一种液体发酵培养基及其在樟芝发酵培养上的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种液体发酵培养基及其在樟芝发酵培养上的应用，该液体发酵培养基使用去离子水配制，其组成为：太子参粉6

【技术实现步骤摘要】
一种液体发酵培养基及其在樟芝发酵培养上的应用


[0001]本专利技术涉及药用真菌发酵领域，具体涉及一种液体发酵培养基及其在樟芝发酵培养上的应用。

技术介绍

[0002]樟芝Antrodia camphorata是我国台湾特有的珍稀药用真菌，自然界中的分布极其稀罕，专一性寄生于一种名为牛樟树Cinnamomum kanehirai的植物，生长在牛樟树的中空腐朽内壁。樟芝含有丰富的活性成分，如多糖、三萜类化合物、氨基酸、核苷类化合物、甾醇、Antrodin类化物和Antroquinonol类化合物等，具有抗癌、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗炎症、保肝护肝等广泛的生理活性，在治疗癌症、肝炎、肝硬化、腹泻、腹痛和皮肤瘙痒等疾病中得到应用，以及用于解毒、解酒等。但目前樟芝人工栽培十分困难。
[0003]樟芝对宿主苟刻，专一性强，以及在自然界中分布稀罕，生长速度缓慢，使得子实体价格极其昂贵，市场价格超过15000美元/kg，难以满足医疗、临床和保健的需求。目前，樟芝的生产方法有4种模式：固态发酵、液体发酵、椴木栽培和皿式培养，尤以液体深层发酵技术受到更多关注。针对樟芝液体深层发酵，为提高菌丝体和活性代谢产物产量，研究人员在培养基工程、发酵条件优化、发酵工艺开发等方面开展了较系统的研究。与此同时，以谷物为发酵基质的樟芝固态发酵也有一定研究。液体发酵及固态发酵产品可作为樟芝子实体的替代产品，商业开发前景可期。
[0004]太子参为石竹科孩儿参属多年生草本药用植物，是中国地道中药材，以块根入药，味甘、性平，益气健脾、生津润肺，老少皆宜服用，是可用于保健食品的中药材。其药用成分主要是太子参多糖类、皂苷类、氨基酸类、环肽类等物质，具有降血糖血脂、抗应激、抗氧化、增强免疫、缓解疲劳等功效。太子参是多种中药复方的重要组成成分，近年来，太子参在保健及养生产品开发等大健康产业发展中的潜力受到重视。
[0005]目前，太子参主要是人工栽培，主产于福建、贵州、江苏、山东等省，太子参生长周期仅为9
‑
10个月，生产周期短，产量较高，使太子参中药材往往供过于求，价格长期处于低位。因此，研究太子参新的用途，拓展其应用范围，延长太子参产业链，至关重要。
[0006]因此，基于上述的问题，我们通过试验研究，专利技术了一种液体发酵培养基及应用。

