一种HP感染快速诊断试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种人群中幽门螺旋杆菌感染快速诊断的试剂盒及其检测方法。其特征在于检测体系试剂的配方包括基本反应试剂尿素、酚酞及树脂，增敏试剂氯化镍，及其一应物质的用量和浓度。其中显色载体吸水树脂及增效试剂氯化镍的创新应用，提升了检测效率和检测灵敏度，使得该试剂盒可以完成涵盖健康人群到轻中重度感染人群的一体化检测。独特的试剂配方及其为之设计的检测标准比色卡和检测装置构成本发明专利技术的核心。该试剂盒和检测方法，以唾液作为检测样本，样品采集方便，无侵入性创伤及高难配合要求，自测意愿度高，应用前景广阔。应用前景广阔。应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
一种HP感染快速诊断试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及疾病检测领域，具体涉及一种人群中幽门螺旋杆菌感染快速诊断的试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]幽门螺旋杆菌（Helicobacter Pylori, HP）是存在于胃及十二指肠球部的一种螺旋状细菌，也是一种传染极强的致病细菌。感染路径为人
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人通过口
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口、粪
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口、亲密接触以及医源性检查等。
[0003]被HP感染后的人群会引发口臭、胃炎、胃癌及消化性溃疡。随着研究的深入，发现HP感染不仅与胃肠道疾病有关，同样也会引起心脑血管疾病、肝胆疾病、慢性支气管炎和缺铁性贫血等其他系统疾病，甚至会诱发肿瘤。儿童感染HP还会导致食物的消化、吸收功能欠佳，从而生长发育落后。
[0004]可见HP感染诱发疾病及继发的疾病对全民健康的影响是整体性的，因此基于健康人群包括儿童进行的HP感染快速筛查，开展二级预防，降低感染引发的和继发的疾病发生率和节约社会医疗资源都尤为重要。
[0005]传统的HP检测方法包括胃黏膜组织切片染色镜检；HP培养及HP基因检测方法；13C或14C尿素呼气试验（UBT）等。这些方法对大面积人群筛查存在一定的局限性，譬如有浸入性创伤让人生畏，或者检测耗时需要3
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4天，抑或操作过程复杂要患者较高的配合度。
[0006]一个便捷快速低成本易普及的HP感染试剂盒及检测新方法，是诊断和预防HP感染的关键。

技术实现思路

[0007]本专利技术利用胃液和口腔唾液中HP的同源性，以唾液作为检测样本，通过测量幽门螺旋杆菌重要的定殖因子和抗原尿素酶实现对HP的间接测量。在检测体系试剂配方中通过添加独特的显色载体缩短显色时间；通过添加增敏剂，大幅提升测量的灵敏度，从而实现了能涵盖从健康人群到轻、中、重度感染患者的一体化检测方案。该检测方法样品采集方便，无需培养、即采即测，无侵入性创伤及高难配合要求；检测操作简单易学，易于实现自助检测，适于大面积人群HP感染的筛查。
[0008]本专利技术提供该诊断试剂盒的试剂配方，检测方法，检测装置和用于判断检测结果的标准比色卡。
[0009] 检测体系试剂组成包括预先混合在反应检测管中的尿素、酚酞及树脂，其含量为尿素0.035 g，1% 的酚酞/乙醇溶液50μl，吸水树脂0.0110 g ；及预装在增敏试剂管中5.0 ml氯化镍溶液，其浓度为5.0
×
10
‑6mol/L；在检测开始时，将增敏试剂管中溶液倒入反应检测管中，静置10分钟。
[0010] 采集样品时，将唾液采集漏斗旋在已经倒空的增敏试剂管上方，组成唾液采集器。通过唾液采集器，收集大于1.0 ml被检测者的唾液样品。
[0011]用唾液计量管移取1.0 ml唾液清液加入到反应检测管中，盖上管帽，置于检测观察架上，开始记时和观察。
[0012]通过观察反应检测管中溶液红色出现的时间来判断是否感染；通过反应基本结束后检测反应管中溶液的颜色深浅来判断感染的程度。如唾液样品加入反应检测管3小时内看到有颜色出现，则初步判断该被检测者感染HP，没有颜色则初步判断为未感染；待该检测样品静置6小时后，溶液颜色趋于稳定，将其与试剂盒中所附标准比色卡上颜色比对，基于颜色的深浅来判断其HP感染的程度。
