【技术实现步骤摘要】
一种具有多种优良性状的甘蓝型油菜的育种方法和载体
[0001]本专利技术属于基因工程定向育种
,涉及甘蓝型油菜的定向育种,具体涉及一种具有多种优良性状的甘蓝型油菜的育种方法和载体。
技术介绍
[0002]甘蓝型油菜作为异源四倍体作物,其基因组比较复杂,同源拷贝较多,不同的同源拷贝之间往往存在基因冗余现油菜是我国最重要的油料作物。油菜叶片是重要的营养器官,通过光合作用和呼吸作用提供油菜生长发育所需要的能量。此外,叶形态还是油菜形态建成的重要组成部分。相较于全缘叶,锯齿叶和裂叶展现出抗旱、耐寒、耐高温、更高的光能利用效率、利于密植等优良特性。因此,裂叶是油菜品种选育的重要指标之一。种子是油菜最重要的产量器官和繁殖器官。种子的萌发时机决定着油菜在何时、何种环境下开启新的生命周期,是农耕生产的基础。由于自然因素和不合理的耕作、栽培等人为因素,我国北方地区土壤盐渍程度逐渐恶化,仅西部陕、甘、宁、青、蒙、新6省(区)盐渍土地面积占全国盐渍土地面积的69.03%。近年来,随着冬油菜不断向高纬度、高海拔地区北移和西扩,我国北方地区油菜 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种甘蓝型油菜的育种方法,其特征在于,该方法通过提高BnaC06.WIP2基因在甘蓝型油菜中的表达量,获得具有高叶片开裂度和高耐盐性两种性状的甘蓝型油菜。2.如权利要求1所述的甘蓝型油菜的育种方法,其特征在于,所述的提高BnaC06.WIP2基因在甘蓝型油菜中的表达量的方式为:将过量表达载体转化进甘蓝型油菜中;所述的过量表达载体的命名为35S:BnaC06.WIP2
‑
6HA过量表达载体,其核苷酸序列如核苷酸或氨基酸序列表中的sequence ID Number 1所示。3.如权利要求1所述的甘蓝型油菜的育种方法,其特征在于,提高BnaC06.WIP2基因在甘蓝型油菜中的表达量后,能够下调植物叶裂形成负调控基因的转录水平;所述的叶裂形成负调控基因包括:BnaA01.TCP4基因、BnaA03.TCP4基因、BnaC03.TCP4基因、BnaA05.BOP1基因和BnaC02.AS2基因。4.如权利要求1所述的甘蓝型油菜的育种方法,其特征在于,将BnaC06.WIP2基因在甘蓝型油菜中进行过表达后,处于种子萌发期的甘蓝型油菜能够耐受120mM的氯化钠。5.如权利要求1所述的甘蓝型油菜的育种方法,其特征在于,该方法具体包括如下步骤:步骤一,甘蓝型油菜BnaC06.WIP2基因的克隆:步骤1.1,BnaC06.WIP2基因的特异性引物和验证引物设计:所述的特异性引物及其核苷酸序列为:BnaC06.WIP2
‑
6HA
‑
Kpn I
‑
F:5
’‑
tctagaggatccccgggtaccatgactgatcctcattccaat
‑3’
;BnaC06.WIP2
‑
6HA
‑
Spe I
‑
R:5
’‑
gtatgggtaactagaactagttttggaccgccttgactcatg
‑3’
;所述的验证引物及其核苷酸序列为:5
’‑
gtcactttattgtgaagatagtgg
‑3’
;步骤1.2,RNA提取与cDNA合成;步骤1.3,BnaC06.WIP2基因的克隆;步骤二,过量表达载体的构建:步骤2.1,连接目的基因片段与线性载体:将过表达载体p1300
‑
35S
‑
6HA和步骤1.3获得的BnaC06.WIP2基因片段进行过夜酶切并纯化回收,然后将纯化后的基因片段与载体进行连接,获得连接产物;步骤2.2,连接产物的转化:将步骤2.1获得的连接产物转化进感受态细胞中,然后将含有连接产物的感受态细胞涂布于筛选培养基平板上进行培养;步骤2.3,单克隆筛选和鉴定:步骤2.4,获得35S:BnaC06.WIP2
‑
6HA过量表达载体...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈明训,何双呈,刘子金,郭媛,赵宇,宋波,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。