技术实现思路

[0007]本专利技术要解决的技术问题是提供一种液体发酵培养基及其在樟芝发酵培养上的应用，采用该液体发酵培养基生产樟芝菌丝体，能够有效促进菌丝生长、促活性成分合成以及促无性孢子形成，有效提高了樟芝菌丝和活性成分产量。
[0008]为了解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：
[0009]第一个方面，本专利技术提供一种液体发酵培养基，所述液体发酵培养基的终浓度组成为：太子参6
‑
10g/L，葡萄糖10
‑
17g/L，酵母粉2
‑
4g/L，蛋白胨3.5
‑
6g/L，KH2PO
4 0.8
‑
1.5g/L，加去离子水定容到1L。
[0010]进一步地，所述液体发酵培养基的终浓度组成为：太子参6g/L，葡萄糖10g/L，酵母粉4g/L，蛋白胨6g/L，KH2PO
4 1.5g/L。
[0011]进一步地，所述太子参采用60目过筛的粉。
[0012]第二个方面，本专利技术提供上述第一个方面所述的液体发酵培养基用于樟芝的发酵培养。
[0013]第三个方面，本专利技术提供一种樟芝发酵培养方法，是采用上述第一个方面所述的液体发酵培养基，该方法包括以下步骤：
[0014]S1：使用改良的PDA培养基配制试管斜面固体培养基，无菌接种，进行樟芝菌种活化培养；
[0015]S2：在无菌条件下从活化的长满孢子的樟芝斜面菌种切取琼脂培养物，转入PDB培养基中，温度25℃，摇床转速150rev/min，培养时间4d，得到樟芝液体种子；
[0016]S3：在所述的液体发酵培养基中接入樟芝液体种子，进行摇瓶发酵培养，培养温度25℃
‑
30℃，转速150
‑
180rev/min，培养时间4
‑
6d。
[0017]进一步地，所述改良的PDA培养基的组分为：
[0018]马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉5g/L，琼脂18g/L，加蒸馏水定容到1L。
[0019]进一步地，步骤S2中在无菌条件下从活化的长满孢子的樟芝斜面菌种切取2cm琼脂培养物，转入100mL PDB培养基中。
[0020]进一步地，步骤S3中所述液体发酵培养基与樟芝液体种子的体积比为50
‑
100ml∶5
‑
10ml。
[0021]优选地，步骤S3中所述液体发酵培养基与樟芝液体种子的体积比为100∶10。
[0022]本专利技术的有益效果是：
[0023]本专利技术以中药材太子参粉作为液体发酵培养基的主要成分，配制药性培养基，药用真菌樟芝为发酵菌株，配合本专利技术的发酵培养方法，使樟芝深层发酵的过程中能够有效促进菌丝生长，增加菌丝体生物量，促活性成分合成以及促无性孢子形成，有效提高了樟芝菌丝体、活性成分和无性孢子的产量，本专利技术的液体发酵培养基及发酵培养方法对樟芝菌丝生长具有较大影响，利用该优化培养基发酵，生物量达到4.72g/L。
具体实施方式
[0024]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0025]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0026]实施例1
[0027]1材料与方法
[0028]1.1材料
[0029]1.1.1菌种
[0030]樟芝Antrodia camphorata由福建农林大学菌物研究中心提供，本实验室保藏。
[0031]1.1.2原材料和生化试剂
[0032]太子参购自福建省宁德市柘荣县太子参市场，由福建省特色药用植物工程技术研究中心提供，中药粉碎机粉碎，过60目筛。酵母粉和蛋白胨为广东环凯微生物科技有限公司产品。熊果酸、高氯酸、苯酚等化学试剂购自福州贝尔曼生物科技有限公司。
[0033]1.1.3培养基
[0034]改良的PDA培养基：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉5g/L，琼脂18g/L，加蒸馏水定容到1L，pH自然。
[0035]PDB培养基：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，加蒸馏水定容到1L。
[0036]上述培养基灭菌条件均为121℃灭菌20min。
[0037]1.2方法
[0038]1.2.1液体种子制备
[0039]无菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种液体发酵培养基，其特征在于，所述液体发酵培养基的终浓度组成为：太子参6
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10g/L，葡萄糖10
‑
17g/L，酵母粉2
‑
4g/L，蛋白胨3.5
‑
6g/L，KH2PO
4 0.8
‑
1.5g/L，加去离子水定容到1L。2.根据权利要求1所述的一种液体发酵培养基，其特征在于，所述液体发酵培养基的终浓度组成为：太子参6g/L，葡萄糖10g/L，酵母粉4g/L，蛋白胨6g/L，KH2PO
4 1.5g/L。3.根据权利要求1或2所述的一种液体发酵培养基，其特征在于：所述太子参采用60目过筛的粉。4.权利要求1
‑
3任意一项所述的液体发酵培养基用于樟芝的发酵培养。5.一种樟芝发酵培养方法，其特征在于，是采用权利要求1
‑
3任意一项所述的液体发酵培养基，该方法包括以下步骤：S1：使用改良的PDA培养基配制试管斜面固体培养基，无菌接种，进行樟芝菌种活化培养；S2：在无菌条件下从活化的长满孢子的樟芝斜面菌种切取...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘盛荣，赵生月，吴小环，倪建成，阮少江，叶祖云，
申请(专利权)人：宁德师范学院，
类型：发明
国别省市：