一种免疫增强剂与重组猪α－干扰素的组合用药物制造技术

本发明专利技术涉及一种免疫增强剂与重组猪α－干扰素的组合用药物。一种重组猪α－干扰素和对重组猪α－干扰素有增效作用的复方制剂，免疫增强剂选用维生素Ｃ、聚肌胞、乳酸杆菌及猪脾转移因子的一种或几种组合。在治疗疾病的同时能够刺激机体持续产生干扰素，从而形成持续的治疗过程，达到彻底治愈疾病的目的，同时能够增强机体的抵抗力，起到预防疾病的发生和防止继发感染的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，涉及一种重组猪a-干扰素和对重组猪a-干扰素有 增效作用的组合用药物。
技术介绍
猪流行性腹泻(PED)和猪传染性胃肠炎(TGE)是两种严重威胁养猪业的病毒性传 染病，其病原猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)同属于冠状病毒，形 态相似，繁殖的靶器官相同。这两种病暴发流行常常造成初生仔猪的大批死亡。现有的普 遍的解决方法就是打疫苗，然而由于种种原因，有时难免会造成免疫失败，爆发疾病，给诊 断和治疗带来一定困难。在免疫失败后往往依赖抗生素治疗，造成了耐药菌株的增加和交 叉感染的产生。因此找到一种更好的治疗预防药很重要。干扰素(英文简称IFN)是一种临床上广泛使用的具有广谱抗病毒、抗肿瘤及免 疫调节功能的生物药品，按其抗原性不同分为a、0和Y三类，并且a-干扰素有20个以 上的亚型，如干扰素a-2a、干扰素a-lb和干扰素a-2b等，0 -干扰素有4个亚型，干 扰素有1个亚型。猪干扰素是被研究最早的动物干扰素之一，20世纪80年代就有猪干扰素的相关 报道。近年来，对猪干扰素的诱导条件和理化活性有了进一步的研究，同时对猪白细胞干扰 素进行了大量的临床试验。研究表明，它对猪的许多病毒性传染病，如流行性腹泻、猪瘟、传 染性胃肠炎等，以及对牛病毒性腹泻、小鹅瘟，羔羊腹泻等都具有不错的疗效，试验证实猪 干扰素与牛羊等动物之间存在交叉活性。最近几年，猪干扰素a、0、Y基因的分子克隆与 序列分析获得成功。谢海燕等采用PCR技术克隆得到的IFN-a基因由501个核苷酸组成， 共编码166个氨基酸；夏春等克隆得到的猪0干扰素IFN-0基因片段有668个核苷酸， 编码186个氨基酸。曹瑞兵等从经ConA诱导培养的猪外周血白细胞中扩增出猪IFN-Y基 因，经改造后插入原核表达载体PRLG，并实现了在大肠杆菌中的高效表达，表达产物以包涵 体形式存在，经变性、复性、脱盐、凝胶层析纯化处理，重组猪IFN-Y具有较高的干扰素活 性。同时，万建青、陈涛等分别成功地在毕赤酵母表达系统和大肠杆菌表达系统中表达出重 组干扰素基因，表达产物占菌体总蛋白的比率在20% 35 %之间，表达产物具有的抗病毒 活性，为基因工程干扰素的规模化生产和应用提供了可能。然而，在用干扰素治疗疾病过程中，能刺激机体产生干扰素抗体(抗-IFN)，使得 治疗效果下降或病情反弹，有临床研究表明，较长时间的使用干扰素可使机体产生干扰素 抗体的几率在40%以上，使得治愈率和有效率并不是很高的干扰素的治疗率显著降低。为 了解决上述问题，本专利技术提供了一种重组猪干扰素的复方制剂，比单独使用猪干扰 素进行治疗具有更好的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种重组猪a -干扰素的复方制剂。—种重组猪a -干扰素的复方制剂，其特征在于其主要成分为猪a -干扰素和免 疫增强剂。一种重组猪a-干扰素的复方制剂，其特征在于免疫增强剂选用维生素C、聚肌 胞、乳酸杆菌和猪用转移因子中的一种或几种。一种重组猪a-干扰素的复方制剂，其特征在于它们的组合配比为每100万IU 重组猪a “干扰素与200 500毫克的维生素C组合；每100万IU重组猪a -干扰素与 0. 01 1毫克的聚肌胞组合；每100万IU重组猪a -干扰素与40 100毫克的乳酸杆菌 组合；每100万IU重组猪a -干扰素与40 100毫克的猪脾转移因子组合；其中优选于每100万IU重组猪a -干扰素与200毫克的维生素C组合；每100 万IU重组猪a -干扰素与1毫克的聚肌胞组合；每100万IU重组猪a -干扰素与40毫克 的乳酸杆菌组合；每100万IU重组猪a -干扰素与40毫克的猪脾转移因子组合。