一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒及其制备方法和应用，属于药物制剂技术领域；所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中，以高密度脂蛋白作为药物运输载体，所述药物运输载体中包含了水溶性药物铂类药物和脂溶性药物五环三萜类皂苷类药物；所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性和无免疫原性；所述重组高密度脂蛋白纳米粒可以实现共同靶向给药。组高密度脂蛋白纳米粒可以实现共同靶向给药。组高密度脂蛋白纳米粒可以实现共同靶向给药。

【技术实现步骤摘要】
一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒及其制备方法和应用


本专利技术属于药物制剂
，具体涉及一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒及其制备方法和应用。

技术介绍

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一。目前，CRC的发病率呈年轻化趋势，且多数病人发现时已属于中晚期。近年来，CRC的治疗得到了极大发展，化学治疗、靶向治疗、免疫治疗、局部治疗都为深受病痛折磨的患者带来了希望。由于35％患者发现时已进入晚期，失去手术根治机会。化疗仍然是晚期CRC治疗的主要方式。化疗药物奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)是继顺铂和卡铂后的第三代铂类化疗药物，其具有特异的细胞毒性，是晚期CRC患者常用的一线化疗药物。但是，OXA易引发癌细胞产生耐药性，有将近50％患者对OXA治疗无反应，这是OXA治疗失败的主要原因。α
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常春藤皂苷(α
‑
Hederin)是从我国传统中药材中分离提取的一种单桥糖三萜皂苷，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、抑制炎症和免疫调节等，在逆转肿瘤耐药、改善结肠癌治疗效果方面也有一定作用。但α
‑
Hederin的水溶性较差并且其细胞毒性很大，特别是具有溶血性。高密度脂蛋白(high
‑
density lipoprotein，HDL)是一种内源性纳米脂蛋白颗粒，由多种生物脂类和载脂蛋白构成。重组高密度脂蛋白和内源性高密度脂蛋白构成成分相同，具有典型的“壳
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核”结构。清道夫Bl受体(scavenger type Blreceptor,SR
‑
B1)能够被HDL表面的载脂蛋白A
‑
1(APOA
‑
1)所识别且高亲和力结合，使细胞选择性地摄取HDL中的胆固醇酯。rHDL纳米粒可以与肿瘤细胞表面高表达的SR
‑
B1受体特异性结合，直接靶向肿瘤，形成更高效的药物递送。内源性物质APOA
‑
1、磷脂、胆固醇组成的亲水表面使得rHDL纳米粒有效地规避网状内皮系统的清除。rHDL作为药物运输载体具有先天优势，如可静脉注射、无毒、无免疫原性、可携带脂溶性和水溶性分子、留存时间长、具有一定靶向性等。因此，需要开发一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒来作为新的肿瘤制剂。

