LncRNAKCND1在制备防治病理性心肌肥厚药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，尤其是涉及LncRNA KCND1在制备防治病理性心肌肥厚药物中的应用。本发明专利技术首先证明在实验性心肌肥厚小鼠及心肌肥大细胞中LncRNA KCND1表达显著下调，其次通过使用小干扰RNA技术特异性抑制心肌细胞中LncRNA KCND1的表达，结果发现心肌细胞明显肥大，最后发现通过使用腺相关病毒9携带LncRNA KCND1在横向主动脉缩窄术(TAC)诱导的小鼠心肌肥厚中过表达LncRNA KCND1，可以有效减轻实验性心肌肥大，改善TAC小鼠的心功能。本发明专利技术为心肌肥厚的发生阐释了一个新的病理生理学机制，并提供了一种可用于病理性心肌肥厚相关疾病的预防和治疗的新药物。厚相关疾病的预防和治疗的新药物。厚相关疾病的预防和治疗的新药物。

【技术实现步骤摘要】
LncRNA KCND1在制备防治病理性心肌肥厚药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其是涉及LncRNA KCND1在制备防治病理性心肌肥厚药物中的应用。

技术介绍

[0002]病理性心肌肥厚是心脏长期受到外界刺激后表现出的心室壁厚度增加，心肌收缩力下降以及心功能减弱等一系列变化，最终引发心力衰竭、恶性心律失常等。其临床表现为呼吸困难、胸痛、头晕昏厥、心悸，易发生心衰和猝死。病理性心肌肥厚的病人除了心脏肥大外还会出现左室舒张功能障碍、左室流出道拥堵、心肌细胞氧气供求失衡以及心律失常等现象。其病理改变以心肌细胞异常增大、成纤维细胞过度增殖、细胞外基质重构、活性氧超载以及血管新生为主要特征，进一步发展会出现线粒体功能损伤，心肌细胞代谢失衡，进而刺激心脏发生重构使得心肌收缩力降低，最终导致心室扩张，室壁变薄，心脏收缩功能障碍，进而发展为心力衰竭。然而，病理性心肌肥厚的发病机制尚不完全明晰，需要更全面更科学的阐明其分子机制，为寻求积极有效的治疗方法奠定理论基础。
[0003]近年来病理性心肌肥厚的发病率逐年增加，长期的心肌肥厚最终会导致心力衰竭。目前治疗心力衰竭的方法包括药物治疗，植入装置及心脏移植手术等。但是由于心脏来源的限制，排斥反应，经济能力等限制因素，绝大部分患者的健康和生命受到极大危害。关于心肌肥厚的预防、诊断和治疗工作，目前仍然存在大量的缺陷。
[0004]非编码RNA在心脏疾病病理过程中的作用逐渐被揭示。长链非编码RNA(lncRNAs)由大于200个核苷酸组成，其通过招募转录因子来调节各种生理和病理过程，这些转录因子扮演着微小RNA海绵的角色，调节各种mRNA的翻译，沉默转录，并重新编码表观遗传过程。随着对lncRNAs研究的逐步深入，其在心血管疾病中发挥重要作用，是包括心肌肥大在内的各种心血管疾病的可靠诊断指标和治疗目标。因此发现不同病理生理情况下起关键调节作用的lncRNAs亚型变化，并阐明其功能，将会提供新的治疗病理性心肌肥厚的干预策略。尽管越来越多的lncRNAs作为人类疾病的生物标志物、决定因素和治疗靶点被发现，但调节病理性心肌肥厚的关键lncRNAs亚型仍没有确定，其在心肌肥大的治疗和诊断中的作用仍然不清楚，需要进一步的研究。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术的目的是提供LncRNA KCND1在制备防治病理性心肌肥厚药物中的应用。本专利技术首先证明在实验性心肌肥厚小鼠及心肌肥大细胞中LncRNA KCND1(LncKCND1)表达显著下调，其次通过使用小干扰RNA技术特异性抑制LncKCND1结果发现心肌细胞肥大，最后发现通过使用腺相关病毒9(AAV9)携带LncKCND1在横向主动脉缩窄术(TAC)诱导的小鼠心肌肥厚中过表达LncKCND1，可以有效减轻实验性心肌肥大，改善TAC小鼠的心功能。本专利技术为心肌肥厚的发生阐释了一个新的病理生理学机制，并提供了一种可用于病理性心肌肥厚相关疾病的预防和治疗的新药物。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
[0007]本专利技术的第一个目的是提供LncRNA KCND1在作为病理性心肌肥厚诊断的标志物中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0008]在本专利技术的一个实施方式中，LncRNA KCND1在病理性心肌肥厚中表达降低；抑制LncRNA KCND1的表达可诱导病理性心肌肥厚。
[0009]在本专利技术的一个实施方式中，离体过表达LncRNA KCND1可明显抑制病理性心肌肥厚；在体过表达LncRNA KCND1可明显抑制病理性心肌肥厚。
