一种液基脱落细胞保存液、试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种液基脱落细胞保存液、试剂盒及应用，所述脱落细胞保存液包括：对羟基苯乙酮、N

【技术实现步骤摘要】
一种液基脱落细胞保存液、试剂盒及应用


[0001]本专利技术属于医学
，涉及一种液基脱落细胞保存液、试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]脱落细胞是指从自然管腔器官内表面脱落更新的粘膜上皮细胞，在临床中具有诊断价值。细胞未脱落时具有固有的细胞形态、结构和生物学活性，当脱离原来的生存环境，细胞的形态、生理功能等发生改变，常用的保存方法如冷冻保存，对细胞存在损伤危害，影响诊断的准确性。
[0003]液基薄层细胞学检测技术（Thinprep Cytology Test，TCT）是目前广泛使用的技术，关键步骤为标本取出后立即放入细胞保存液中，维持细胞原有形态并去除非诊断杂质，再制成薄层涂片。
[0004]但是，现有的脱落细胞保存液存在着影响细胞形态和细胞蛋白、杂质处理不彻底、价格昂贵等问题，例如，4%的多聚甲醛可用于细胞的固定，但对环境温度要求高，保存时间短，一般超过48小时就会影响细胞形态和细胞蛋白，因此，有必要开发保存效果佳、保存时间长的脱落细胞保存液。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足及实际需求，本专利技术提供了一种液基脱落细胞保存液、试剂盒及应用，所述脱落细胞保存液在维持脱落细胞完整形态的同时可以快速去除血细胞和黏液，并长时间保持细胞结构和固定细胞蛋白质，脱落细胞保存液和粘附剂等试剂相互配合，使脱落细胞涂片的制备方法操作简单、高效、成功率高。
[0006]为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了一种液基脱落细胞保存液，所述脱落细胞保存液包括：对羟基苯乙酮、N
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乙基乙醇胺、多聚甲醛、半胱氨酸、γ
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氨基丁酸、NaCl、KCl、柠檬酸、柠檬酸钠和水。
[0007]本专利技术中，对羟基苯乙酮和N
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乙基乙醇胺发挥协同作用，一方面与多聚甲醛配合、缓慢而充分地固定脱落细胞膜结构，另一方面避免多聚甲醛醛化细胞表面蛋白而形成细胞聚集，使脱落细胞充分分散，方便制备薄层的细胞制片；半胱氨酸和γ
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氨基丁酸具有提高脱落细胞膜通透性、膨胀破裂红细胞、降解黏液的协同作用，不仅方便对羟基苯乙酮、N
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乙基乙醇胺和多聚甲醛固定脱落细胞骨架，而且与NaCl和KCl配合有效去除杂质成分，确保制备形成背景清晰的细胞薄片，提高检测的准确性；同时，柠檬酸和柠檬酸钠相互配合作为脱落细胞保存液的缓冲液，使脱落细胞保存液的pH维持在较稳定的水平。
[0008]本专利技术的脱落细胞保存液的各组分发挥协同配合作用，提供了一种长期保存脱落细胞的适宜环境，确保脱落细胞可以长时间保存在脱落细胞保存液中而不发生细胞皱缩/膨胀和蛋白质变化，有利于后续开展细胞学检测试验。
[0009]优选地，所述对羟基苯乙酮在所述脱落细胞保存液中的终浓度为10~20 mM，例如
可以是10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、16mM、17mM、18mM、19mM或20mM，优选为13~16mM。
[0010]优选地，所述N
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乙基乙醇胺在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM，例如可以是1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM或10mM，优选为2~4mM。
[0011]优选地，所述多聚甲醛在所述脱落细胞保存液中的终浓度为10~20mM，例如可以是10mM、10.5mM、11mM、11.5mM、12mM、12.5mM、13mM、13.5mM、14mM、14.5mM、15mM、15.5mM、16mM、16.5mM、17mM、17.5mM、18mM、18.5mM、19mM、19.5mM或20mM，优选为14~17.5mM。
[0012]本专利技术中，脱落细胞保存液中对羟基苯乙酮、N
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乙基乙醇胺和多聚甲醛在低浓度配比下发挥协同配合作用，实现了较常规脱落细胞保存液更优的细胞固定作用，有效避免了现有市售脱落细胞保存液中高浓度醇类造成的杂质处理不彻底、保存液稳定性差、假阴性检测结果等问题。
[0013]优选地，所述半胱氨酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~5mM，例如可以是1mM、2mM、3mM、4mM或5mM，优选为2~4mM。
[0014]优选地，所述γ
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氨基丁酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM，例如可以是1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM或10mM，优选为5~9mM。
[0015]优选地，所述NaCl在所述脱落细胞保存液中的终浓度为50~100mM，例如可以是50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM或100mM，优选为60~70mM。
[0016]优选地，所述KCl在所述脱落细胞保存液中的终浓度为20~30mM，例如可以是20mM、21mM、22mM、23mM、24mM、25mM、26mM、27mM、28mM、29mM或30mM，优选为20~25mM。
[0017]本专利技术中，半胱氨酸、γ
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氨基丁酸与NaCl和KCl共同配合，实现了在不影响脱落细胞结构完整性的同时、膨胀破裂红细胞的作用。
