特异性识别假单胞菌PSL的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了特异性识别假单胞菌Psl的抗体，包括其抗原结合片段，还提供了其制备方法与用途。与用途。

【技术实现步骤摘要】
特异性识别假单胞菌PSL的抗体及其用途
[0001]以下提交的序列表(文本名称：PSL antibody seqlist
‑
division中国局20230411.xml，记录日期：2023.04.11，大小：271KB)内容通过整体引用并入本文中。


[0002]本申请涉及特异性识别铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)Psl的抗体，及其制备方法和用途，包括用其治疗和预防假单胞菌感染的方法。

技术介绍

[0003]铜绿假单胞菌是一种广泛存在于自然界的专性需氧性革兰氏阴性杆菌。尽管其致病性通常很低，但它却是一种会引起机会性感染的病原菌，这种感染经常发生在患有癌症、糖尿病、免疫缺陷病等各种基础病和服用具有免疫抑制作用药物的患者中。在有皮肤黏膜破裂的患者中容易发生铜绿假单胞菌感染，患有慢性结构性肺病(如慢性阻塞性肺病或囊性纤维化)的患者也有相当大的感染风险。铜绿假单胞菌会引起肺炎、尿路感染、败血症等病症，并且常常导致严重的后果。高达10％的医院内感染由铜绿假单胞菌引起，铜绿假单胞菌菌血症患者的死亡率接近40％。临床上，铜绿假单胞菌感染被认为是最难治疗的感染之一，不仅因为铜绿假单胞菌本身对现有的抗生素敏感性低，还因为其很容易对多种抗生素产生耐药性。因此，开发抗生素的策略在对抗铜绿假单胞菌感染方面的优势有限。
[0004]铜绿假单胞菌是医院获得性感染的主要原因之一，特别是机械通气的患者，而且它是导致囊性纤维化患者死亡的主要原因。铜绿假单胞菌生物膜基质的一个关键成分是多糖Psl，它是由多糖合成位点编码的蛋白质产生的。Psl既可以游离在细胞外，也可以结合在细胞表面。游离在细胞外的Psl的结构由D
‑
甘露糖、L
‑
鼠李糖和D
‑
葡萄糖的五糖重复单元组成。由于Psl在生物膜形成过程中兼具结构和保护功能，而且已知它还可以保护生物膜免受抗生素(通过化学结合)和免疫系统(通过一种未知的机制)的伤害，因此可能是新的治疗选择的一个理想靶点(Ray VA.et al.Anti
‑
Psl Targeting of Pseudomonas aeruginosa Biofilms for Neutrophil
‑
Mediated Disruption.Sci Rep.2017)。在(DiGiandomenico,A.et al.Identification of broadly protective human antibodies to Pseudomonas aeruginosa exopolysaccharide Psl by phenotypic screening.J Exp Med 209,1273
–
1287；Valerie A.Ray,et al,Anti
‑
Psl targeting of Pseudomonas aeruginosa biofilms for neutrophil mediated disruption,Scientific Reports7,Article number:16065(2017))中描述了靶向Psl的人单克隆抗体(mAbs)，例如Wapr
‑
001、Wapr
‑
016、Cam
‑
003或其衍生物psl0096。
[0005]本文提及的所有出版物、专利、专利申请和已公开的专利申请中披露的内容，以引用方式全部并入本文中。
[0006]申请概述
[0007]本申请提供了一种特异性结合假单胞菌Psl的分离的抗体或抗原结合片段，及其用于预防和治疗假单胞菌感染的方法。
[0008]在一方面，本申请提供了一种特异性结合假单胞菌Psl的分离的抗体或抗原结合片段，其包括：V
H
，所述V
H
包含：一个HC
‑
CDR1，包含SEQ ID NOs:2
‑
3、5
‑
12中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；一个HC
‑
CDR2，包含SEQ ID NOs:14
‑
15、17
‑
23中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；和一个HC
‑
CDR3，包含SEQ ID NOs:25
‑
26、28
‑
34中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体。
[0009]在一方面，本申请提供了一种特异性结合假单胞菌Psl的分离的抗体或抗原结合片段，其包括：V
L
，所述V
L
包含：一个LC
‑
CDR1，包含SEQ ID NOs:38
‑
39、41
‑
49中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；一个LC
‑
CDR2，包含SEQ ID NOs:52
‑
53、55
‑
61中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；和一个LC
‑
CDR3，包含SEQ ID NOs:63
‑
64、66
‑
68、70
‑
75中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体。
[0010]在一方面，本申请提供了一种特异性结合假单胞菌Psl的分离的抗体或抗原结合片段，其包括：V
H
，所述V
H
包含：一个HC
‑
CDR1，包含SEQ ID NOs:2
‑
3、5
‑
12中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；一个HC
‑
CDR2，包含SEQ ID NOs:14
‑
15、17
‑
23中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；和一个HC
‑
CDR3，包含SEQ ID NOs:25
‑
26、28
‑
34中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；以及V
L
，所述V
L
包含：一个LC
‑
CDR1，包含SEQ ID NOs:38
‑
39、41
‑
49中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；一个LC
‑
CDR2，包含SEQ ID NOs:52
‑
53、55
‑
61中任一氨基酸序列，或其包含至多3个氨基酸取代的变体；和一个LC
‑
CDR3，包含SEQ ID NOs:63
‑
64、66
‑
68、70
‑
75中任一氨基酸序列，或其包含至多本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性结合假单胞菌Psl的分离的抗体或抗原结合片段，包括：(i)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(ii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:165；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(iii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:166；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(iv)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:35；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(v)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:167；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(vi)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:168；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ IDNO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:65；(vii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:199；(viii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:200；(ix)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:76；(x)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其
氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:201；(xi)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:202；(xii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ IDNO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:78；(xiii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:203；(xiv)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:204；(xv)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:205；(xvi)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:206；(xvii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:16，和HC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:27；以及V
L
，所述V
L
包含：LC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:40，LC
‑
CDR2，其氨基酸序列为SEQ ID NO:54，和LC
‑
CDR3，其氨基酸序列为SEQ ID NO:207；(xviii)V
H
，所述V
H
包含：HC
‑
CDR1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4，HC
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：李忠，于茂荣，
申请(专利权)人：北京三诺佳邑生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：