一种八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺及最佳提取条件的优化方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺及最佳提取条件的优化方法及应用，该八味沉香散水提物提取工艺包含以下步骤：获取八味沉香散剂，加入8倍量的水充分混匀，冷凝回流提取3次每次1h，合并滤液，浓缩，过滤，干燥得到水提物干粉。本发明专利技术提供的八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺，在保证出膏率的基础上使药效在最大程度上得以保留，药效学结果稳定，且提取方法简单、廉价，药效稳定，适合大规模量产。合大规模量产。合大规模量产。

【技术实现步骤摘要】
一种八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺及最佳提取条件的优化方法及应用


[0001]本专利技术涉及藏药领域，特别是涉及一种八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺及最佳提取条件的优化方法及应用。

技术介绍

[0002]缺血性心脏病是严重危害健康的常见病，随着介入性心脏病学在其治疗中广泛应用，防治心肌缺血再灌注损伤的研究意义重大。我国已上市的藏药八味沉香散治疗缺血性心脏病临床疗效显著，前期基础研究表明其具有较好的抗心肌缺血作用。
[0003]目前八味沉香散是以散剂(草药打细粉)直接应用的临床口服药物，存在剂型单一，药物作用机制不甚明确等特点。常规制备方法一般为加入10倍体积水或乙醇，回流提取3次，合并滤液，浓缩，得到水提或醇提物。此种方法由于提取加工工艺可能会造成药物活性成分损失，药效不能最大保留，且缺乏基础实验理论依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺及最佳提取条件的优化方法及应用。
[0005]第一方面，本专利技术提供了一种八味沉香散水提物的提取工艺，该提取工艺包含以下步骤：
[0006]取八味沉香散剂，加入6
‑
10倍量的水充分混匀，冷凝回流提取3次每次1h，合并滤液，浓缩，过滤，干燥得到水提物干粉。
[0007]优选地，该提取工艺具体包含以下步骤：取八味沉香散剂，加入8倍量的水充分混匀，加热至水沸，冷凝回流提取，每次提取1h，提取3次，合并滤液，过滤，浓缩，得到浓缩过滤液，干燥得水提物干粉。
[0008]第二方面，本专利技术提供了一种八味沉香散醇提物的提取工艺，包含以下步骤：
[0009]取八味沉香散剂，加入6
‑
10倍量50
‑
75％的乙醇充分混匀，冷凝回流提取3次每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，干燥得到醇提物干粉。
[0010]优选地，八味沉香散醇提物的提取工艺，包含以下步骤：
[0011]取八味沉香散剂，加入烧瓶中，加入8倍量60％的乙醇充分混匀，加热至沸，冷凝回流提取，每次2h提取3次，合并滤液，过滤，回收乙醇，浓缩，得到浓缩过滤液，经冷冻干燥后，得醇提物干粉。
[0012]优选地，其主要由以下重量份的各原料药制备得到：
[0013]沉香200份、肉豆蔻100份、广枣100份、煨诃子100份、乳香100份、木香100份、木棉花100份和石灰华100份。
[0014]第三方面，本专利技术还提供了一种八味沉香散水提物的最佳提取条件的优化方法，包含以下步骤：
[0015](1)以八味沉香散水提物的提取工艺，设定提取次数、提取时间和溶剂用量为3个因素，各取3个水平，提取次数为1、2、3次，提取时间为1h，1.5h，2h，溶剂用量为8、10、12倍，正交试验设计得到9个水提物。
[0016](2)建立细胞缺氧再灌注损伤(I/R)模型，用LDH检测法、CCK8法评估不同提取物对大鼠H9C2 I/R的细胞LDH释放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到最佳提取工艺。
[0017]第四方面，本专利技术还提供了一种八味沉香散醇提物的最佳提取条件的优化方法，包含以下步骤：
[0018](1)以八味沉香散醇提物的提取工艺，提取次数、提取时间和溶剂倍数为4个因素，各取3个水平，乙醇含量分别取30％、60％、95％，提取次数为1、2、3次，提取时间为1h，1.5h，2h，溶剂用量为8、10、12倍，正交试验法得到9个醇提物；
[0019](2)建立细胞缺氧再灌注损伤(I/R)模型，用LDH检测法、CCK8法评估不同提取物对大鼠H9C2 I/R的细胞LDH释放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到最佳提取工艺。
[0020]第五方面，本专利技术还提供了一种八味沉香散最佳提取条件的优化方法，包含以下步骤：
[0021](1)以八味沉香散水提物的提取工艺，设定提取次数、提取时间和溶剂用量为3个因素，各取3个水平，提取次数为1、2、3次，提取时间为1h，1.5h，2h，溶剂用量为8、10、12倍，正交试验设计得到9个水提物；
[0022](2)建立细胞缺氧再灌注损伤(I/R)模型，用LDH检测法、CCK8法评估不同提取物对大鼠H9C2 I/R的细胞LDH释放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到八味沉香散水提物的最佳提取工艺；
