用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养基、培养体系制造技术

一种用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养基、培养体系。培养基包括基础培养基、脂质、全转铁蛋白和红细胞生成素，其中上述培养基不含血清或血浆。优选地，上述培养基由HPLM、10μg/mL低密度脂蛋白或2.5μM胆固醇或5％脂质补充剂、500μg/mL全转铁蛋白、3U/mL红细胞生成素组成。本申请还提供了使用上述培养基在体外制备成熟红细胞的方法。体外制备成熟红细胞的方法。体外制备成熟红细胞的方法。

【技术实现步骤摘要】
用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养基、培养体系


[0001]本专利技术涉及细胞生物学领域，更具体地，本专利技术涉及一种用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养基、培养体系，其无需添加人血浆或血清，并且培养基成分明确。
技术背景
[0002]红细胞(Red Blood Cells，RBCs)是人体血液中数量最多的一类细胞，也是氧气运输的主要媒介。红细胞输注在手术、贫血、大规模创伤和癌症治疗中发挥了重要作用。然而，全球血液供应严重短缺，分布不均衡，全球约有总计1亿个单位的血液制品(每单位血制品约含2
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个红细胞)的需求缺口。然而，随着体内红细胞生成相关研究的突破及体外红细胞培养制备技术的发展，有望解决血源紧缺问题。
[0003]人成熟红细胞的体外制备方法主要分为两个阶段：成红细胞(erythroblasts)扩增阶段和终末分化成熟脱核阶段。成红细胞扩增阶段是脐带血、骨髓、外周血等不同来源的成红细胞在培养体系下大量扩增，而终末分化成熟阶段主要是指成红细胞在终末分化培养诱导条件下逐渐成熟脱核成为网本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养基，包括基础培养基、脂质、全转铁蛋白和红细胞生成素，其中所述脱核阶段培养基不含血清或血浆。2.根据权利要求1所述的脱核阶段培养基，其特征在于，所述基础培养基选自HPLM、IMDM、SFEM、DMEM或RPMI 1640；优选地，所述脂质选自浓度为2～100μg/mL、优选为4～20vg/mL、更优选为10μg/mL的低密度脂蛋白，浓度为0.5～20μM、优选为2.5μM的胆固醇，或者浓度为1％～20％、优选为5％的脂质补充剂；其中，在所述脂质选自胆固醇或者脂质补充剂的情况下，所述脱核阶段培养基还包括浓度为0.01～1mg/mL，优选为0.1mg/mL的甲基
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环糊精。3.根据权利要求1或2所述的脱核阶段培养基，其特征在于，所述全转铁蛋白的浓度为50～1000μg/mL，优选500μg/mL；优选地，所述红细胞生成素的浓度为1～10U/mL，优选3U/mL。4.一种用于诱导成红细胞终末分化的脱核阶段培养体系，包括：第一阶段培养基，包括基础培养基、脂质、全转铁蛋白和红细胞生成素，其中所述第一阶段培养基不含血清或血浆；第二阶段培养基，包括所述基础培养基、所述脂质和所述全转铁蛋白，其中所述第二阶段培养基不含血清或血浆；以及第三阶段培养基，包括所述基础培养基，其中所述第三阶段培养基不含血清或血浆；其中，所述第一阶段培养基、第二阶段培养基和第三阶段培养基适用于在所述成红细胞终末分化培养的不同时期使用。5.根据权利要求4所述的脱核阶段培养体系，其特征在于，所述基础培养基选自HPLM、IMDM、SFEM、DMEM或RPMI 1640；优选地，所述脂质选自浓度为2～100μg/mL、优选为10μg/mL的低密度脂蛋白、浓度为0.5～20μM、优选为2.5μM的胆固醇，或者浓度为1％～20％、优选为5％的脂质...

【专利技术属性】
技术研发人员：程临钊，刘森泉，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：