一种检测转基因棉花基因组中外源基因拷贝数的方法、试剂盒及应用技术

本发明专利技术公开了一种检测转基因棉花基因组中外源基因拷贝数的方法、试剂盒及应用，一种转基因棉花基因组中外源基因拷贝数检测的方法。所述检测方法以UB7为内源参照基因，基于2

【技术实现步骤摘要】
ID NO：1
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2所示的内参基因引物对，及如SEQ ID NO：3
‑
10所示的外源基因引物对。
[0008]进一步地，所述试剂盒还包括含有内参基因UB7和外源基因NPTII、Cas9、35S、Ubi的标准质粒。
[0009]本专利技术的另一个目的在于提供以上所述试剂盒在检测转基因棉花基因组中外源基因NPTII、Cas9、35S、Ubi拷贝数中的应用。
[0010]本专利技术的再一个目的在于提供一种检测转基因棉花基因组中外源基因拷贝数的方法，包括如下步骤：
[0011]S1.提取转基因棉花基因组DNA；
[0012]S2.构建完成包含内参基因和多个外源基因的标准质粒；
[0013]S3.测定待测转基因棉花基因组DNA质量和浓度，稀释至同一浓度；
[0014]S4.分别根据内参基因和外源基因片段设计并合成引物对；
[0015]S5.扩增待测转基因棉花基因组DNA和标准质粒，分析实时荧光定量PCR数据，确定外源基因拷贝数。
[0016]进一步地，所述步骤S5采用标准质粒和待测样品进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测转基因棉花基因组中外源基因拷贝数的试剂盒，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQ ID NO：1
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2所示的内参基因引物对，及如SEQ ID NO：3
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10所示的外源基因引物对。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括含有内参基因UB7和外源基因NPTII、Cas9、35S、Ubi的标准质粒。3.权利要求1或2所述试剂盒在检测转基因棉花基因组中外源基因NPTII、Cas9、35S、Ubi拷贝数中的应用。4.一种检测转基因棉花基因组中外源基因拷贝数的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.提取转基因棉花基因组DNA；S2.构建完成包含内参基因和多个外源基因的标准质粒；S3.测定待测转基因棉花基因组DNA质量和浓度，稀释至同一浓度；S4.分别根据内参基因和外源基因片段设计并合成引物对；S5.扩增待测转基因棉花基因组D...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈雅，姚静，邓汉卿，陆青，聂尚海，燕东平，
申请(专利权)人：莫纳武汉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：