[0023](3)以八味沉香散醇提物的提取工艺，设定溶剂含醇量、提取次数、提取时间和溶剂倍数为4个因素，各取3个水平，乙醇含量分别取30％、60％、95％，提取次数为1、2、3次，提取时间为1h，1.5h，2h，溶剂用量为8、10、12倍，正交试验法得到9个醇提物；
[0024](4)建立细胞缺氧再灌注损伤(I/R)模型，用LDH检测法、CCK8法评估不同提取物对大鼠H9C2 I/R的细胞LDH释放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到八味沉香散醇提物的最佳提取工艺；
[0025](5)将八味沉香散水提物的最佳提取工艺和八味沉香散醇提物的最佳提取工艺获取的八味沉香散水提、醇提物进行药效和出膏率比较，获取八味沉香散的最佳提取工艺。
[0026]第六方面，本专利技术还提供了一种如上述所述的八味沉香散水提物的应用，所述八味沉香散水提物在制备预防或治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
[0027]第七方面，本专利技术还提供了一种如上述所述的八味沉香散、醇提物的应用，所述八味沉香散醇提物在制备预防或治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
[0028]本专利技术与现有技术不同之处在于本专利技术取得了如下技术效果：
[0029](1)本专利技术为探求八味沉香散发挥心肌缺血再灌注损伤保护作用下的一种最佳工艺制备方案，为临床新药制备提供新的方法；本专利技术以正交设计优化实验方案，选取药物最佳制备条件，设置3个因素3个水平，进行L9(34)正交试验，提取出9种水提物和9种醇提物。然后将18种提取物用LDH检测法、CCK8法评估其对大鼠H9C2心肌细胞I/R损伤的细胞LDH释
放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到最佳提取工艺。
[0030](2)本专利技术提供的八味沉香散水提物、醇提物的提取工艺，在保证出膏率的基础上使药效在最大程度上得以保留，药效学结果稳定，且提取方法简单、廉价，药效稳定，适合大规模量产。且水提物药效较优于醇提物，更适合规模化生产。
附图说明
[0031]图1、图5是各浓度八味沉香水提、醇提物、曲美他嗪对细胞活力的影响图；
[0032]图2、H9C2正常与缺血再灌注损伤模型图；
[0033]图3、不同时间缺血再灌注对细胞增殖活性的影响图；
[0034]图4、图6是八味沉香散水提、醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种八味沉香散水提物的提取工艺，其特征在于，包含以下步骤：取八味沉香散剂，加入6
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10倍量的水充分混匀，冷凝回流提取3次每次1h，合并滤液，浓缩，过滤，干燥得到水提物干粉。2.根据权利要求1所述的八味沉香散醇提物的提取工艺，其特征在于，具体包含以下步骤：取八味沉香散剂，加入8倍量的水充分混匀，加热至水沸，冷凝回流提取，每次提取1h，提取3次，合并滤液，过滤，浓缩，得到浓缩过滤液，干燥得水提物干粉。3.一种八味沉香散醇提物的提取工艺，其特征在于，包含以下步骤：取八味沉香散剂，加入6
‑
10倍量50
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75％的乙醇充分混匀，冷凝回流提取3次每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，干燥得到醇提物干粉。4.根据权利要求3所述的八味沉香散醇提物的提取工艺，其特征在于，包含以下步骤：取八味沉香散剂，加入烧瓶中，加入8倍量60％的乙醇充分混匀，加热至沸，冷凝回流提取，每次2h提取3次，合并滤液，过滤，回收乙醇，浓缩，得到浓缩过滤液，经冷冻干燥后，得醇提物干粉。5.根据权利要求1或2所述的八味沉香散，其主要由以下重量份的各原料药制备得到：沉香200份、肉豆蔻100份、广枣100份、煨诃子100份、乳香100份、木香100份、木棉花100份和石灰华100份。6.一种八味沉香散水提物的最佳提取条件的优化方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)以八味沉香散水提物的提取工艺，设定提取次数、提取时间和溶剂用量为3个因素，各取3个水平，提取次数为1、2、3次，提取时间为1h，1.5h，2h，溶剂用量为8、10、12倍，正交试验设计得到9个水提物；(2)建立细胞缺氧再灌注损伤(I/R)模型，用LDH检测法、CCK8法评估不同提取物对大鼠H9C2 I/R的细胞LDH释放率和细胞活力，以正交设计因素水平与细胞活力、细胞LDH释放率、出膏率计算综合评分，得到最佳提取工艺。7.一种八味沉香散醇提物的最佳提取条件的优化方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)以八味沉香散醇提物的提取工艺，设定溶剂含醇量、提取次数、提取时间和溶剂倍数为4个因...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐冰，朱海燕，聂波，
申请(专利权)人：中国藏学研究中心北京藏医院，
类型：发明
国别省市：