[0018]优选地，所述柠檬酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM，例如可以是1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM或10mM，优选为2~4mM。
[0019]优选地，所述柠檬酸钠在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~20mM，例如可以是1mM、1.5mM、2mM、2.5mM、3mM、3.5mM、4mM、4.5mM、5mM、5.5mM、6mM、6.5mM、7mM、7.5mM、8mM、8.5mM、9mM、9.5mM、10mM、10.5mM、11mM、11.5mM、12mM、12.5mM、13mM、13.5mM、14mM、14.5mM、15mM、15.5mM、16mM、16.5mM、17mM、17.5mM、18mM、18.5mM、19mM、19.5mM或20mM，优选为2.5~10mM。
[0020]本专利技术中，对羟基苯乙酮、N
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乙基乙醇胺、多聚甲醛、半胱氨酸、γ
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氨基丁酸、NaCl、KCl、柠檬酸、柠檬酸钠和水在合理的配比下充分混合形成脱落细胞保存液，具有长时间保存脱落细胞、保持细胞形态结构和固定细胞蛋白质、有效去除血细胞和黏液杂质的效果，对于制备薄层脱落细胞涂片、确保细胞检测的准确性具有有益作用。
[0021]优选地，所述脱落细胞保存液由以下物质按终浓度配制形成：对羟基苯乙酮10~20mMN
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乙基乙醇胺1~10mM多聚甲醛10~20mM
半胱氨酸1~5mMγ
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氨基丁酸1~10mMNaCl50~100mMKCl20~30mM柠檬酸1~10mM柠檬酸钠1~20mM余量为水。
[0022]优选地，所述脱落细胞保存液由以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种液基脱落细胞保存液，其特征在于，所述脱落细胞保存液包括：对羟基苯乙酮、N
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乙基乙醇胺、多聚甲醛、半胱氨酸、γ
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氨基丁酸、NaCl、KCl、柠檬酸、柠檬酸钠和水；所述对羟基苯乙酮在所述脱落细胞保存液中的终浓度为10~20mM；所述N
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乙基乙醇胺在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM；所述多聚甲醛在所述脱落细胞保存液中的终浓度为10~20mM；所述半胱氨酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~5mM；所述γ
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氨基丁酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM。2.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述对羟基苯乙酮在所述脱落细胞保存液中的终浓度为13~16mM。3.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述N
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乙基乙醇胺在所述脱落细胞保存液中的终浓度为2~4mM。4.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述多聚甲醛在所述脱落细胞保存液中的终浓度为14~17.5mM。5.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述半胱氨酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为2~4mM。6.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述γ
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氨基丁酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为5~9mM。7.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述NaCl在所述脱落细胞保存液中的终浓度为50~100mM。8.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述KCl在所述脱落细胞保存液中的终浓度为20~30mM。9.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述柠檬酸在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~10mM。10.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述柠檬酸钠在所述脱落细胞保存液中的终浓度为1~20mM。11.根据权利要求1所述的脱落细胞保存液，其特征在于，所述脱落细胞保存液由以下物质按终浓度配制形成：对羟基苯乙酮10~20mMN
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乙基乙醇胺1~10mM多聚甲醛10~20mM半胱氨酸1~5mMγ
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氨基丁酸1~10mMNaCl50~100mMKCl20~30...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄小军，朱峻，
申请(专利权)人：深圳市森盈智能科技有限公司，
类型：发明
国别省市：