激光捕获显微切割可视化化学物质制造技术

本发明专利技术提供了一种包含有机组分、稳定化组分和保存组分的液体。所述有机组分、所述稳定化组分和所述保存组分是不同的组分。所述液体中存在的所述有机组分包含具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液。进一步，所述液体是提供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】激光捕获显微切割可视化化学物质
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年11月11日提交的美国临时专利申请号63/112,321的优先权，其全部内容通过引用结合于此。


[0003]本专利技术涉及在用于分子诊断和数字病理学的显微切割期间改进组织可视化和数字图像捕获。

技术介绍

[0004]在病理学中，健康和患病细胞的细胞形态的高保真图像对于诊断目的和特定细胞亚群的分子分析是重要的。待成像、收集的和分析的细胞可从组织活检样品、哺乳动物或细菌细胞培养物或大量植物材料中获得，对于这些细胞，可以使用如激光捕获显微切割(“LCM”)的技术从样品中分离出选择细胞亚群以便进行进一步的分子分析。
[0005]LCM采用激光束或辐射源来加热热聚合物帽(该热聚合物帽被紧贴安装在载玻片上的组织的切片)、或者切割组织，或者采用探针来吸取组织的一部分。
[0006]用于组织分子分析的组织切片载玻片的可视化(包含激光捕获显微切割(LCM)或扫描MALDI)或探针/工具捕获自从这些组织取样方法最初专利技术以来一直是问题。载玻片和显微切割或细胞分析工具(如LCM帽)之间的界面产生空气折射率不匹配，该空气折射率不匹配使图像失真，从而导致变暗和分辨率及颜色的损失，阻止技术人员或病理学家完全可视化组织切片。由于组织和分子获取工具之间产生的气穴，组织的可视化受到阻碍。
[0007]过去，人们曾试图使用普通的病理流体(如油浸或封固剂)来可视化载玻片，然而，这些液体损坏并且胶合组织，从而阻止下游的分子分析。Caprette,D.R.(2012)指出“油浸观察的缺点是油必须保持接触并且油是粘性的。湿安装件必须非常牢固以便使用油。油浸透镜只能与油一起使用，油不能与干透镜(如您的400倍透镜)一起使用。必须使高放大倍数的透镜非常靠近样本才能聚焦，而焦平面非常浅，所以聚焦可能很困难。油使得利用干透镜看到的图像失真，所以一旦您将油放置在载玻片上，其在再次使用较高的干透镜之前必须被彻底清除。非油性透镜上的油将使观察失真，并且可能地损坏涂层”。其他人已经尝试添加水，然而组织的再水合作用阻止了激光提取组织。进一步，添加其他不相容的溶剂损坏显微切割探针。
[0008]因此，长期以来一直需要一种可以施加于显微切割探针和组织样品之间的界面以允许在不损害细胞捕获过程或下游分析的情况下改善视觉检查的解决方案。

