水稻。所述的富含铁水稻的选育方法，其特征在于步骤(1)中所述的多种水稻 指Y374、 Y376、 Y378、汕优63、储藏优1号水稻品种；筛选获得的富含铁的特 异性水稻品种是Y376;所述的lmol/L盐酸溶液、10%氯化羟胺、0.12% 4， 7-二 苯基菲罗啉和lmol/L乙酸钠的体积比为1: 2: 1: 5。本专利技术利用显色法将富4失基因转入生产上大规才臭惟广的水稻优良品种，选育 产量高、抗性好、米质优且富含铁的7jc稻新品种，满足了广大缺铁贫血者的需求。 附图说明图1为铁含量标准曲线。 具体实施步骤实施例一富含铁的资源材料样品处理水稻材料Y374、 Y376、 Y378均为来自菲律宾国际水稻所资源材料，试验以 普通含铁量的水稻品种籼稻杂交稻"汕优63"和籼稻杂交组合"储藏优1号" 为对照。上述材料于2007年10月收获，并晒干至安全水分。试验取Y374、 Y376、 Y378、汕优63、储藏优1号不同稻米品种20粒糙米粉 碎后，准确称取0. 2g样品放入研钵中，加入1毫升4mol/L HC1研磨至糊状，移 入5ml离心管中，再用3毫升4mol/L HC1分3次每次lml洗涤研钵后，均移入 5ml离心管中，用水浴锅90X:温浴2小时后，并于ZD-9556水平摇床上160次/ 每分钟震荡10分钟后过滤，取滤液1毫升用于测定铁的含量。 实施例二显色法快速筛选富舍铁的特异性材料准确吸取上述不同稻米品种20粒糙米处理获得的滤液各lmL，分别置于10毫 升的试管中，再分别按l: 2: 1: 5的比例依次加入lmol/L盐酸溶液lml、 10%氯化 轻胺2mL、 0.12°/。4, 7-二苯基菲罗啉lmL (现配现用)和lmol/L乙酸钠5mL，溶 液显橘红色，颜色深表示铁含量高，浅则表示铁含量低，无色表示不含铁，此法 以不含铁的蒸馏水为空白对照，可用于高铁含量水稻品种的快速筛选。试验中发 现Y376颜色最深，为高4失含量的水稻特异性材料。铁含量定量测定上述相同处理后反应体系用蒸馏水稀释至50毫升，再利 用分光光度计在510 nm波长处，测定各样品的吸光度，并根据总体积和标液浓 度换算，通过标准曲线求出各样品中铁的含量。Y376铁含量49. 75mg/kg为最高。见表l表1水稻高含铁量材料的定量筛选指标汕优63储藏优l号Y378Y374Y376铁含量 (510nmOD值)0. 0160. 0210. 0210. 0340. 04根据标准曲线计算铁标液体积数3.464. 814, 818. 329.95(微升)才艮据总体积和标液浓度计算获得每千克铁含量17. 324. 0524. 0541. 649. 75(毫克)实施例三Y376 F3代材料样品处理2007年海南以高含铁的Y376与产量高、抗性好、米质优的中香6号水稻品 种进行杂交获得F1代杂交种，2008年5月正季种植F1植抹，2008年9月获F2 种子，2009年1月海南南繁种植F2植株，2009年4月获F3代43个单抹种子， 用于富铁含量筛选。与上述资源库筛选过程相同，取43个单抹各20粒糙米粉碎后，准确称取 0. 2g样品放入研钵中，加入1毫升4mol/L HC1研磨至糊状，移入5ml离心管中， 再用3毫升4mol/L HC1分3次每次lml洗涤研钵后，均移入5ml离心管中，再 用水浴锅90。C温浴2小时后，于ZD-9556水平摇床上160次/每分钟震荡10分 钟后过滤，各取滤液l毫升用于测定铁的含量。 实施例四用显色法检测Y376与中香6号杂交F3代铁含量与上述资源库筛选过程相同，同样准确吸取上述不同单林20粒糙米处理获得 的滤液各lmL，分别置于10毫升的试管中，再分别按l: 2: 1: 5的比例依次加入 lmol/L盐酸溶液lml、 10%氯化羟胺2mL、 0. 12% 4， 7-二苯基菲罗啉lmL(现配现 用)和lmol/L乙酸钠5mL,以不含铁的蒸馏水为空白对照，试验筛选到2林铁含量 十分高且农艺性状优良的单林。定量检测步骤同上，发现该单林为普通的汕优63材料的铁含量的3倍以上。 实施例五铁含量标准曲线的绘制铁标准溶液配制精确称取O. 497g疏酸亚铁(FeS04 7H20)溶于50ml蒸馏水 中，加入5ml浓硫酸微热，溶解后即滴加2%高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪 色为止，用水定容至100ml，摇匀，得标准贮备液。此溶液每毫升含100pgFe"。准确吸取上述铁标液O、 10、 20、 30、 40、 60、 80微升依次加至50mL容量 瓶，再分别按l: 2: 1: 5的比例依次加入lmol/L盐酸溶液lml、 10%氯化羟胺2mL、 0.12% 4, 7-二苯基菲罗啉1 mL (现配现用)和lmol/L乙酸钠5mL，加蒸馏水到 刻度，静置IO min后，在510腿波长下测量上述各溶液的吸光度，以铁标液微 升数为横坐标，吸光度J为纵坐标绘制出标准曲线。表2铁含量标准曲线数据<table>table see original document page 6</column></row><table>权利要求1、，其特征在于包括以下步骤(1)、选取多种水稻分别粉碎，放入不同研钵中，加入3-5mol/L盐酸研磨至糊状，然后用3-5mol/L盐酸洗涤研钵后，转移至本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种富含铁水稻的选育方法，其特征在于：包括以下步骤： （１）、选取多种水稻分别粉碎，放入不同研钵中，加入３－５ｍｏｌ／Ｌ盐酸研磨至糊状，然后用３－５ｍｏｌ／Ｌ盐酸洗涤研钵后，转移至离心管，离心，离心后的上清液再在８０－１１０℃的水浴中 温浴１－３小时后，震荡过滤，分别得到滤液； （２）、吸取不同的滤液，然后在不同的滤液中按体积比例１∶１．５－２．５∶０．５－１．５∶４．５－５．５加入１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液、１０％氯化羟胺、０．１２％４，７－二苯基菲罗啉和１ｍｏｌ／Ｌ乙 酸钠，溶液显橘红色，颜色深表示铁含量高，浅则表示铁含量低，无色表示不含铁，以不含铁的蒸馏水为空白对照； （３）、将筛选获得的富含铁的特异性水稻品种与产量高、抗性好、米质优的水稻进行杂交，获得Ｆ１代杂交种，然后从Ｆ１代杂交种开始进行自交 、回交至获得Ｆｎ代，Ｆ２至Ｆｎ每代采用步骤（１）、（２）方法进行铁含量的检测，筛选得铁含量高的水稻品种。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张瑛，宣红，余行道，滕斌，朱学桂，
申请(专利权)人：安徽省农业科学院水稻研究所，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]
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