维生素C能提高白细胞和吞噬细胞功能，促进网状内皮系统和抗体形成，增强抗 应激的能力，维护肝脏解毒，改善心血管功能。聚肌胞又称为聚肌胞苷酸、聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸，由多分子核苷酸组合而成，在 体内能诱生干扰素，是一种高效干扰素诱导剂，对多种病毒引起的疾病有较好的疗效，并能 增强抗体形成和刺激巨噬细胞吞噬作用。乳酸杆菌制品可产生非特异性免疫调节因子，提高动物的免疫力。直接饲喂乳酸 杆菌制品可提高机体的抗体水平，产生干扰素，提高免疫球蛋白浓度和巨嗜细胞的活性，增 强机体免疫功能和抗病力。猪脾转移因子是从猪脾中提取的一类低分子肽与核苷酸复合物，具有激发免疫细 胞活性、调节免疫功能、增强机体非特异性细胞免疫功能等作用，被誉为T细胞活性的触发 剂，细胞免疫的增强剂、细胞免疫调节剂及干扰素产生启动剂。转移因子分子量小、无毒、无 抗原性、不起过敏反应，不产生对抗抗体且可超越种系界限应用等优点。自美国著名的免疫 学专家Lawrence发现和研究转移因子以来，世界各国不但进行了许多理论研究，而且进行 了大量的临床应用研究，使得转移因子成为目前应用广泛的增强免疫制剂。本专利技术的第一个目的是提供一种重组猪a-干扰素的复方制剂，其特征在于由重 组猪a-干扰素和免疫增强剂组成。其中免疫增强剂选用维生素C、聚肌胞、乳酸杆菌和猪 用转移因子中的一种或几种。本专利技术的第二个目的在于本专利技术药物可以根据需要做成各种剂型，在具体实施方 案中，其中所述的剂型包括喷雾剂、注射剂、冻干粉、口服粉剂等剂型。下面以重组猪a -干扰素与免疫增强剂针剂为例进行如下说明1.重组猪a -干扰素与维生素C的组合用水针剂处方重组猪a -干扰素3 X 104万IU15ml 60. 0g约 7. 2g (调 pH5. 0-7. 0) 0. 015g 0. 6g 甘露醇 维生素C碳酸氢钠EDTA焦亚硫酸钠 注射用水加至300ml 重组猪a-q扰素与维生素C的组合用水针剂工艺流程搅拌NaHC03 pH5．0—7．0 焦亚硫酸钠、甘露醇260ml新沸水+Vc--->溶液-----十溶液------------>分次缓慢加入 室温后加入重组猪0-干扰素溶液->注射用水至300ml-)测pH-个溶液-)微孔滤膜过滤(0．45pm)---．通COz祈燥(40℃>-个去离子水洗2件，灌装(30ml 十通C02叫过滤除菌(0．25pm封口 本专利技术提供的重组猪a-q扰素与维生素C的组合用药中，每毫升含有。 2．重组猪。-干扰素与聚肌胞的组合用针剂 聚肌胞注射液的制备工艺 (1)氯化钠-磷酸盐缓沖液，准确称取NaH，P。+．2H。oOo．262g，Na，HPO+-。取约500ml，45℃保温lo分钟； (2)准确称取聚肌苷酸o．5g，聚胞苷酸o．5g，分别加入已保温好的氯化钠-磷酸盐缓沖液60ml，搅拌使溶解。密封，于45℃保温20分钟； (4)上述已保温好的混合溶液加氯化钠-磷酸盐缓沖溶液定容至1000m]，灌装，灭菌，即得； 重组猪a-q扰素。t~lo~．7j．I[J 聚肌胞注射液1000ml 甘油5％o 氯仿o．3％ 硬脂酸锌1％ NaHCO，缓冲剂适量(调pH6．0-7．o) 重组猪a-q扰素与聚肌胞的组合用水针剂工艺流程搅拌NaHC03 pH6．0~7．0甘油、氯仿、甘露醇900ml聚肌胞注射液叫溶液------->溶液-----------十重组猪0．干扰素 分次缓慢加入硬脂酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组猪α－干扰素的复方制剂，其特征在于由以下成分组成：重组猪α－干扰素和免疫增强剂。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王小娥，
申请(专利权)人：天津瑞普生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]