技术实现思路

[0009]本申请涉及一种可视化溶液，该可视化溶液具有实现折射率匹配和UV、IR和可见光波长的渗透性的化学物质，该可视化溶液对于高保真数字图像捕获、视觉检查和高分辨率分子捕获、以及用于诊断分子剖析的分析提高了组织的清晰度。
[0010]在一个实施例中，可视化溶液是挥发性的，不会干扰下游分子分析。可视化溶液清除、脱水和保存组织诊断分子，而不干扰显微切割、数字成像和/或细胞捕获。
[0011]在一个实施例中，可视化溶液可以作为预包装物品出售，以便用于世界范围内现有的分子诊断实验室和病理部门。
[0012]在一个实施例中，本专利技术涉及通过可视化溶液提供的优化的图像捕获。
[0013]本公开涉及一种高通量LCM系统，该高通量LCM系统在没有对防止接近组织的盖玻片的现有要求的情况下快速数字化组织载玻片以便进行分子分析。这个数字化的图像组可以由技术人员或所开发的机器学习算法分析以标识数字扫描的组织载玻片的关键组织学感兴趣区域(region of interest，ROI)。在下游生物分析之后，软件将数据组合成显示在组织本身的数字图像上的报告。该报告包含用户预先选择的或者自动化系统已经选择的ROI内的生物数据。总的来说，具有所组合的可视化溶液的这种新工作流程将提高显微切割效率和用于组织的基因组剖析和蛋白质组剖析的所有类型的分子分析。
[0014].在一个实施例中，一种液体包含括a)有机组分；b)稳定化组分；和c)保存组分，其中所述有机组分、所述稳定化组分和所述保存组分是不同的组分，其中所述有机组分包含具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液；其中所述液体被配置为提供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。
[0015]在一个实施例中，所述液体包含所述有机组分，所述有机组分在约22℃的温度下具有约5kPa至约25kPa的蒸气压，其中所述折射率的下限为约1.3。
[0016]在一个实施例中，所述有机组分被配置为透射约90％的波长在约400nm至约800nm的范围内的入射光。
[0017]在一个实施例中，所述挥发性有机溶液至少包含短链醇、乙腈或它们的组合。
[0018]在一个实施例中，所述短链醇包含甲醇、乙醇和/或丙醇或它们的异构体。
[0019]在一个实施例中，所述稳定化组分包含吸湿性盐，其中所述稳定化组分被配置为从所述有机组分吸收水。
[0020]在一个实施例中，所述液体不溶解聚甲基丙烯酸甲酯聚合物和/或乙烯
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乙酸乙烯酯聚合物。
[0021]在一个实施例中，所述保存组分包含变性剂化学组分。
[0022]在一个实施例中，所述变性剂化学组分包含离液剂。
[0023]在一个实施例中，一种试剂盒包含有包含在容器内的a)有机组分；b)稳定化组分。
[0024]在一个实施例中，所述容器包含对经由所述有机组分的降解呈惰性的材料，其中所述有机组分和所述稳定化组分是不同的组分，其中所述有机组分包括具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液；其中所述试剂盒被配置为提供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。
[0025]在一个实施例中，所述试剂盒是挤压施加器的形式。
[0026]在一个实施例中，所述试剂盒还包含有包括离液剂的保存组分。
[0027]在一个实施例中，所述有机组分在约22℃的温度下具有约5kPa至约25kPa的蒸气压，其中所述折射率的下限为约1.3。
[0028]在一个实施例中，所述有机组分被配置为透射约90％的波长在约400nm至约800nm的范围内的入射光。
[0029]在一个实施例中，所述挥发性有机溶液至少包含短链醇、乙腈或它们的组合。
[0030]在一个实施例中，所述短链醇包含甲醇、乙醇和/或丙醇或它们的异构体。
[0031]在一个实施例中，所述稳定化组分包含吸湿性盐，其中所述稳定化组分被配置为从所述有机组分吸收水。
[0032]在一个实施例中，一种系统包含：a)可视化溶液，所述可视化溶液包括：a)有机组分；b)稳定化组分；和可选的c)保存组分，其中所述有机组分、所述稳定化组分和所述保存组分是不同的组分，其中所述有机组分包括具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液；和b)可视化仪器。
[0033]在一个实施例中，一种系统包含：a)可视化溶液，所述可视化溶液包括：a)有机组分；b)稳定化组分；和c)保存组分，其中所述有机组分、所述稳定化组分和所述保存组分是不同的组分，其中所述有机组分包含具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种液体，所述液体包括：a)有机组分；b)稳定化组分；和c)保存组分，其中所述有机组分、所述稳定化组分和所述保存组分是不同的组分，其中所述有机组分包括具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液；并且其中所述液体是提供1/1.5倍的透镜的分辨能力的可视化溶液。2.根据权利要求1所述的液体，其中所述机组分在约22℃的温度下具有约5kPa至约25kPa的蒸气压，并且其中所述折射率的下限为约1.3。3.根据权利要求1所述的液体，其中所述有机组分被配置为约90％的透射波长在约400nm至约800nm的范围内的入射光。4.根据权利要求1所述的液体，其中所述挥发性有机溶液包括至少一种短链醇、乙腈或它们的组合。5.根据权利要求4所述的液体，其中所述短链醇包括甲醇、乙醇和/或丙醇或它们的异构体。6.根据权利要求1所述的液体，其中所述稳定化组分包括吸湿性盐，并且其中所述稳定化组分被配置为从所述有机组分吸收水。7.根据权利要求1所述的液体，其中所述液体不溶解聚甲基丙烯酸甲酯聚合物和/或乙烯
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乙酸乙烯酯聚合物。8.根据权利要求1所述的液体，其中所述保存组分包括变性剂化学组分。9.根据权利要求8所述的液体，其中所述变性剂化学组分包括离液剂。10.一种试剂盒，所述试剂盒包括有包含在容器内的a)有机组分；和b)稳定化组分，所述容器包含对经由所述有机组分的降解呈惰性的材料，其中所述有机组分和所述稳定化组分是不同的组分，其中所述有机组分包括具有1.5或更低的折射率的挥发性有机溶液，并且其中所述试剂盒被配置为提供1/1.5倍的透镜分辨能力的可视化溶液。11.根据权利要求10所述的试剂盒，其中所述试剂盒是挤压施加器的形式。12.根据权利要求10所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包括有包括离液剂的保存组分。13.根据权利要求10所述的试剂盒，其中所述机组分在约22℃的温度下具有约5kPa至约25kPa的蒸气压，其中所述折射率的下限为约1.3。14.根据权利要求10所述的试剂盒，其中所述有机组分被配置为透射约90％的波长在约400nm至约800nm的范围内的入射光。15.根据权利要求13所述的试剂盒，其中所述挥发性有机溶液包括至少一种短链醇、乙腈或它们的组合。16.根据权利要求15所述的试剂盒，其中所述短链醇包括甲醇、乙醇和/或丙醇或它们的异构体。17.根据权利要求10所述的试剂盒，其中所述稳定化组分包括吸湿性盐，并...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰斯，
申请(专利权)人：乔治，
类型：发明
国别省市：