一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于病原菌检测技术领域，具体涉及一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法和应用。将序列如SEQ ID NO.1所示的基因整合到表达载体上并转入宿主菌；诱导宿主菌表达并纯化后获得序列如SEQ ID NO.2所示的PmA153重组抗原蛋白；将PmA153包被在固相载体上，即可通过酶联免疫吸附的检测方法实现对样品中的牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型的抗体的检测，实现诊断目的。本发明专利技术提供的试剂盒，不使用多杀性巴氏杆菌作为抗原来源，具有良好的生物安全性及生产便宜性，对牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型抗体检测具有良好的特异性，能够精准诊断牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型肺炎，具有重要的临床应用价值。有重要的临床应用价值。有重要的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于病原菌检测
，具体涉及一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella Multocida，Pm)荚膜B型是引起我国牛出血性败血症的病原菌。牛出血性败血症是以高热、肺炎、急性胃肠炎以及内脏器官广泛出血为特征的传染病，在我国已有几十年的流行历史，目前仍在多地呈散发或地方性流行。2008年，我国牛场出现了以纤维素性肺炎为典型症状的牛呼吸道传染病，并在黑龙江、甘肃、贵州、重庆、四川等数个省市流行。该病的临床表现以精神萎靡、食欲减退、咳嗽、流涕、体温升高和消瘦为特征。主要病理解剖变化在肺组织，呈广泛淤血和散在大小不一的脓肿结节，急性、亚急性或慢性的化脓性纤维素渗出与坏死，以及小叶间隔的水肿与化脓，严重者出现心包膜与胸膜粘连、纤维素性或化脓性胸膜炎。经哈尔滨兽医研究所等单位对数省市病料中的病原菌进行分离鉴定，并进行动物回归试验，确定了其病原菌为牛多杀性巴氏杆菌荚膜A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，包括PmA153包被的固相载体；PmA153的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，还包括标准阳性对照血清和标准阴性对照血清；所述标准阳性对照血清是由使用牛源多杀性巴氏杆菌荚膜A型菌株免疫牛获得；所述标准阴性对照血清为未免疫和未感染多杀性巴氏杆菌荚膜A型的牛血清。3.根据权利要求2所述的一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，还包括酶标二抗、显色液、终止液、浓缩洗涤液和样品稀释液。4.根据权利要求3所述的一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG；所述显色液为双组分TMB显色液；所述终止液为硫酸溶液；所述浓缩洗涤液为PBST洗涤液；所述样品稀释液为含牛血清白蛋白、吐温
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20、EDTA和氯化钠的PBS液。5.根据权利要求4所述的一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，其判定标准为：待检样品的S/P值≥0.161时，判为阳性；待检样品的S/P值＜0.161时，判为阴性；S/P值的计算方法为：(样品OD
450
值－标准阴性对照血清OD
450
均值)/(标准阳性对照血清OD
450
均值－标准阴性对照血清OD
450
均值)；OD
450
是指在450nm波长下光密度；且标准阳性对照血清OD
450
值均≥2.0，标准阴性对照血清OD
450
值均＜...

【专利技术属性】
技术研发人员：高洋，赖茂林，杨元礼，冉智光，赵扬扬，秦世荣，杨婕，伏刚，赵宗玲，吕逢波，王为民，李朝阳，
申请(专利权)人：重庆澳龙生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：