一种防治肌肉萎缩的药物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种防治肌肉萎缩的药物及其应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术公开了一种过表达VTG2的腺相关病毒或VTG2重组蛋白在制备预防和/或治疗肌肉萎缩的药物中的应用。本发明专利技术从动物水平及细胞水平多方面证实，在动物体内过表达VTG2腺相关病毒或者在体外过表达VTG2重组蛋白，能够抑制肌肉萎缩相关因子Murf

【技术实现步骤摘要】
一种防治肌肉萎缩的药物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种防治肌肉萎缩的药物及其应用。

技术介绍

[0002]骨骼肌在调节机体的新陈代谢和稳态中起着关键的作用。肌肉的生长发育过程是肌肉合成和降解相关蛋白平衡导致的，同时还伴随着肌细胞的分化和融合。
[0003]地塞米松(DEX)由于作用广泛，在临床中经常被使用。但是其长期大量的使用会导致一些副作用，比如肌肉萎缩。肌肉萎缩常常伴随着肌肉萎缩相关因子Murf
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1和Atrogin
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1表达的升高。癌症恶病质(Cancer Cachexia，CC)死亡率高，可由多种癌症诱导发生，其伴随的骨骼肌萎缩是CC的主要临床特征。而目前没有特别有效的方法来治疗DEX和CC所致的肌肉萎缩。
[0004]卵黄蛋白原(Vitellogenin，VTG)是几乎所有卵生动物卵黄蛋白的前体，是一种大分子蛋白。通常在脂肪体或者肝细胞中，VTG在激素诱导下表达、翻译并进行翻译后修饰。VTG的蛋白结构包括N端信号肽，从N端至C端的VitN、DUF以及vWD三个主要结构域。VitN结构域包含丝氨酸聚集区及保守的RXXR酶切位点。VTG在其产生细胞中被枯草芽孢杆菌酶切成三个亚基，分别为VTG1、VTG2和VTG3，然后VTG的亚基被释放到血淋巴中，分别介导免疫、营养、病原运输及行为调节等功能。研究表明，VTG作为卵黄蛋白的前体物质，能够为正在发育的胚胎提供氨基酸、脂肪、碳水化合物、维生素、磷和硫等营养物质并作用于全身，还具有免疫防御功能、作为载体物质能够将生物大分子运送至卵母细胞中等。另有研究发现，鸡体内有3种VTG，分别为VTG1(Vitellogenin 1)、VTG2(Vitellogenin 2)和VTG3(Vitellogenin 3)，而VTG2的含量最丰富。但是VTG2与肌肉萎缩的关系至今未提及。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种防治肌肉萎缩的药物及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术发现过表达VTG2能够抑制肌肉萎缩相关因子Murf
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1和Atrogin
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1表达，明显改善DEX或CC诱导的肌肉萎缩，为该疾病的预防或治疗提供了新的见解。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0007]本专利技术提供一种过表达VTG2的制剂在制备预防和/或治疗肌肉萎缩的药物中的应用。
[0008]进一步地，所述过表达VTG2的制剂包括VTG2腺相关病毒和VTG2重组蛋白。
[0009]进一步地，所述VTG2腺相关病毒包含如SEQ ID NO：1所示的基因序列。
[0010]更进一步地，所述VTG2腺相关病毒为AAV9
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VTG2。
[0011]进一步地，所述VTG2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。
[0012]进一步地，所述过表达VTG2的制剂通过抑制肌肉萎缩相关因子Murf
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1和Atrogin
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1的表达水平，发挥预防和/或治疗肌肉萎缩的作用。
[0013]进一步地，所述肌肉萎缩包括地塞米松(DEX)或癌症恶病质(CC)诱导的肌肉萎缩。
[0014]本专利技术还提供一种防治肌肉萎缩的药物，包含所述VTG2腺相关病毒和/或所述VTG2重组蛋白。
[0015]本专利技术公开了以下技术效果：
[0016]本专利技术从动物水平及细胞水平多方面证实，在动物体内过表达VTG2腺相关病毒或者体外过表达VTG2重组蛋白，能够抑制肌肉萎缩相关因子Murf
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1和Atrogin
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1表达，明显改善DEX或CC诱导的肌肉萎缩，本专利技术发现了一种新的防治肌肉萎缩的治疗药物，为该疾病的预防或治疗提供了新的见解。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为空白穿梭质粒图谱；
[0019]图2为插入目的基因VTG2的穿梭质粒图谱；
[0020]图3为CON、DEX和DEX+AAV9
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VTG2组小鼠腓肠肌石蜡切片的HE染色照片(A)以及肌纤维面积测量结果(B)；
[0021]图4为Western blot检测CON、DEX和DEX+AAV9
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VTG2组小鼠腓肠肌Murf
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1和Atrogin
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1蛋白的表达水平(A)以及量化分析(B
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C)；
[0022]图5为CON、CC和CC+AAV9
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VTG2组小鼠腓肠肌石蜡切片的HE染色照片(A)以及肌纤维面积测量结果(B)；
[0023]图6为Westernblot检测CON、CC和CC+AAV9
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VTG2组小鼠腓肠肌Murf
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1和Atrogin
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1蛋白的表达水平(A)以及量化分析(B
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C)；
[0024]图7为CON、DEX和DEX+VTG2组的肌管细胞中eMYHC染色结果(A)以及肌管的融合指数分析(B)；
[0025]图8为Western blot检测CON、DEX和DEX+VTG2组的肌管细胞中Murf
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1和Atrogin
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1蛋白的表达水平(A)以及量化分析(B
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C)；
[0026]图9为CON、BCM和BCM+VTG2组的肌管细胞中eMYHC染色结果(A)以及肌管的融合指数分析(B)；
[0027]图10为Western blot检测CON、BCM和BCM+VTG2组的肌管细胞中Murf
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1和Atrogin
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1蛋白的表达水平(A)以及量化分析(B
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C)。
具体实施方式
[0028]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0029]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包
括或排除在范围内。
[0030]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种过表达VTG2的制剂在制备预防和/或治疗肌肉萎缩的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述过表达VTG2的制剂包括VTG2腺相关病毒和VTG2重组蛋白。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述VTG2腺相关病毒包含如SEQ ID NO：1所示的基因序列。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述VTG2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。5.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：王海东，李艺雷，罗小毛，闫艺，卢嘉茵，于秀菊，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：