【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种利用水牛ＥＧ样细胞生产转基因嵌合胚胎的方法，其特征是制作水牛转基因嵌合胚胎的主要步骤是： （１）水牛ＥＧ样细胞的转染与筛选：传代培养两代的水牛ＥＧ样细胞用线性质粒ＤＮＡ经脂质体介导转染后，用ＤＭＥＭ＋１０％胎牛血清＋２００μｇ／ｍ ｌ Ｇ４１８的培养液筛选培养６～８天，获得Ｇ４１８抗性的转基因细胞；然后，将Ｇ４１８抗性的转基因细胞在不含Ｇ４１８的培养液中进行扩增培养，并在荧光显微镜下检测细胞的绿色荧光蛋白ＧＦＰ表达情况，将表达ＧＦＰ的细胞用于转基因胚胎的生产； （２）制作水牛转基因嵌合胚胎：体外受精后第三天，将１０～１５个表达ＧＦＰ的ＥＧ样细胞显微注射到８～１６细胞阶段的水牛体外受精胚胎中，然后与颗粒细胞的单层细胞共培养４～５天，将培养获得的囊胚在荧光显微镜下检测ＧＦＰ表达情况，筛选获得水牛转基因嵌合胚胎。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：石德顺，黄奔，陆凤花，刘庆友，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]
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