通过在树脂上分级分离可得到的葡萄籽提取物制造技术

用于提取葡萄籽的方法，其包括：ａ）用溶剂提取葡萄籽（总提取物）；ｂ）去除水不溶性鞣质；ｃ）任选地去除水溶性鞣质；ｄ）通过在柱上的色谱纯化，分离具有不同ＭＷ的产物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过在树脂上分级分离可得到的葡萄并予提取物本专利技术涉及通过在树脂上分级分离可得到的葡萄籽的提取物并涉及用 于制备该提取物的方法。本专利技术的方法提供来自葡萄籽内的具有可变含量的儿茶素和表儿茶酸 (单体)的提取物。根据本专利技术可得到的产物具有抗氧化剂作用并且主要用 作化妆品、补充剂食品补充剂(尤其作为心血管保护补充剂)和营养药。技术背景从葡萄籽的加工物中得到的总提取物含有多种代谢物，尤其是儿茶素单体和表儿茶酸单体、相关的原花青素(proanthocyanidole)寡聚体和多聚 体(矢车菊苷配基)以及多聚体和高分子量鞣质。EP 275224公开了用于制备葡萄(K/泡viVi^m)类黄酮的磷脂复合物的 的方法。WO 2005/36988公开了用于提取葡萄籽的方法，即在加工提取物后， 立即将种皮与种子分离。得到的提取物以低含量的单体多酚为特征。EP 348781公开了通过用醚或酯或酯与芳香烃的混合物提取葡萄籽和/ 或通过过滤而得到的富含原矢车菊酚(procyanidol)寡聚体的级分。EP 1035859公开了葡萄提取物的磷脂复合物用于治疗及预防动脉粥 样硬化的用途。已知的方法具有一些缺点，如使用有毒溶剂或需要特定的植物或复杂 方法。因而需要这样的常规方法，其中以简单方式实施该方法并提供其活性 成分含量可以随意进行调节的提取物。述套管足够的软以便从其内推出的管进入到中耳室内。然后，将插入 件取出并且使用细长的耳钳将管正确放置。引入管的方法:引入所述管的方法包括下述步骤1. 在耳膜内期望的位置切一小切口；2. 提供带有套管的管。将处于其套管内的管以长臂向前的方式安 装在导引器的顶端，管臂处于套管的另一端。3. 将耳管处于其上的导引器的端部放置在耳内，以便套管的端部 通过所述的穿孔稍微插入到耳膜内；用耳钳抓住管和导引件并将管的 顶喊插入到穿孔中。4. 通过滑动设置于把手上的导引件的旋钮推动耳管穿过耳膜，并且5. 将导引器从耳内取出。因为套管连接到导引器的顶端，其与导 引器一块从耳中取出。当使用杆插入件时，步骤为 在耳膜内期望的位置切一小切口，以便提供容易的插入； 将杆和处于套管腔内的所述管插入并将其推入到中耳腔； 然后将杆取出，将管留在切口内； 用细长耳钳将所述管调整到合适的位置。 当使用导引件时，步骤为1. 在耳膜内期望的位置切一小切口，以便提供容易的插入；2. 外科医生用手从其尾部将导引件握住，管在顶部处于半环形端 部内。将携带管的另一端放在穿孔附近；3. 将导引件的尾部固定保持在耳扩张器上以防止其任何的进一步 前进；4. 将管仅仅由细长耳钳推动并插入到所述穿孔中，直到所述臂弹 性张开到其正确位置；5. 将管保持在位，然后将导引件从耳中取出；6. 然后管被放置在其位置上。步骤(a)用丙酮或d-C3醇或溶剂的混合物或其水溶液(只要含水量不 超过90。/。(v/v))提取葡萄籽加以实施。优选40。/。v/v水-乙醇溶液。提取温度可以是从0°C至溶剂的沸腾温度并且优选地是70。C。如此实施允许从提取物内除去水不溶物、尤其高分子量鞣质的步骤 (b)，即冷却来自步骤(a)的提取物并且过滤或离心去掉不溶物。步骤(c)是任选的步骤，可以实施该步骤以除去在来自步骤(b)的提取物 内仍存在的任何鞣质。这些代谢物可以通过使用聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)加 以除去。优选地，本专利技术的方法还包括步骤(c)。步骤(d)允许使提取物分级分离，除去大部分无用的次级代谢物(糖等)， 同时保留矢车菊苷配基。该步骤即是通过在聚合树脂上吸附的色镨分离。 用于此目的的合适树脂的实例是苯乙烯-DVB树脂如AmberliteHP2(f或 Rohm and Haas XAD1180 ,或丙烯酸树脂如Rohm and Haas XAD7HP 。