技术实现思路

针对现有技术中存在不足，本专利技术提供了一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒及其制备方法和应用；所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中，以高密度脂蛋白作为药物运输载体，所述药物运输载体中包含了水溶性药物铂类药物和脂溶性药物五环三萜类皂苷类药物；所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性和无免疫原性；所述重组高密度脂蛋白纳米粒可以实现共同靶向给药。本专利技术首先提供了一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒，所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒为球形结构，球形结构表面有不规则的凸起，所述纳米粒的平均粒径为124.5
±
3.56nm；所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中，磷脂和胆固醇形成双分子层囊泡，囊泡内包载水溶性药物，双分子层内包载脂溶性药物，载脂蛋白A
‑
1结合于双分子层的亲水层
上；所述水溶性药物包括铂类药物，所述脂溶性药物包括五环三萜类皂苷类药物。优选地，所述铂类药物包括奥沙利铂、奈达铂、卡铂或顺铂；所述五环三萜类皂苷类药物包括α
‑
常春藤皂苷或人参皂苷Ro。本专利技术还提供了上述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒的制备方法，具体包括如下步骤：(1)双载药纳米粒的制备：将大豆卵磷脂、胆固醇和五环三萜类皂苷类药物溶于乙醇，得到有机相；将质量分数为5％的葡萄糖溶液预热，然后向其中加入铂类药物和脱氧胆酸钠，超声溶解，得到水相；在搅拌条件下将有机相缓慢注入水相中，继续搅拌反应，反应结束后减压旋蒸除去有机溶剂和部分水，然后冰浴探头超声，超声结束后过滤膜以减小粒径，使其粒径达到200nm以下，得到双载药纳米粒溶液；(2)双载药重组高密度脂蛋白(rHDL)纳米粒的制备：向双载药纳米粒溶液中加入载脂蛋白A
‑
1，溶解后孵育一段时间，得到所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒。优选地，步骤(1)中，所述有机相中，大豆卵磷脂、胆固醇、五环三萜类皂苷类药物的用量比为100mg：15～5mg：5～15mg。优选地，步骤(1)中，所述水相中，葡萄糖溶液、铂类药物和脱氧胆酸钠的用量比为15mL：1～10mg：5～15mg。优选地，步骤(1)中，所述葡萄糖溶液质量分数为5％，预热至50～65℃。优选地，步骤(1)中，所述有机相和水相的体积比为1～3：3～1。优选地，步骤(1)中，所述搅拌反应的条件为40～50℃下反应60min。优选地，步骤(1)中，所述旋转蒸发仪的设置条件为60～68℃，30～40min。优选地，步骤(1)中，所述冰浴探头超声条件为AMPL40％，工作1s休息1s，时间为10～15min。优选地，步骤(2)中，所述双载药纳米粒溶液和载脂蛋白A
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1的用量比为3mL:100～200μg；所述孵育的条件为在37℃下摇床孵育2天。本专利技术还提供了上述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒在制备肿瘤制剂中的应用。优选地，所述肿瘤包括结直肠癌。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术采用高密度脂蛋白(high
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density lipoprotein，HDL)作为药物运输载体，所述高密度脂蛋白作为药物运输载体具有先天优势，如可静脉注射、无毒、无免疫原性、可携带脂溶性和水溶性分子、留存时间长、具有一定靶向性等。本专利技术将铂类药物和五环三萜类皂苷尤其是奥沙利铂和α
‑
常春藤皂苷联合使用，在对抗结肠癌的过程中，起到了协同、增效的作用。本专利技术制备的双载药重组高密度脂蛋白递送系统，延长了药物在体内的滞留时间，实现了两种药物的共同、靶向给药。
附图说明
图1为未加载脂蛋白即α常春藤皂苷
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奥沙利铂双载药纳米粒的粒径分布图图。图2为添加载脂蛋白即α常春藤皂苷
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奥沙利铂重组高密度脂蛋白的粒径分布图。图3为α常春藤皂苷
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奥沙利铂双载药纳米粒的TEM图；图中a为100nm，b为50nm。图4为α常春藤皂苷
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奥沙利铂重组高密度脂蛋白的TEM图；图中a为100nm，b为50nm。图5为HPLC法测定奥沙利铂对照品的标准曲线。图6为HPLC法测定α
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常春藤皂苷标准品的标准曲线。图7为奥沙利铂的体外药物释放曲线。图8为α
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常春藤皂苷的体外药物释放曲线。图9为不同浓度α常春藤皂苷
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奥沙利铂重组高密度脂蛋白对细胞活力的影响情况图。图10为不同加药组不同时间点对细胞活力的影响情况图。
具体实施方式
下面结合附图以及具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但本专利技术的保护范围并不限于此。本专利技术中，若非特指，所使用的原料和设备均为市售产品，下列实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双载药重组高密度脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒中，磷脂和胆固醇形成双分子层囊泡，囊泡内包载水溶性药物，双分子层内包载脂溶性药物，载脂蛋白A
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1结合于双分子层的亲水层上；所述水溶性药物包括铂类药物，所述脂溶性药物包括五环三萜类皂苷类药物。2.根据权利要求1所述的双载药重组高密度脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述铂类药物包括奥沙利铂、奈达铂、卡铂或顺铂；所述五环三萜类皂苷类药物包括α
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常春藤皂苷或人参皂苷Ro。3.根据权利要求2所述的双载药重组高密度脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述铂类药物为奥沙利铂；所述五环三萜类皂苷类药物为α
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常春藤皂苷。4.权利要求1～3任一项所述双载药重组高密度脂蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，包括：(1)双载药纳米粒的制备：将大豆卵磷脂、胆固醇和五环三萜类皂苷类药物溶于乙醇，得到有机相；将质量分数为5％的葡萄糖溶液预热，然后向其中加入铂类药物和脱氧胆酸钠，超声溶解，得到水相；在搅拌条件下将有机相缓慢注入水相中，继续搅拌反应，反应结束后减压旋蒸除去有机溶剂和部分水，然后冰浴探头超声，超声结束后过滤膜以减小粒径，使其粒径达到200nm以下，得到双载药纳米粒溶液；(2)双载药重组高密度脂蛋白纳米粒的制备：向双载药纳米粒溶液中加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：王刚，徐晓娜，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：