一种核酸电泳试验凝胶制造技术

本发明专利技术涉及一种核酸电泳试验凝胶，该核酸电泳试验凝胶包括琼脂胶液和丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺(Acr

【技术实现步骤摘要】
一种核酸电泳试验凝胶


[0001]本专利技术涉及核酸电泳的
，具体涉及一种核酸电泳试验凝胶。

技术介绍

[0002]琼脂糖主要由D
‑
半乳糖和3,6
‑
脱水
‑
L
‑
半乳糖相间结合构成的链状中性多糖；由于其硫酸根、丙酮酸等带电基团含量低，因此电内渗小，对蛋白质、碱性染料无吸附，可作为理想的电泳介质，通常用于核酸电泳试验。
[0003]琼脂糖相关产品主要用于医疗、科学研究以及生物医药领域，与人类健康密切相关。目前，我国琼脂糖生产成本高，产品质量低于进口产品，导致琼脂糖原料及其相关产品大多依赖进口，价格非常昂贵。因此，亟需研发可替代商品琼脂糖电泳介质的新产品。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种核酸电泳试验凝胶。本专利技术制得的核酸电泳试验凝胶，对凝胶电泳的DNA片段具有较好的分离分辨率。
[0005]有鉴于此，根据本专利技术的实施例，本专利技术提出了一种核酸电泳试验凝胶，其包括琼脂凝胶和质量分数0.25％
‑
2％的丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺Acr
‑
Bis溶液。
[0006]根据本专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶，通过琼脂凝胶与丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺(Acr
‑
Bis)的复配，达到增强琼脂形成的凝胶在核酸电泳时的分离分辨率，使得该核酸电泳试验凝胶性质类似于商品琼脂糖凝胶，在核酸电泳试验时，对凝胶电泳的DNA片段具有较好的分离分辨率。
[0007]另外，根据本专利技术上述实施例提出的一种核酸电泳试验凝胶，还可以具有如下附加的技术特征：
[0008]可选地，所述琼脂凝胶的制备为：称取1.50g琼脂条，按照料液比1:100w/v加入蒸馏水混匀，置于100℃下水浴5
‑
10min。
[0009]可选地，所述Acr
‑
Bis溶液的制备为：向30％的Acr
‑
Bis(29:1)中加入蒸馏水、缓冲液、0.1mL的10％过硫酸铵溶液和0.004mL的TEMED，混匀。
[0010]进一步地，所述缓冲液为含有0.025％
‑
0.2％ SDS的1.5M Tris base溶液，pH为8.0
‑
9.0。
[0011]可选地，所述琼脂胶液与所述Acr
‑
Bis溶液的比例为5:1
‑
40:1。
[0012]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0013]图1本专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的溶解温度；
[0014]图2为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的融化温度；
[0015]图3为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的凝固温度；
[0016]图4为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的凝胶强度；
[0017]图5为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的透明度；
[0018]图6为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的粘度；
[0019]图7为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的白度；
[0020]图8为专利技术实施例的核酸电泳试验凝胶、商品琼脂和商品琼脂糖的凝胶电泳图。
具体实施方式
[0021]以下通过特定的具体实例说明本专利技术的技术方案。应理解，本专利技术提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
的情况下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。
[0022]为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本专利技术的示例性实施例。虽然显示了本专利技术的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。
[0023]本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。
[0024]下面参考具体实施例，对本专利技术进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本专利技术：
[0025]实施例1
[0026]琼脂凝胶配置：称取1.50g琼脂条，按照料液比1:100(w/v)加入蒸馏水混匀，将物料倒进水浴锅加热，用玻璃棒搅拌均匀，设置水浴温度100℃，计时5min，计时结束后得到溶解均匀的琼脂凝胶。
[0027]Acr
‑
Bis溶液的配置：用移液枪量取4.1mL蒸馏水加入烧杯，再量取3.3mL30％Acr
‑
Bis(29:1)加入烧杯，再量取2.5mL缓冲液(1.5M Tris base，0.1％ SDS，用HCL调节pH至8.8)加入烧杯，再加入0.1mL10％的过硫酸铵溶液，最后加入0.004mL TEMED，然后将溶液混匀。
[0028]实施例2
[0029]向实施例1获得的琼脂凝胶(16mL)中按比例加入Acr
‑
Bis溶液4mL，防止Acr
‑
Bis溶液凝固，得到核酸电泳试验凝胶。
[0030]将上述核酸电泳试验凝胶(改性琼脂凝胶)和未经处理的商业琼脂粉((生产厂商：福建燕歌海洋生物科技有限公司)和商业琼脂糖(生产厂商：上海贝晶生物技术有限公司)作为对比，分别测定上述核酸电泳试验凝胶、商品琼脂粉、商品琼脂糖的核酸电泳分辨率以及理化性质(凝胶强度、浊度、黏度)。
[0031]溶解温度：将0.1g的商品琼脂粉、商品琼脂糖、核酸电泳试验凝胶样品分别加入不同的试管中，添加10mL蒸馏水后塞上试管塞，置于30℃水浴锅中，以1℃/15min的速度升温，观察样品的溶解情况，当试管内溶液澄清透明且无分层现象时的温度即为琼脂的溶解温
度。
[0032]结果如图1所示，商品琼脂糖、商品琼脂粉和核酸电泳试验凝胶的溶解温度分别为80.10℃、88.64℃和89.79℃。
[0033]融化温度：配制质量分数为1.5％的琼脂溶液，加热溶解后取15mL倒入内径22mm的试管中，插入温度计，使其水银球在液面以下，液面水平放置凝固。次日，在凝胶表面放1粒直径3mm的不锈钢珠，将试管放在水浴中加热，使凝胶温度渐渐上升，观察钢珠突然落至试管底部时的温度即为融化温度。
[0034]结果如图2所示，商品琼脂糖、商品琼脂粉和核酸电泳试验凝胶的融化温本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸电泳试验凝胶，其特征在于，包括琼脂凝胶和质量分数0.25％
‑
2％的丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺Acr
‑
Bis溶液进行复配。2.如权利要求1所述的一种核酸电泳试验凝胶，其特征在于：所述琼脂凝胶的制备为：称取1.50g琼脂，按照料液比1:100w/v加入蒸馏水混匀，置于100℃下水浴5
‑
10min。3.如权利要求1所述的一种核酸电泳试验凝胶，其特征在于：所述Acr
‑
Bis溶液的制备为：向30％的Acr

【专利技术属性】
技术研发人员：姜泽东，王涛，倪辉，杨远帆，郑明静，洪涛，朱艳冰，伍菱，李利君，杜希萍，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：