[0010]本专利技术的第二个目的是提供一种病理性心肌肥厚的诊断试剂盒，包括上述LncRNA KCND1，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0011]本专利技术的第三个目的是提供LncRNA KCND1在筛选病理性心肌肥厚的诊断药物中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0012]本专利技术的第四个目的是提供LncRNA KCND1在筛选病理性心肌肥厚的诊断试剂盒中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0013]本专利技术的第五个目的是提供LncRNA KCND1在制备预防或治疗病理性心肌肥厚药物中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0014]本专利技术的第六个目的是提供LncRNA KCND1在制备病理性心肌肥厚试剂盒中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0015]本专利技术的第七个目的是提供LncRNA KCND1激活剂在制备预防或治疗病理性心肌肥厚药物中的应用，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0016]本专利技术的第八个目的是提供LncRNA KCND1激活剂在制备病理性心肌肥厚试剂盒中的应用，所述LncRNAKCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。
[0017]在本专利技术的一个实施方式中，通过使用小干扰RNA技术特异性抑制LncRNA KCND1结果发现可导致心肌细胞肥大。
[0018]在本专利技术的一个实施方式中，通过使用腺相关病毒9(AAV9)携带LncRNA KCND1在横向主动脉缩窄术(TAC)诱导的小鼠心肌肥厚中过表达LncRNA KCND1，可以有效减轻实验性心肌病理性肥大，改善TAC小鼠的心功能。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0020]本专利技术为病理性心肌肥厚的发生提供了一个新的病理生理学机制，并可用于心肌肥厚相关疾病的预防与治疗。
附图说明
[0021]图1为横向主动脉缩窄术(TAC)后诱导小鼠心肌肥厚过程中LncKCND1的一部分表达变化结果图；图1A为心肌肥厚模型建立成功后小鼠超声心动图；图1B为心功能超声检查评价心肌肥厚小鼠左心室射血分数结果图；图1C为心功能超声检查评价心肌肥厚小鼠左心室缩短率结果图；图1D为实时荧光定量PCR(qRT
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PCR)分析心肌肥厚小鼠心脏组织中心肌肥大标志物：心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)以及β
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肌球蛋白重链(β
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MHC)的mRNA表达差异；图1E为Western blot检测心肌组织中β
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MHC的表达水平；图1F为qRT
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PCR评价心肌肥厚小鼠心脏组织中LncKCND1的表达变化；图1G为血管紧张素II(Angiotensin II,Ang II)诱导心肌细胞肥大模型的免疫荧光染色结果图。
[0022]图2血管紧张素II(Ang II)诱导小鼠心肌肥厚过程中LncKCND1的另一部分表达变化结果图；图2A为qRT
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PCR评价心肌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.LncRNA KCND1在作为病理性心肌肥厚诊断的标志物中的应用，其特征在于，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。2.根据权利要求1所述的LncRNA KCND1在作为病理性心肌肥厚诊断的标志物中的应用，其特征在于，LncRNA KCND1在病理性心肌肥厚中表达降低；抑制LncRNA KCND1的表达可诱导病理性心肌肥厚。3.根据权利要求1所述的LncRNA KCND1在作为病理性心肌肥厚诊断的标志物中的应用，其特征在于，离体过表达LncRNA KCND1可明显抑制病理性心肌肥厚；在体过表达LncRNA KCND1可明显抑制病理性心肌肥厚。4.一种病理性心肌肥厚的诊断试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的LncRNA KCND1，所述LncRNA KCND1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。5.LncRNA KCND1在筛选病理性心肌肥厚的诊断药物中的应用，其特征在于，所述LncRN...

【专利技术属性】
技术研发人员：单宏丽，于桐，周宇宏，罗宇，
申请(专利权)人：上海工程技术大学，
类型：发明
国别省市：