异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，属于药剂技术领域。对比现有的天然中药对Marc

【技术实现步骤摘要】
异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用


[0001]本专利技术属于药剂
，具体涉及异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用。

技术介绍

[0002]猪繁殖与呼吸综合征，简称PRRS，别名猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种猪传染病，猪是PRRSV唯一已知的天然宿主。20多年来，猪繁殖和呼吸综合征一直是世界范围内最具经济意义的猪疾病之一。据有关调查，PRRS可使美国养猪业造成巨大经济损失。该病的主要临床症状是妊娠母猪繁殖障碍、新生仔猪高死亡率、不同年龄段猪呼吸困难。1987年，美国最早发现该病，欧洲地区在1990年也报道存在该病。高致病性猪繁殖与呼吸综合征简称HP
‑
PRRSV，于2006年在我国突然暴发，由于 其发病率高和死亡快的特点，对我国养猪业造成严重打击。2012年起，PRRSV NADC30
‑
like毒株开始在我国广泛流行 ，2017年我国首次报道NADC34
‑
like PRRSV，该毒株与美国PRRSV流行株1
‑4‑
4新型变异株属于同一分支。近几年来，很多中药及中药单体都表现出比较明显的抗PRRSV作用，中药正逐渐成为控制猪繁殖和呼吸综合征病毒的有效替代品。
[0003]异柯里拉京具有抑制胆碱酯酶、抗氧化、助消化、抗糖尿病、降血脂、降血压的活性。专利CN108434167A异柯里拉京在制备抗流感病毒药物中的应用中公开了从青果中提取异柯里拉京具有较强的抗流感病毒和艾滋病毒，在50μg/mL浓度下的抑制率高达90.01%。现有研究表明，异柯里拉京可与NA活性位点中高度保守的残基结合，意味着异柯里拉京可能对各种流感菌株有效，且不易产生耐药性。也有研究公开了，从热带植物叶下珠的水提取物中分离纯化获得异柯里拉京及柯里拉京，在测试二者对clone
‑
9和Hepg2细胞系的体外肝保护活性时，二者均能显著降低CCl4诱导的AST、ALT和GSH升高，从而发现二者均具有较强得肝保护活性。但未见异柯里拉京在抗猪繁殖与呼吸综合征的研究。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术的缺点，本专利技术提供异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，所述异柯里拉京的结构式为：。
[0006]本专利技术所述异柯里拉京为紫地榆、余甘子、叶下珠等中药的提取物，是多种植物的
主要活性成分之一，化学式为C
27
H
22
O
18
，结构式为异 1
‑
O
‑
没食子酰
‑
3，6
‑
（R）
‑
O
‑
六羟基联苯酰
‑
α
‑
D
‑
葡萄糖，是柯里拉京的α异构体看，具有抗氧化、助消化、降血脂、降血压、提高免疫力等功效。现有技术发现异柯里拉京可用于制造抗流感病毒、抗艾滋病、护肝或抗HSV
‑
1病毒的药物。本专利技术提取出天然的异柯里拉京，首次将其作为潜在的抗猪繁殖与呼吸综合征药物。
[0007]所述异柯里拉京的提取方法，包括如下步骤：将紫地榆粉碎，按照1g：30mL的料液比用95%的乙醇浸泡，在45℃、120r/min搅拌下提取4次，每次提取0.5h，滤去提取物中不溶杂质，清液减压蒸馏浓缩至浓稠膏状物；将浓稠膏状物加水，超声30min，然后按照液液比为1：1加入石油醚进行萃取，将萃取后的水相中加入体积比为1：1的乙酸乙酯及逆行萃取至乙酸乙酯有机相清亮，合并有机相，蒸馏浓缩得到有机萃提物；将有机萃提物使用HPLC进行分离、制备；所述HPLC的色谱条件为：选用C18色谱柱，规格为10
×
250mm，5μm，Waters 966紫外可见光检测器，检测波长254nm和350nm，柱温30℃，进样体积200μL，流动相为甲醇（B）和0.5%甲酸水（D），流量5.00mL/min，梯度洗脱：0
‑
30min，B10%
→
35%；30
‑
40min，B35%
→
100%；40
‑
50min，B100%
→
100%；50
‑
51min，B100%
→
10%，洗脱时间51min。
[0008]作为本专利技术的优选实施方式，所述异柯里拉京提取自紫地榆、余甘子、叶下珠等中药材。
[0009]一种抗猪繁殖与呼吸综合征的药物，所述药物的有效成分包括异柯里拉京。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术通过建立体外PRRSV感染Marc
‑
145模型，使用CTG法测定异柯里拉京对Marc
‑
145细胞的TC0和TC
50
分别为260μg/mL和770.43μg/mL，对比现有的天然中药对Marc
‑
145细胞的TC0和TC
50
，本专利技术所述异柯里拉京对Marc
‑
145细胞的毒性相对较小，安全浓度较高。同时本专利技术采用了三种不同的给药方式进行异柯里拉京对PRRSV病毒体外抑制作用的探索，即药和病毒共同孵育后感染细胞为直接杀灭病毒、先加药后加病毒为阻断病毒吸附细胞、先加病毒后加药为抑制病毒胞内复制，发现，异柯里拉京能够显著的直接杀灭PRRSV、阻断PRRSV吸附Marc
‑
145细胞和抑制PRRSV在细胞中复制增殖，其体外抗PRRSV效果显著强于利巴韦林。因此，本专利技术公开异柯里拉京在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物具有潜在的应用价值，为抗PRRSV药物的开发提供新的思路，对中草药的开发和利用具有一定的意义。
附图说明
[0011]图1为本专利技术实施例2所述异柯里拉京对Marc
‑
145增殖的影响图。图1A为不同异柯里拉京药液浓度下Marc
‑
145细胞的化学发光值对比图。图1B为不同异柯里拉京药液浓度下对Marc
‑
145细胞的抑制率。
[0012]图2为本专利技术实施例2所述利巴韦林对Marc
‑
145增殖的影响图。图2A为不同利巴韦林浓度下Marc
‑
145细胞的化学发光值对比图。图2B为不同利巴韦林浓度下对Marc
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145细胞的抑制率。
[0013]图3为本专利技术实施例3所述异柯里拉京对PRRSV病毒的杀灭作用的对比图。图3A为本专利技术实施例3中不同异柯里拉京药液浓度下Marc
‑
145细胞的化学发光值。图3B为本专利技术
实施例3中不同异柯里拉京药液浓度对PRRSV病毒的杀灭率。
[0014]图4为本专利技术实施例3中不同异柯里拉京药液浓度对PR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.异柯里拉京在制备抗猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用，其特征在于，所述异柯里拉京的结构为：。2...

【专利技术属性】
技术研发人员：常华，项勋，段博芳，李隽，代飞燕，段纲，杨林富，阮谦，王绍卿，杨茜，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：