[0013]在实际应用中，会很容易根据有否颜色出现判断检测者是否感染，并清晰描述其感染程度。本专利技术试剂盒内附检测标准比色卡，根据颜色深浅其HP感染程度分级为重度（+++）、中度（++）、感染（+）、检出、未检出（
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）；对应提示其唾液中尿素酶活度分别为大于1.00U/mL （重度感染） ，0.50U/mL（中度感染） , 0.10U/mL（感染） , 0.05U/m L（检出）, 0.01U/mL （未检出），共5个层级。
[0014]本专利技术与现有技术相比，具有显著的优点和效果。本专利技术试剂配方加入特征吸水树脂载体，显色更清晰、快速，当日采集当天出结果，无需过夜，提高了检测效率；特征增敏剂协同吸水树脂的作用，体系灵敏度增加，方法检测限降低到健康人唾液中尿素酶水平以下，利用一个检测标准比色卡，就可以完成涵盖健康人群到轻中重度感染人群的一体化检测，实用性强；本专利技术利用胃液和口腔唾液中HP的同源性，以唾液作为检测样本，样品采集方便，无侵入性创伤及高难配合要求，自测意愿度高，应用前景广阔。
附图说明
[0015]附图说明该试剂盒及其检测方法，使对本专利技术有进一步的理解，构成本申请的一部分，并不构成对本专利技术实施例的限定。在附图中：图1 为本专利技术中反应检测管示意图（21）内置检测体系试剂配方（11）；图2 为本专利技术中增敏试剂管示意图（22）内置增敏试剂溶液（12）；图3 为本专利技术中唾液计量管示意图（31）；图4 为本专利技术中唾液收集漏斗及唾液采集器示意图（32）；图5 为本专利技术中检测观察架及整体检测装置示意图（33）；图6 为本专利技术中检测标准比色卡示意图（41
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43）。
[0016]图中附图标记说明如下：1 检测体系试剂的配方；11 反应体系基本试剂 ；12增敏试剂；2 反应检测器；21反应检测管；22增敏试剂管；3 唾液采集装置；31 唾液计量管；32 唾液收集漏斗及唾液采集器；33 检测观察架；4 检测标准比色卡。
具体实施例
[0017]随机采集某高校大二男女大学生自愿者的唾液样本，样本人群唾液采集者应满足以下几点：（1）避免喝碱性水或吃酸性食物；（2）检测前几周内未服用过抗菌素抑制幽门螺旋杆菌；（3）检测前1小时避免进食；（4）了解检测过程并自愿参与。
[0018]本实例共采集40份唾液样品，用该专利技术试剂盒实施检测，3小时判断感染，6小时用标准比色卡比对，报告结果。其中20份出现明显的颜色，判定为感染；放置6小时，通过与标准卡比对判断出这20份唾液样品中有7份是重度感染，4份是中度感染，3份是感染，6份是检出；对应的尿素酶活性分别处于≥1.00 U/ml、0.50 U/ml、0.10 U/ml、0.05 U/ml。总体的感染率为50%，与流行病学报告HP成年人感染率一致，说明该法检测结果可靠。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种幽门螺旋杆菌（Helicobacter Pylori, HP）快速诊断试剂盒及其检测方法。其特征在于检测体系试剂的配方（1），反应检测器（2）及唾液采集装置（3）和检测标准比色卡（4）。2.根据权利要求1所述，其特征在于检测体系试剂配方，该配方包括以下成分： 尿素、酚酞及树脂（11），其含量为尿素0.035g，1%酚酞/乙醇溶液50μl，吸水树脂0.0110 g ；浓度为5.0
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6 mol/L的氯化镍水溶液5ml（12） 。3. 根据权利要求1所述，其特征在于反应检测器，包括：反应检测管（21），容量10.0ml , 尺寸17
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84 mm，无色透明塑料材质，带有管帽。内置尿素、酚酞及树脂（11） ；增敏试剂管（22），容量5.0 ml , 尺寸12
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75 mm，无色透明塑料材质，带有管帽。内装反应增敏试剂，氯化镍水溶液（12）。检测时，将增敏剂溶液倒入反应检测管中，静置10分钟，开始加入采集到的唾液样品。4. 根据权利要求1所述，其特征在于唾液采集检测装置，包...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军锋，庞兴萍，
申请(专利权)人：陕西学前师范学院，
类型：发明
国别省市：