将从葡萄籽中得到的总提取物浓缩至5%至50% w/w 、优选10% w/w 的干残渣，并JL故置在1°C至25°C、优选在4。C的温度下，不搅拌，持 续l小时至24小时，优选16小时。将得到的混悬液在4。C离心直至从水溶液中除去残余沉淀物。将澄清 水溶液在旋转蒸发器内浓缩并添加水以得到5%至50% w/w 、优选10% w/w的干残渣。在一些例子中，溶液可以是水-醇或水-丙酮，而不仅是水 溶液。这取决于所需要的成品例如当需要具有高含量的儿茶素单体和寡 聚体的产物时，优选使用水溶液，否则使用水-醇或水-丙酮溶液。因此，当将从终产物内除去低分子量级分时，待上样至柱上的溶液应 当具有5%至50% w/w的干残渣和5%至30% v/v、优选10% v/v的醇(d-C3醇)或丙酮含量。因此已制备的溶液吸附于树脂上，而移出未滞留的溶液。此后，树脂用水-醇(d-C3醇，优选乙醇)或水-丙酮溶液洗涤以除去不想要的次级代谢物。溶剂应当具有100%至70%v/v、优选90% v/v的含水 量。弃去从柱内流出的洗涤溶液。产物用具有50%至5% v/v、优选30% v/v含水量的7jC-醇溶液d-C3 醇)、优选地用乙醇(洗脱。醇溶液可以任选地由具有50%至0% v/v、优选 30% v/v的含水量的水-丙酮溶液替换。本专利技术更详细的在如下实施例中描述。实施例1用水-醇溶液提取葡萄籽(步骤a、在此步骤中，制备作为随后柱色镨分离的原材料使用的总提取物。 将IOOO g葡萄籽在夹层式静态渗滤器内于70。C用1.5升乙醇(40% v/v) 覆盖4小时。4小时后，回收滤液并在相同条件下再提取7次，但是每次 提取^f吏用l升溶剂，以得到大约8升总滤液。合并的滤液抽吸加热过滤并 通过旋转蒸发器在60。C在减压下浓缩。该提取物具有228g总干残渣，基 于原材料的产率是22.8% w/w。将滤液浓缩以得到具有10% w/w 干残渣 的2.28 kg完全水性的混悬液。 实施例2用水-丙酮溶液提取葡萄籽(步骤a)在此步骤中，制备作为后续柱色镨分离的原材料使用的总提取物。 将1000 g葡萄籽在夹层式静态渗滤器或在配备搅拌器的夹层反应器内 于70。C用1.5升40% v/v丙酮覆盖4小时。4小时后，回收滤液并在相 同条件下再提取7次，但是每次提取使用1升溶剂，以得到大约8升总滤 液。合并的滤液抽吸加热过滤并通过旋转蒸发器在60。C在减压下浓缩。 该提取物具有235.6g的总干残渣，基于原材料的产率是23.56% w/w。 将滤液浓缩得到具有10% w/w干残渣的2.35kg完全水性的混悬液。实施例3纯化从葡萄籽中得到的提取物(步骤b):去除水不溶物 从步骤(a)的水-醇提取(实施例l)中得到的水混悬液在4°C冷却并静止 放置16小时，随后将仍冰冷的水混悬液在3000 g离心20分钟以从澄清水 溶液中分离淀析的残留物。弃去富含高分子量产物的残留物。得到的澄清溶液具有相当于168g部分纯化提取物的干残渣，具有 3.75% w/w儿茶素HPLC含量和2.87% w/w表儿茶酸HPLC含量及 6.62% w/w单体总含量(儿茶素+表儿茶酸)的。基于原材料的重量产率是 16.8% w/w。以下所述的全部色镨柱纯化法(4种不同方法)可以适用于该溶液。为 简洁起见，仅报道实施例5(利用方法1)作为直接纯化该溶液的实例。后续 所述的全部其它方法将适用于PVPP处理的溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于提取葡萄籽的方法，其包括：　　　　ａ）用溶剂提取葡萄籽（总提取物）；　　　　ｂ）去除水不溶性鞣质；　　　　ｃ）任选地去除水溶性鞣质；　　　　ｄ）通过在柱上的色谱纯化，分离具有不同分子量的产物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A焦里，A阿内利，
申请(专利权)人：因德纳有限公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]