【技术实现步骤摘要】
一种检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法
[0001]本专利技术涉及检测单碱基突变、插入突变、缺失突变(indels)和甲基化分析领域,具体涉及一种检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法。
技术介绍
[0002]现有的单碱基突变检测技术包括普通ARMS探针法,PCR blocker探针法,及TaqMan MGB探针法,其中目前市场上主流检测产品,均使用的是ARMS
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PCR检测技术。该检测技术目前的灵敏度一般在1
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5%,主要用于肿瘤组织样品检测,由于灵敏度不高,所以无法用于液体活检。该技术目前存在一些技术障碍,例如为了消除野生型人类基因组DNA非特异性扩增产生的背景信号,通常需要添加外控,然后通过借助公式进行计算ΔCt cut
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off,通过人工比对,判断是否有突变,而且针对不同的突变位点,ΔCt cut
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off值也不同;同一位点不同公司试剂盒,ΔCt cut
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off值也不同。 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法,以模板片段结合区的3
′
末端第1个碱基为扩增决定位点,其特征在于,在进行引物的设计时,在所述引物的3
′
末端碱基处引入所需突变碱基,在所述引物的3
′
末端的第2个或第3个碱基处引入第一错配碱基,在所述引物的3
′
末端的第8~12个碱基处引入第二错配碱基。2.如权利要求1所述检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法,其特征在于,当所述模板片段中对应所述第一错配碱基的碱基为T,C或G时,所述第一错配碱基为T。3.如权利要求1所述检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法,其特征在于,当所述模板片段中对应所述第一错配碱基的碱基为A时,所述第一错配碱基为A。4.如权利要求1所述检测碱基突变和甲基化分析的TJ
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ARMS方法,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘家兴,祝海宝,李嘉奇,黄智豪,籍雁竹,黄郁媚,王涛,邓荣浩,魏炽炬,
申请(专利权)人:汕头大学,
类型:发明
国别省市:
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